Inmunología I - Cap 12 (Abbas) - Activacion Linfocitos B

La activación de los linfocitos B induce

1. Proliferación Linfocitos B - Expansion clonal

2. Diferenciacion en: Celulas plasmaticas secretoras y linfocitos B de memoria

Respuestas dependientes de linfocitos T

• Generalmente frente a antígenos proteicos.

• Requieren la cooperación de linfocitos T CD4⁺ cooperadores.

• Promueven cambio de isotipo (de IgM a IgG, IgA o IgE), maduración de afinidad y generación de células plasmáticas de vida larga y linfocitos B de memoria.

• Su desarrollo es más lento pero produce anticuerpos de alta afinidad y duradero

Respuestas independientes de linfocitos T

• Activan los linfocitos B sin ayuda de T, generalmente frente a antígenos multivalentes repetitivos, como polisacáridos bacterianos.

• La respuesta es rápida, pero limitada a IgM de baja afinidad y no produce memoria duradera significativa.

• Están mediadas principalmente por linfocitos B de la zona marginal del bazo y linfocitos B-1 de mucosas.

Procesos clave en la respuesta humoral dependiente de T

• Cambio de isotipo (clase): permite producir diferentes clases de anticuerpos según el tipo de infección y tejido diana.

• Maduración de afinidad: selección de linfocitos B con receptores de mayor afinidad por el antígeno.

• Generación de memoria: asegura una respuesta rápida y más eficaz en exposiciones posteriores al mismo antígeno.

Las respuestas inmunitarias humorales empiezan con el reconocimiento específico del antígeno por el linfocito B en los órganos linfáticos secundarios. El antígeno se une a:

IgM e IgD de membrana situadas en los linfocitos B virgenes maduros, lo que genera señales necesarias para su proliferación y diferenciación a celulas plasmaticas.

V o F: El anticuerpo que secreta la célula plasmática tiene, en esencia, la misma especificidad que el anticuerpo original que sirvió de receptor para el antígeno en la superficie del linfocito B virgen.

V

¿Qué linfocitos B median principalmente las respuestas independientes de T?

Linfocitos B de la zona marginal del bazo y linfocitos B-1 de mucosas.

¿Cuál es la importancia biológica del cambio de isotipo y maduración de afinidad?

: Permite producir anticuerpos más específicos y duraderos, aumentando la eficacia frente a infecciones y facilitando la cooperación con linfocitos T.

Qué papel tienen los linfocitos B de memoria?

: Mantienen la capacidad de reconocer el antígeno en exposiciones posteriores y generar respuestas rápidas y eficaces

Importancia biológica de inmunidad humoral

• Las respuestas humorales permiten neutralizar toxinas, opsonizar microbios para facilitar su fagocitosis y activar el sistema del complemento (Via clasica!)

• La cooperación con linfocitos T potencia la especificidad y duración de la respuesta inmunitaria

V o F: Las respuestas primarias y secundarias de anticuerpos frente a los antígenos proteínicos difieren de forma cualitativa y cuantitativa

V

a. Las respuestas primarias son inducidas por todos los antígenos, lenta y menos “especifica“ por que los anticuerpos producidos tienen menos afinidad → Ej: Eres del primer grupo que coger exámenes

b. Las respuestas secundaria son mas rapidas y mas especificas: se producen mayores cantidades de anticuerpos de mayor “calidad“ → Ej: Eres el último exámenes y ya te dijieron que salio

Resumen cualitativo y cuantitativo: la respuesta secundaria no solo es más rápida y potente (cuantitativa), sino que genera anticuerpos más especializados y de mayor afinidad (cualitativa).

Las respuestas primarias

Ocurren cuando un antígeno proteico entra en contacto por primera vez con el organismo. En este caso:

• Se activan los linfocitos B vírgenes, es decir, aquellos que no han sido expuestos previamente al antígeno.

• La producción de anticuerpos es lenta y de menor cantidad (menor afinidad).

• Predomina la IgM, que es el primer isotipo producido, y la afinidad por el antígeno es relativamente baja, ya que no ha ocurrido maduración de la afinidad.

