Qualitative Tests for Amino Acids and Proteins (Pages 12–20)

Vocabulary flashcards covering the key qualitative tests for amino acids and proteins described in the lecture notes (ninhydrin, xanthoproteic, Millon, Hopkins-Cole, Foley, nitroprusside, SAKAGUCHI, Pauly, and Biuret).

Reacción de Ninhidrina

Fundamento

Esta reacción detecta el grupo α-amino de aminoácidos, péptidos y proteínas. La ninhidrina reacciona con el grupo amino para formar un aldehído, CO2, NH3, y ninhidrina reducida. Esta ninhidrina reducida luego reacciona con el NH_3 y otra molécula de ninhidrina para formar un complejo de color azul-violeta.

Reacción Química General

1. Ninhidrina + Aminoácido (con grupo α-amino)\rightarrow Ninhidrina reducida + Aldehído + NH3 + CO2

2. Ninhidrina reducida + NH_3 + Ninhidrina\rightarrow Complejo de color azul-violeta

Reacción Xantoproteica

Fundamento

Esta prueba detecta aminoácidos aromáticos (tirosina, triptófano, fenilalanina) mediante la nitración de sus anillos bencénicos con ácido nítrico concentrado al calentar, formando derivados nitrados amarillos. En un medio alcalino, estos derivados se desprotonan a estructuras quinoides de color anaranjado.

Reacción Química General

1. Aminoácido aromático + HNO_3 (concentrado) + Calor\rightarrow Derivado nitrado amarillo

2. Derivado nitrado amarillo + Medio alcalino\rightarrow Estructura quinoide anaranjada

Test de Millon

Fundamento

Esta prueba detecta aminoácidos que contienen un grupo fenol, principalmente tirosina. El grupo hidroxilo fenólico de la tirosina se nitra en presencia de nitrato/nitrito mercúrico en ácido nítrico, produciendo nitrotirosinato mercúrico.

Reacción Química General

Grupo fenol (Tirosina) + Reactivo de Millón (Nitrato/nitrito mercúrico en HNO_3)\rightarrow Complejo rojo (Nitrotirosinato mercúrico)

Test de Hopkins-Cole (Adamkiewicz)

Fundamento

Esta prueba detecta la presencia de triptófano. El ácido glioxílico reacciona con el anillo indol del triptófano en un medio ácido (con ácido sulfúrico concentrado) para formar un producto de condensación coloreado.

Reacción Química General

Triptófano + Ácido glioxílico + H2SO4 (concentrado)→ Anillo rojo-violeta

Test de Foley (para aminoácidos que contienen azufre)

Fundamento

Este test detecta aminoácidos que contienen azufre, como la cisteína (por su grupo sulfhidrilo libre) y la metionina (después de hidrólisis). En un medio básico, el azufre se libera y reacciona con acetato de plomo para formar un precipitado negro de sulfuro de plomo.

Reacción Química General

Aminoácido con azufre (ej. Cisteína) + Medio básico + Acetato de plomo (Pb(CH3COO)2)→ PbS (precipitado negro)

Test de Nitroprusiato de Sodio

Fundamento

Esta prueba detecta aminoácidos con grupos sulfhidrilo (-SH) libres, principalmente cisteína. En un medio alcalino, el grupo sulfhidrilo reacciona con nitroprusiato de sodio (Na2[Fe(CN)5NO]) para formar un complejo de color violeta.

Reacción Química General

Cisteína (grupo -SH) + Medio alcalino + Nitroprusiato de sodio (Na2[Fe(CN)5NO]→ Complejo violeta

Test de SAKAGUCHI

Fundamento

Esta prueba detecta aminoácidos que contienen un grupo guanidino, específicamente arginina. El grupo guanidino reacciona con α-naftol en presencia de un agente oxidante (como hipobromito de sodio, NaBrO) y urea para formar un derivado quinonimínico anaranjado.

Reacción Química General

Arginina (grupo guanidino) + α-naftol + NaBrO + Urea\rightarrow Derivado quinonimínico anaranjado (Naftoquinonimina)

Test de Pauly

Fundamento

Esta prueba detecta aminoácidos con un anillo imidazol, principalmente histidina. La histidina reacciona con ácido sulfanílico diazotizado (formado a partir de p-sulfobenzaldehído y nitrito en medio ácido) para producir un colorante azo rojo o rojizo.

Reacción Química General

Histidina (anillo imidazol) + Ácido sulfanílico diazotizado (de p-sulfobenzaldehído + NaNO_2 + ácido)\rightarrow Complejo de colorante azo rojo/rojizo

Test de Biuret

Fundamento

Esta prueba detecta la presencia de enlaces peptídicos (dos o más). En un medio alcalino, los iones cobre(II) (Cu^{2+}) forman un complejo con los pares de electrones no compartidos de los átomos de nitrógeno en los enlaces peptídicos, produciendo un complejo quelato de color violeta. Se requieren al menos dos enlaces peptídicos para que ocurra la reacción.

Reacción Química General

Proteína/Péptido (con \ge 2 enlaces peptídicos) + Medio alcalino + CuSO_4\rightarrow Complejo de color violeta