T6 | Crescimento bacteriano

Crescimento bacteriano Curva de crescimento em sistema fechado Métodos de medição do crescimento bacteriano Fatores ambientais que afetam o crescimento bacteriano

Curva de Crescimento em Sistema fechado

Expressão Matemática do Crescimento

Taxa de crescimento (k)

Taxa de crescimento específico.

→ Descreve a rapidez com que determinada bactéria se divide em um ambiente particular.

→ Exprime o nº de divisões por hora.

Tempo de geração de alguns microrganismos

Cultura contínua (Sistema aberto)

No laboratório pode manter-se uma cultura em crescimento balanceado (fase exponencial) durante periodos longos de tempo.

→ Num quimioestato tanto a taxa de crescimento como a densidade bacteriana podem ser controladas.

• A densidade bacteriana é mantida constante, mantendo uma concentração de um nutriente limitante.

• A taxa de crescimento é determinada pela taxa à qual, novo meio é adicionado à cultura.

O volume no recipiente de cultura é mantido constante:

• Meio fresco é adicionado à mesma taxa com que o meio de cultura é removido.

Medição do Crescimento Microbiano

Camara de Petroff-Hausser (25 quadrados/1mm²)

2. Enumeração Viável

Contagem de colónias

Métodos Indirectos

3. Turbidimetria

Usualmente mede-se a densidade óptica a 600nm

Inclui viáveis e não viáveis

Limite de sensibilidade: 10⁷ /ml

4. Medição da actividade metabólica

Produção de ácidos Impedância (= a medida da capacidade de um determinado circuito, de resistir ao fluxo de uma determinada corrente elétrica, quando aplicada tensão em seus terminais)

5. Medição dos constituintes celulares ATP

Turbidimetria

Factores ambientais que afectam o crescimento microbiano

Temperatura 1

Quando a temperatura é mínimo os processos de transporte são demasiado lentos e não crescimento bacteriano.

Quando a temperatura é demasiado elevada há desnaturação das proteínas, lise térmica e colapso da membrana citoplasmática.

Tipos de bactérias consoante a sua tolerância às temperaturas

pH

a_w (actividade da água)

Alguns organismos toleram ou necessitam mesmo de concentrações elevadas de NaCl

• Halotolerantes (osmotolerantes): toleram até 3M NaCl

• Halófilos extremos requerem 2.8-6.2M NaCl

Influência da pressão osmótica no crescimento

Limites aproximados de aw mínimos

Oxigénio

O oxigénio molecular em contato com as células é reduzido originando derivados tóxicos para as células.

O2 + e- → O2 - Radical superóxido

O2 -. + e- + 2H → H2O2 Peróxido de hidrogénio

H2O2 + e- + H+ H2O + OH Radical hidroxilo

Enzimas que degradam os derivados tóxicos do oxigénio

2O₂ -. + 2 H+ + (superoxido dismutase) → O2 + H2O2

2H2O2 catalase → 2H2O + O2

H2O2 + 2H+ + 2 e- peroxidase → 2H2O

Oxigénio 2

Sistemas para anaerobiose

Culturas