Las respuestas secundarias

Se producen cuando el mismo antígeno proinicos vuelve a ingresar:

• Se estimulan los linfocitos B de memoria, previamente generados tras la respuesta primaria.

• La respuesta es más rápida y más intensa, con producción de mayores cantidades de anticuerpos.

• Hay predominio de IgG y otros isotipos distintos de IgM, debido al cambio de isotipo que ocurrió durante la respuesta primaria.

• La afinidad de los anticuerpos es mayor, gracias a la maduración de la afinidad que experimentaron los linfocitos B de memoria.

Distintas subpoblaciones de linfocitos B responden de forma preferente a diferentes tipos de antígenos

a. Linfocitos B foliculares → Producenrespuestas de anticuerpos a antígenos proteínicos y estas respuestas de los linfocitos B requieren la colaboración de los linfocitos T cooperadores

b. Linfocitos B de la zona marginal del bazo y linfocitos B-1 de tejidos mucosos → Responden a antigenos multivalentes e independientes de T.

Linfocitos B foliculares (en órganos linfáticos secundarios):

• Responden preferentemente a antígenos proteicos.

• Sus respuestas requieren la ayuda de linfocitos T cooperadores (dependientes de T).

Estas preferencias no son absolutas, ya que algunos linfocitos B de la zona marginal pueden participar en respuestas dependientes de T y algunos B foliculares pueden generar respuestas independientes de T.

Linfocitos B de la zona marginal del bazo y linfocitos B-1 de tejidos mucosos:

• Responden a antígenos multivalentes, como polisacáridos.

• Sus respuestas son independientes de T, es decir, no necesitan ayuda de linfocitos T cooperadores.

Estas preferencias no son absolutas, ya que algunos linfocitos B de la zona marginal pueden participar en respuestas dependientes de T y algunos B foliculares pueden generar respuestas independientes de T.

Inicio de la activación del linfocito B

Para que se genere una respuesta de anticuerpos, los antígenos deben ser capturados y transportados a las zonas donde residen los linfocitos B en los órganos linfáticos secundarios (ganglios linfáticos, bazo, etc.).

La activación del linfocito B no depende únicamente del reconocimiento del antígeno, sino que también puede requerir señales adicionales generadas por:

• Respuestas inmunitarias innatas (activadas por microbios).

• Adyuvantes presentes en vacunas.

Estos eventos iniciales aseguran que el linfocito B esté correctamente estimulado y coordinado con la respuesta inmunitaria general.

Vías de captura y entrega del antígeno a los linfocitos B

• Antígenos solubles pequeños (<70 kDa) provenientes de tejidos:

  • Llegan a los ganglios linfáticos a través de los vasos linfáticos aferentes.

  • Se difunden hacia la zona de linfocitos B mediante conductos que conectan el seno subcapsular con los folículos linfáticos.

• Antígenos grandes o complejos (microbios o inmunocomplejos):

  • Son capturados por macrófagos del seno subcapsular y transportados a los folículos linfáticos.

• Inmunocomplejos en el bazo:

• Los antígenos unidos a anticuerpos o complementos pueden unirse a receptores de complemento CR2 (CD21) en los linfocitos B de la zona marginal. Estos linfocitos B pueden transportar los antígenos hacia los folículos para presentárselos a los linfocitos B foliculares.

• Antígenos polisacáridos:

  • Capturados por macrófagos de la zona marginal en el bazo.

  • Se presentan directamente a los linfocitos B de la zona marginal, sin necesidad de procesamiento previo.

¿Cómo llegan los antígenos pequeños y solubles (<70 kDa) a los linfocitos B?

A través de los vasos linfáticos aferentes hacia el seno subcapsular y mediante conductos hacia los folículos linfáticos.

¿Cómo se transportan los antígenos grandes o complejos a los linfocitos B?

Son capturados por macrófagos del seno subcapsular y llevados a los folículos linfáticos.

¿Qué función tienen los receptores de complemento CR2/CD21 en la activación de linfocitos B?

Permiten que los linfocitos B de la zona marginal capturen inmunocomplejos y los transporten a los folículos linfáticos para su presentación a linfocitos B foliculares.

