cours 8 - variation de la réponse pharmacologique

chaque cellule possède ____ type(s) de récepteur(s) pour le même messager, ce qui inuit la même réponse biologique

plusieurs

2 types de spécificités que possède un récepteur

• de liaison

• de réponse biologique

type de récepteur qu’est le bêta-adrénergique

RCPG (7 domaines transmembranaires)

4 familles de RCPG

• famille A : rhodopsine-like, motif NPxxY et DRY, changement de conformation

• famille B : secretin-like, liaison à deux domaines

• famille C : venus fly trap domain → rapprochment de 2 sous-unités, réarrangement du domaine transmembranaire

• famille F : récepteur lisse SMO, Frizzled, Wnt

5 étapes générales de l’activation d’un RCPG

1- activation basale (liaison du ligand)

2- GTP remplace le GDP

3- protéine G alpha se dissocie de G bêta-gamma

4- G alpha se déplace vers effecteur et active les voies intracellulaires (hydrolyse du GTP)

5- Réassociation des protéines G

protéine G la plus lourde

alpha

4 domaines de liaison des protéines G alpha

• pour les nucléotides

• pour les sous-unités bêta-gamma (A-terminale)

• pour le récepteur (C-terminale)

• pour l’effecteur (régions 2, 3 et 4)

4 différents types de protéines G + voie intracellulaire associée

• Gs → stimulation adénylate cyclase → production AMPc → activation PKA (phosphorylation)

• Gi/Go → inhibition adénylate cyclase → diminution AMPc → inhibition PKA (pas de phosphorylation)

• Gq → stimulation phospholipase C → production IP3 et DAG

• G12/13 → activation de Rho

fonctionnement de la protéine kinase A (PKA)

• 2 sous-unités catalytiques et 2 régulatrices → associés lorsque niveaux d’AMPc sont bas (inactive)

• lorsque niveaux d’AMPc sont hauts → dissociation et donc activation

• permet de phosphoryler d’autres protéines grâce aux sous-unités catalytiques

enzyme qui dégrade l’AMPc en AMP

phosphodiestérase

fonctionnement de la phopholipase C (PLC)

• clive PIP2 en IP3 et DAG

• IP3 se lie à un récepteur du RE qui fait sortir du Ca2+

• DAG active la protéine kinase C (PKC) qui phosphoryle d’autres protéines

fonctionnement de G12/13

• α12/13-GTP active RhoGEF

• RhoGEF active RhoA

• échange GDP → GTP sur RhoA

• RhoA-GTP a des effets sur d’autres protéines

les unités G bêta-gamma sont dissociées seulement en conditions _____ et interagissent avec G alpha seulement lors ___

dénaturantes, de la liaison avec GDP,

3 fonctions biologiques de G bêta-gamma

• activation de AC 2/4 en présence de Gs

• activation de PLC-bêta-2

• GRK recruté à la membrane via domaine PH

isoformes de G bêta-gamma : b1gamma1 → se couple efficacement avec la ____, b2gamma2 → inhibe sélectivement les _____

rhodopsine, canaux calciques de type T

méthodes d’études qui permettent de suivre en temps réel les interactions et changements de conformation des RCPG dans les cellules : transfert d’énergie entre deux fluorophores excités par lumière → interaction si < 10 nm / transfert d’énergie sans lumière externe via luciférase → interaction si < 10 nm

BRET/FRET

HOMER et NHERF sont des exemples de voies de transduction du signal qui sont _____ de l’activation des protéines G

indépendantes (ne les utilisent PAS)

4 impacts des mutations sur les récepteurs

• GoF (activation constitutive ou augmentation sensibilité)

• LoF (réduction/absence de signalisation)

• modification de spécificité des ligands (élargissement spectre de reconnaissance)

• retard de désensibilisation (prolongation de l’activité)

** majorité = LoF