Εργαστήριο Γεν Ανθρώπου - 1) Απομόνωση Γενοωμικού DNA/PCR

0.0(0)

Studied by 0 people

0.0(0)

Call with Kai

Learn

Practice Test

Spaced Repetition

Match

Flashcards

Knowt Play

Card Sorting

1/3

There's no tags or description

Looks like no tags are added yet.

Study Analytics

Name	Mastery	Learn	Test	Matching	Spaced	Call with Kai

No study sessions yet.

4 Terms

1

New cards

με ποιό συστατικό/παράγοντα/διάλυμα υπερελικώνεται το DNA ύστερα από την απομόνωση από κύτταρα; Παρομοίως, με ποιο διάλυμα αφαιρούνται οι πρωτείνες του κυττάρου;

Αιθανόλη και φαινόλη

2

New cards

Τί τιμή πρέπει να έχει ο λόγος OD260/280 για να είναι καθαρό το δείγμα DNA και πώς υπολογίζουμε τη συγκεντρωσή του από αυτόν;

1,8 και OD260*αραίωση*50(τελικό όγκο (μλ), TV, master mix + DNA) για συγκέντρωση μg/ml

3

New cards

Οι διμεροί εκκινητών (primer dimers) εμφανίζονται σε τζελ ηλεκτροφόρησης (αγαρόζης) να έχουν υψηλό μοριακό βάρος (ΜΒ) ή χαμηλό;

χαμηλό, περίπου >100bp

4

New cards

ποιά είναι τα βασικά στάδια του PCR & ποιοί παράγοντες επηρεάζουν την αποτελεσματικότητά του;

αποδιάταξη DNA (denaturation): θέρμανση (>90’C) για να ανοίξει το δίκλωνο μόριο, 2. Υβριδισμός εκκινητών (annealing): χαμηλότερες θερμοκρασίες (50-60), 3. επιμήκυνσης: (72 βαθμούς) Τακ πολυμεράση
Παράγοντες = συγκεντρώσεις Mg2+ & dNTPs, #κύκλων, θερμοκρασία υβριδισμού, σχεδιασμός/ειδικότητα εκκινητών, ποιότητα/καθαριότητα DNA δείγμα