¿Cuál es la diferencia entre el reconocimiento de antígenos por linfocitos B y T?

Los linfocitos B reconocen antígenos en su forma tridimensional intacta y no ha sido procesado por APC, mientras que los linfocitos T reconocen péptidos procesados presentados por MHC.

El BCR de los linfocitos B maduros se compone de:

• Inmunoglobulinas de membrana (IgM e IgD): reconocen y se unen al antígeno.

• Proteínas asociadas Igα e Igβ: transmiten señales intracelulares de activación.

Funciones clave del complejo BCR:

• Transmisión de señales bioquímicas: la unión del antígeno activa la fosforilación de las ITAMs en Igα e Igβ, reclutando y activando la cinasa SYK, iniciando la activación del linfocito B.

• Presentación del antígeno: el BCR internaliza el antígeno, lo procesa y lo presenta en moléculas MHC clase II para su reconocimiento por linfocitos T cooperadores.

Señales adicionales necesarias para la activación completa

• La unión del BCR al antígeno por sí sola, especialmente en antígenos dependientes de T, no es suficiente para inducir proliferación y diferenciación completa.

• Coestimuladores que potencian la activación:

  • Proteínas del complemento (ej. fragmento C3d reconocido por CR2/CD21).

  • Receptores de reconocimiento de patrones (PRR), como los TLR.

  • Linfocitos T cooperadores (en antígenos proteínicos).

Correceptor CR2 (CD21) y fragmentos del complemento

• CR2 se expresa en linfocitos B foliculares y de la zona marginal; su función es aumentar la señal del BCR cuando reconoce C3d, un fragmento del complemento unido al antígeno.

• La activación del complemento puede ocurrir:

  • Sin anticuerpos: vía alternativa o de la lectina.

  • Con anticuerpos: vía clásica.

• Algunos polisacáridos pueden activar el complemento y estimular la respuesta de anticuerpos independiente de T.

Receptores tipo Toll (TLR) en linfocitos B

• Los productos microbianos (PAMPs) activan TLR en linfocitos B, potenciando su activación.

• Ejemplos:

  • TLR5 → flagelina bacteriana.

  • TLR7 → ARN unicatenario endosómico.

  • TLR9 → ADN sin metilar rico en CpG endosómico.

• TLR4 está presente en linfocitos B murinos y reconoce LPS.

• Además, TLR activados en células mielocíticas estimulan indirectamente los linfocitos B mediante APRIL y BAFF, favoreciendo respuestas independientes de T.

Naturaleza del antígeno y activación del BCR

• Antígenos multivalentes (polisacáridos, agregados o series repetidas de proteínas) cruzan múltiples BCR, induciendo activación sin ayuda de T → Porque tienen epitopos identicos en cada molecula

• Antígenos monovalentes (proteínas globulares) requieren colaboración de linfocitos T cooperadores para proliferación y diferenciación.

Cambios fenotípicos inducidos por la unión del antigeno al BCR:

Parea: 

1. Mayor expresión de coestimuladores B7

2. Mayor expresión de receptores para citocinas T

3. Mayor expresión de proteínas antiapoptósicas 

4. Mayor expresión de CCR7

• Mayor expresión de CCR7 → migración a la zona de linfocitos T.

• Mayor expresión de coestimuladores B7 → activación de linfocitos T cooperadores.

• Mayor expresión de receptores para citocinas T → mejor respuesta a señales de T.

• Mayor expresión de proteínas antiapoptósicas → mayor supervivencia de linfocitos B.

Interacción con linfocitos T cooperadores

• La activación de linfocitos B frente a antígenos proteínicos depende de la cooperación con linfocitos T CD4+ que reconocen péptidos presentados en MHC clase II.

• Esta cooperación permite la proliferación, diferenciación, cambio de isotipo, maduración de afinidad y generación de memoria en los linfocitos B.

Tanto linfocitos B como T reconocen independientemente el antígeno proteínico en órganos linfáticos secundarios.

1. Los linfocitos T CD4+ vírgenes son activados por péptidos procesados en MHC II presentados por células dendríticas (DC).

2. Los linfocitos B vírgenes se activan por el mismo antígeno en su forma nativa, transportado hasta los folículos.

• Ambos tipos de linfocitos migran hacia los bordes de los folículos, formando la primera interacción entre B y T, que da inicio a la respuesta de anticuerpos.

• Posteriormente, algunas células migran a los folículos y forman centros germinativos, donde ocurre:

• Maduración de la afinidad (selección de células de alta afinidad).

• Cambio de isotipo.

• Generación de linfocitos B de memoria y células plasmáticas de larga vida.

Migración y encuentro de linfocitos B y T

• La frecuencia de linfocitos específicos frente a un epítopo es baja (1/10⁵ a 1/10⁶), por lo que linfocitos B y T activados deben encontrarse físicamente.

• Quimiocinas y receptores implicados:

  • Linfocitos T vírgenes: CCR7 → responde a CCL19 y CCL21 y se quedan en zona T.

  • Linfocitos B vírgenes: CXCR5 → responde a CXCL13 en folículos.

• Tras activación:

  • Linfocitos T reducen CCR7 y aumentan CXCR5 → migran hacia folículo.

  • Linfocitos B reducen CXCR5 y aumentan CCR7 y EBI2 → migran hacia zona T y bordes foliculares.

• Resultado: linfocitos B y T activados se acercan y se interaccionan.

¿Qué población de linfocitos T es principalmente responsable de la cooperación en respuestas de anticuerpos frente a antígenos proteínicos?

Linfocitos T cooperadores CD4+CD8− que reconocen péptidos presentados por moléculas MHC clase II.

¿Cuál es la función principal de los linfocitos B como presentadores de antígeno?

Internalizan antígenos mediante endocitosis, los procesan y presentan péptidos en MHC II a linfocitos T cooperadores, aumentando la eficiencia de la interacción T-B y la activación de la respuesta humoral.

¿Qué cambios quimiotácticos permiten el encuentro de linfocitos B y T activados?

• Linfocitos T activados: disminuyen CCR7 y aumentan CXCR5 → migran al folículo.

• Linfocitos B activados: disminuyen CXCR5 y aumentan CCR7 y EBI2 → migran hacia zona T.

• Resultado: linfocitos B y T activados se acercan e interactúan en los bordes foliculares.

Presentación de antígeno por linfocitos B (efecto hapteno-transportador)

• Los linfocitos B específicos internalizan el antígeno mediante endocitosis, lo procesan y presentan péptidos en MHC II a linfocitos T cooperadores.

• Esto permite que los linfocitos B sean mucho más eficientes presentando péptidos derivados del antígeno que otros B no específicos.

• Se requieren dos epítopos diferentes de la misma proteína:

  • Epítopo conformacional → reconocido por BCR de linfocito B.

  • Epítopo lineal → procesado y presentado en MHC II para linfocitos T cooperadores.

• Los anticuerpos resultantes suelen ser específicos frente a los determinantes tridimensionales del antígeno.

Por qué los anticuerpos que se secretan por la vía dependiente de T cooperadores son más específicos

Porque su BCR reconoce con alta afinidad un epítopo de la proteína, internalizando y presentando péptidos derivados de manera mucho más eficiente a los linfocitos T cooperadores específicos frente al antígeno.

V o F: Los péptidos presentados por el linfocito B al linfocito T cooperador son los mismos péptidos que inicialmente activaron los linfocitos T CD4+ vírgenes cuando le fueron presentados por las DC en la zona de los linfocitos T

V

Explica el efecto hapteno-transportador.

Haptenos (moléculas pequeñas no inmunogénicas) pueden inducir anticuerpos cuando están conjugados a proteínas transportadoras.

• Requiere linfocitos B específicos del hapteno y T cooperadores específicos de la proteína.

• Hapteno y transportador deben estar físicamente unidos.

• La interacción está restringida por MHC II: los linfocitos T cooperadores cooperan solo con los linfocitos B que expresan moléculas clase II del MHC idénticas a las implicadas en la activación inicial de los linfocitos T vírgenes por las DC.

• Base de las vacunas conjugadas frente a bacterias encapsuladas.

De este modo, los dos linfocitos que cooperan reconocen diferentes epítopos del mismo antígeno.

¿Por qué los linfocitos B específicos presentan antígenos con mayor eficiencia que otros B?

Porque su BCR reconoce con alta afinidad un epítopo de la proteína, internalizando y presentando péptidos derivados de manera mucho más eficiente a los linfocitos T cooperadores específicos frente al antígeno.

Haptenos

Son sustancias químicas pequeñas que pueden ser reconocidas por anticuerpos específicos, pero que no son inmunógenos por sí mismas.

Sin embargo, si los haptenos se acoplan a proteínas, que sirven de transportadores, los conjugados pueden inducir respuestas de anticuerpos frente a los haptenos

¿Qué molécula expresan los linfocitos T cooperadores activados que interactúa con CD40 en linfocitos B?

CD40L (CD154), un ligando de membrana trimérico homólogo al TNF.

¿Cuál es la función de la unión CD40L-CD40 en los linfocitos B?

Induce la proliferación y diferenciación de linfocitos B, aumentando la síntesis de inmunoglobulinas y permitiendo cambios como hipermutación somática y cambio de isotipo.

¿Qué proteínas citosólicas se asocian al CD40 tras la unión con CD40L y qué función cumplen?

Los TRAFs (TNF receptor-associated factors) se asocian al dominio citoplasmático de CD40 y activan cascadas de señalización que inducen la translocación de factores de transcripción como NF-κB y AP-1.

¿Cuál es la diferencia principal en la respuesta de linfocitos B en focos extrafoliculares versus centros germinativos?

• Extrafolicular: proliferación rápida, células plasmáticas de vida corta, baja hipermutación somática y maduración de afinidad.

• Centro germinativo: hipermutación somática elevada, cambio de isotipo, maduración de afinidad alta, generación de células plasmáticas de vida larga y células B de memoria.

¿Qué citocinas y factores de transcripción intervienen en las respuestas extrafoliculares y germinativas de linfocitos B?

• Extrafolicular: BLIMP1

• Centro germinativo: BCL-6

• Citocinas derivadas del linfocito T cooperador son esenciales para las respuestas en centros germinativos.

V o F: La activación del linfocito B en el foco extrafolicular genera una respuesta temprana de anticuerpos frente a los antígenos proteínicos y determina la consiguiente reacción del centro germinativo.

V

¿Qué ocurre en la activación extrafolicular del linfocito B?

Genera una respuesta temprana de anticuerpos de afinidad baja frente a antígenos proteínicos y produce células plasmáticas de vida corta (plasmoblastos), limitando la propagación inicial de la infección.

¿Dónde se localizan los focos extrafoliculares en el bazo y ganglios linfáticos?

• Bazo: porciones externas de la PALS (vaina linfática periarteriolar).

• Ganglios linfáticos: cordones medulares.

¿Qué cambios de quimioquinas experimentan los plasmoblastos para migrar hacia zonas específicas?

• Los plasmoblastos inhiben CXCR5 y CCR7 y activan CXCR4.

• Esto los hace migrar hacia zonas donde se producen ligandos de CXCR4, como CXCL12 en la pulpa roja o cordones medulares.

Transición a centros germinativos

• Algunos linfocitos B activados en la zona de contacto folículo-zona T no se convierten en plasmoblastos, sino en precursores de linfocitos B del centro germinativo.

• Las FDC (células dendríticas foliculares) liberan CXCL13, atrayendo a estos precursores hacia el centro del folículo.

• Estos precursores inhiben EBI2 y activan receptores que favorecen su confinamiento en el folículo.

• Este paso inicia la reacción del centro germinativo.

¿Qué son los precursores de linfocitos B del centro germinativo?

Linfocitos B activados que no se convierten en plasmoblastos; inhiben EBI2, responden a CXCL13 de FDC y se ubican en el folículo para iniciar la reacción del centro germinativo.

¿Qué son los linfocitos Tfh y cuál es su función principal?

Son linfocitos T cooperadores foliculares que ayudan a los linfocitos B en los centros germinativos, secretan IL-21 y contribuyen a la maduración de afinidad, cambio de isotipo y diferenciación de células plasmáticas y memoria.

¿Cuáles son las moléculas y citocinas clave expresadas por los linfocitos Tfh?

• Moléculas: CXCR5, ICOS, PD-1, BCL-6.

• Citocinas: IL-21, IL-4, IL-13, y pequeñas cantidades de IFN-γ.

¿Cómo se diferencian los linfocitos Tfh a partir de linfocitos T CD4+ vírgenes?

Dos pasos:

1. Activación inicial por células dendríticas (DC).

2. Activación posterior por linfocitos B activados, lo que estabiliza BCL-6 y promueve el destino Tfh.

¿Qué determina la elección entre un destino Th1/Th2/Th17 y Tfh?

La fuerza de la interacción TCR–MHC II con la DC: fuerte interacción promueve Tfh mediante expresión de BCL-6 e inhibición del IL-2Rα.

Qué ocurre en la reacción del centro germinativo?

Los linfocitos B realizan:

• Maduración de afinidad

• Cambio de isotipo continuo

• Generación de células plasmáticas de vida larga

• Generación de linfocitos B de memoria

Generación de linfocitos T cooperadores foliculares (Tfh)

• Entre 4 y 7 días tras la exposición al antígeno, los linfocitos B activados extrafoliculares inducen que los linfocitos T CD4+ previamente activados se diferencien en linfocitos Tfh.

• Características de los Tfh:

  • Expresan CXCR5 → migran hacia folículos por CXCL13.

  • Expresan ICOS, PD-1, IL-21 y factor de transcripción BCL-6.

• La diferenciación Tfh ocurre en dos pasos:

  1. Activación inicial por células dendríticas que presentan el antígeno.

  2. Activación posterior por linfocitos B activados, lo que estabiliza BCL-6 y promueve el destino Tfh.

• Señales clave: ICOS-ICOSL, interacciones de la familia SLAM y SAP.

  • SAP es crucial; su mutación causa síndrome linfoproliferativo ligado al X, con defectos en anticuerpos y linfocitos T.

. Función de los Tfh

• Secretan principalmente IL-21, necesaria para:

  • Desarrollo del centro germinativo.

  • Diferenciación de linfocitos B en plasmoblastos.

  • Selección de linfocitos B de alta afinidad.

• También secretan IL-4, IL-13 y algo de IFN-γ, que ayudan al cambio de isotipo.

La citocina definidora producida por los linfocitos Tfh es la

IL-21

a. Esta citocina es necesaria para el desarrollo del centro germinativo y contribuye a la generación de células plasmáticas en la reacción del centro germinativo.

b. Secretada por los linfocitos Tfh también facilita la selección del linfocito B en el centro germinativo B y la diferenciación delos linfocitos B activados en plasmoblastos.

¿Qué es la reacción del centro germinativo?

Es el proceso de diferenciación y selección de linfocitos B con receptores de alta afinidad dentro de los centros germinativos, donde ocurren la maduración de afinidad, cambio de isotipo y generación de células plasmáticas de vida prolongada y linfocitos B de memoria.

¿Cómo se estructuran los centros germinativos?

• Zona oscura: linfocitos B en proliferación rápida (centroblastos), hipermutación somática.

• Zona clara: selección de linfocitos B de alta afinidad (centrocitos), presencia de linfocitos Tfh y células dendríticas foliculares (FDC).

• Zona del manto: linfocitos B vírgenes que rodean al centro germinativo.

¿Cuál es la función de las células dendríticas foliculares (FDC)?

Presentan antígeno a linfocitos B mediante receptores de complemento (CR1, CR2, CR3) y Fc, formando una malla estructural; no expresan MHC clase II.

¿Qué ocurre en la zona oscura del centro germinativo?

Los linfocitos B proliferan y sufren hipermutación somática de los genes de la región V de las inmunoglobulinas, mediada por la enzima AID.

¿Qué sucede cuando los linfocitos B de la zona oscura migran a la zona clara?

Se encuentran con linfocitos Tfh y FDC, y los linfocitos B con BCR de alta afinidad son seleccionados para sobrevivir mediante señales de CD40 y citocinas; los de baja afinidad mueren por apoptosis.

¿Qué es la mutación repetitiva y selección en el centro germinativo?

Los linfocitos B seleccionados vuelven a la zona oscura para nuevas rondas de hipermutación y selección, aumentando progresivamente la afinidad de los anticuerpos.

¿Cómo se forman las células plasmáticas de vida prolongada?

Tras varias rondas de selección, los linfocitos B de alta afinidad salen del centro germinativo como plasmoblastos, migran a la médula ósea y se diferencian en células plasmáticas de vida larga.

Cómo se generan los linfocitos B de memoria?

Los linfocitos B que experimentan hipermutación somática limitada y afinidad relativamente baja salen precozmente del centro germinativo, recirculando entre órganos linfáticos secundarios.

La reacción del centro germinativo consta de diversos pasos secuenciales

1. Inicio:

   • Los linfocitos Tfh migran al folículo guiados por CXCL13-CXCR5.

2. Entrada de linfocitos B:

   • Linfocitos B activados por antígeno y CD40-CD40L regulan a la baja EBI2 y se desplazan al folículo formando el centro germinativo.

3. Proliferación en zona oscura:

   • Los linfocitos B proliferan formando la zona oscura.

   • Tiempo de duplicación: 6-12 h; un linfocito puede generar hasta 5.000 descendientes en 5 días.

4. Hipermutación somática:

   • Genes V de las Ig mutan mediante AID, aumentando la diversidad de receptores.

5. Migración a zona clara:

   • Linfocitos B dejan de proliferar, pierden CXCR4, pero mantienen CXCR5 y migran hacia CXCL13 en la zona clara con Tfh y FDC.

6. Selección de alta afinidad:

   • Los linfocitos B que capturan antígeno y reciben señales de Tfh sobreviven.

   • Los de baja afinidad mueren por apoptosis.

7. Mutación y selección repetida:

   • Linfocitos B seleccionados regresan a la zona oscura (CXCR4 reexpresado) para nuevas rondas de mutación y selección, madurando la afinidad.

8. Diferenciación en células plasmáticas:

   • Linfocitos B de alta afinidad se convierten en plasmoblastos, migran a la médula ósea y se diferencian en células plasmáticas de vida prolongada.

9. Formación de linfocitos B de memoria:

   • Linfocitos B con menor mutación y afinidad moderada salen precozmente del centro germinativo como células de memoria recirculantes.

---

Cambio de isotipo (clase) de cadena pesada

En las respuestas inmunitarias dependientes de linfocitos T, los linfocitos B activados inicialmente expresan IgM e IgD. Parte de esta población sufre un cambio de isotipo de cadena pesada, produciendo anticuerpos de clases distintas como IgG, IgA o IgE. Este cambio mantiene la especificidad antigénica (regiones variables), pero modifica la función efectora de los anticuerpos (regiones constantes).

Las citocinas producidas por linfocitos T cooperadores determinan el tipo de isotipo:

• IgG: respuestas frente a bacterias y virus; mediado por IL-21 en humanos, IFN-γ en ratones.

• IgE: defensa contra helmintos y mediación de alergias; dirigido por IL-4 e IL-13.

• IgA: secreciones mucosas; inducido por TGF-β, BAFF y APRIL, incluso sin linfocitos T.

Señales necesarias:

• CD40-CD40L y citocinas activan la enzima AID (activation-induced cytidine deaminase), esencial para el cambio de isotipo.

• Deficiencias en CD40, CD40L o AID generan respuesta dominada por IgM, con escaso cambio a otros isotipos.

¿Dónde ocurre el cambio de isotipo en linfocitos B dependientes de T?

Se inicia en los linfocitos Tfh extrafoliculares precentro germinativo y continúa en la zona clara del centro germinativo.

¿Qué hace la enzima AID en el cambio de isotipo?

Convierte citosinas (C) en uracilos (U) en ADN monocatenario de las regiones de cambio, lo que inicia la generación de roturas de ADN necesarias para la recombinación y el cambio de isotipo.

Qué son los transcritos en línea germinativa y para qué sirven?

Son transcritos no codificantes producidos a partir de promotores I específicos que atraviesan la región de cambio; facilitan la accesibilidad de AID y permiten la recombinación de ADN para el cambio de isotipo.

¿Cómo se mantiene la especificidad del anticuerpo tras el cambio de isotipo?

El exón VDJ, que codifica la región variable responsable del reconocimiento antigénico, permanece intacto; solo cambian las regiones constantes (CH) de la cadena pesada.

El mecanismo molecular de cambio de isotipo

La maduración de la afinidad

Es el proceso mediante el cual los anticuerpos adquieren mayor afinidad por un antígeno específico durante una respuesta humoral dependiente de linfocitos T. Esto ocurre gracias a la mutación somática de los genes de inmunoglobulinas (Ig) y la selección de los linfocitos B que producen anticuerpos con mayor afinidad.

¿Dónde ocurre la maduración de la afinidad?

En los centros germinativos de los folículos linfoides, principalmente en la zona oscura durante la proliferación de linfocitos B.

Qué es la hipermutación somática?

Mutaciones puntuales altamente frecuentes en los genes V de las inmunoglobulinas de linfocitos B proliferantes, especialmente en las regiones CDR, que aumentan la afinidad de los anticuerpos por el antígeno.

¿Qué enzima es clave para la hipermutación somática?

: AID (Activation-Induced Cytidine Deaminase), que convierte citosinas (C) en uracilos (U) en el ADN de genes V, iniciando mutaciones.

¿Qué mecanismos de reparación del ADN contribuyen a la hipermutación?

• UNG: elimina uracilos generando sitios abásicos

• APE1: escinde sitios abásicos

• MSH2 y MSH6: participan en reparación de desemparejados, reclutando ADN-polimerasas propensas a errores, ampliando la mutación a nucleótidos vecinos.

¿Qué ocurre después de la hipermutación somática?

: Los linfocitos B migran a la zona clara, donde solo sobreviven los que muestran receptores de alta afinidad por el antígeno presentado en FDC o en complejos con anticuerpos y complemento.

¿Qué señales promueven la supervivencia de linfocitos B de alta afinidad?

: Interacciones CD40-CD40L con linfocitos Tfh y citocinas proporcionadas por estos linfocitos.

Generación de linfocitos B de memoria

• Se generan principalmente en los centros germinativos, en respuestas dependientes de T.

• Sobreviven largos periodos gracias a BCL-2, proteína antiapoptótica.

• Pueden permanecer en el órgano linfático o recircular por sangre y tejidos.

Función

• Responden rápidamente a reexposición de antígenos.

• Tras la exposición secundaria, producen anticuerpos de alta afinidad de forma más rápida que los linfocitos B vírgenes.

Factores de transcripción y destino de linfocitos B

BCL-6

BLIMP1 e IRF4

BCL-6

• Mantiene la proliferación en centros germinativos.

• Reprime BLIMP1 y p53, permitiendo tolerancia a roturas de ADN y evitando la diferenciación prematura en células plasmáticas.

BLIMP1 e IRF4

• BLIMP1 reprime BCL-6 y PAX5, facilitando la conversión en células plasmáticas.

• IRF4 induce XBP1, protegiendo a las células plasmáticas del estrés por proteínas mal plegadas.

La retroalimentación por anticuerpo

Es un mecanismo por el cual las respuestas inmunitarias humorales disminuyen cuando se ha producido suficiente anticuerpo y hay presentes complejos anticuerpo-antígeno solubles.

a. La Ig de membrana del linfocito B y el receptor para las porciones Fc del linfocito B, denominado FcγRIIB, se agrupan gracias a los complejos anticuerpo-antígeno.

Esto activa una cascada de señales inhibidoras a través de la cola citoplasmática del FcγRIIB que termina la activación del linfocito B.

Zona oscura de centros germinativos

Está densamente poblada por linfocitos B en proliferación rápida y tiene un aspecto oscuro en los cortes histológicos teñidos con hematoxilina,

Zona clara de centors germinativos

En la que se seleccionan los linfocitos B de alta afinidad para sobrevivir y seguir diferenciándose, pero muchas células mueren, lo que da una tinción débil con el mismo colorante (fig. 12.11). La composición celular de estas zonas es diferente

V o F: Los linfocitos Tfh están presentes solamente en la zona clara

V