Buňka 2.21 - Hemokoagulace, biochemie trombocytů a leukocytů

Neutrofily jsou závislé na _________ (energetický substrát) + proč

Na glukóze - pro produkci NADPH -> produkce reaktivních forem kyslíku -> zabíjení bakterií

Po aktivaci neutrofilu je zvýšená spotřeba _________

Zvýšená spotřeba kyslíku a glukózy - oxidační vzplanutí

(leukocyty) Proteolytické enzymy + produkované kým

Elastáza, kolagenáza, katepsin G - produkované fagocyty

Inhibitory proteáz jsou __________ proteiny + jaké konkrétně

Plazmatické proteiny - α1-antitrypsin, α1-antichymotrypsin, α2-makroglobulin

Poměr proteáz k antiproteáz má vliv na ________

Na míru zánětu

Jaké jsou předpoklady pro plynulou cirkulaci krve?

Fludita krve, neporušenost a nesmáčivost povrchu endotelu

Jaký může být negativní efekt hemostázy?

1) Krevní sraženiny - tromby -> infarkt

2) Dysbalance hemostázy u sepse a nádorů

Jaký je rozdíl mezi hemokoagulací a hemostázou?

Hemostáza zahrnuje všechny fáze zástavy krvácení, hemokoagulace je část hemostázy - vytvoření fibrinové sítě

Fáze hemostázy

1) Reflexní vazokonstrikce

2) Aktivace a agregace destiček -> primární zátka (překrytí rány)

3) Hemokoagulace - vytvoření fibrinové sítě

4) Trombolýza

Hemokoagulace je proces přeměny __________ na __________

Rozpustného fibrinogenu na nerozpustný fibrin

Hemokoagulace je katalyzována ___________

Trombinem

Jak vypadá proteosyntetický aparát u trombocytů?

Není (vše co má, je připraveno předem)

Obsah granul trombocytů se využije na:

Vazokonstrikci, hemokoagulaci, reparaci

Zdroj energie pro trombocyty

Glukóza (aerobní glykolýza)

Trombocyty mají/nemají MIT

Mají -> aerobní glykolýza

Cytoplazma trombocytů obsahuje: + funkce

Mikrotubuly, aktin, myosin -> kontrakce destiček -> uvolnění obsahu granul

Fosfolipidy - pro aktivaci některých koagulačních faktorů

__________ umožňují uchycení destiček na poškozenou stěnu cévy a zabraňují přichycení na zdravou stěnu

Glykoproteiny

Vyjmenuj kroky působení trombocytů v hemostázi

1) Adheze

2) Aktivace

3) Agregace (primární a sekundární)

4) Degranulace

5) Tvorba bílého trombu

6) Propojení s koagulací

7) Hojení poranění

(hemostáza, trombocyty) Adheze

Vazba destiček na poraněním obnažený subendoteliální kolagen - vWF váže kolagen a GP Ib (na destičkách)

(hemostáza, trombocyty) Aktivace

Aktivace destiček buďto: obnaženým kolagenem, ADP, TXA2, PAF, trombin

-> Stanou se 3 věci:

1) Exprese receptorů GP IIb/IIIa -> umožní propojení destiček mezi sebou

2) Sekrece TXA2 -> aktivace dalších destiček

3) Změna tvaru (kontraktilní bílkoviny a cytoskelet) -> z diskovitého na ameboidní

(hemostáza, trombocyty) Agregace

Vlivem trombinu a dalších látek

Propojení díky fibrinogenu

a) Primární (reverzibilní) agregace - nutná pro stále se tvořící skuliny v endotelu a zacelování malých defektů

b) Sekundární (ireverzibilní) agregace - spojena s degranulací

(hemostáza, trombocyty) Degranulace

Uvolňovací reakce -> sekrece obsahu granul

(hemostáza, trombocyty) Tvorba bílého (destičkového) trombu

Rozpad a splynutí destiček -> viskózní metamorfóza

(hemostáza, trombocyty) Propojení s koagulací

Exprese destičkových fosfolipidů (DF 3) na povrchu -> podpora koagulace

(hemostáza, trombocyty) Hojení poranění (krok 7)

Látky s proliferativními účinky- PDGF

PDGF je zkratka pro ____________

Platelet Derived Growth Factor

(koagulace) Pro pochopení in vitro měření je důležitý starý/nový model

Starý model

Nový model koagulace platí in vitro/vivo

In vivo

(koagulace) Nový/Starý model je založen na kaskádové aktivaci koagulačních faktorů

Starý model

(koagulace) Nový/Starý model má 3 fáze + jaké

Nový model - iniciace, amplifikace, propagace

U nového modelu koagulace je klíčová vnitřní/vnější cesta a _________

Vnější cesta a trombin

U starého modelu koagulace je významnější vnitřní/vnější cesta

Vnitřní

Jaké části má starý model koagulace?

Vnitřní, vnější a společnou část

Základní skupiny koagulačních faktorů

1) Serinové proteázy

2) Bílkoviny sloužící jako kofaktory

3) Ca2+

4) Fibrinogen

5) Transglutamináza (XIII)

Koagulační faktory

I - fibrinogen

II - protrombin

III - tkáňový tromboplastin

IV - Ca2+

V - proakcelerin

VII - prokonvertin

VIII - antihemofilický

IX - Christmasův

X - Stuart-Prowerové

XI - PTA

XII - Hagemanův

XIII - fibrin stabilizující

(koagulace) Jaké jsou vitamin K dependentní faktory?

Koagulační faktory II, VII, IX, X + antikoagulační faktory - protein C a S

(koagulace) Vitamin K dependentní faktory jsou tvořeny v ________, ve formě _________

Játrech, ve formě neaktivních zymogenů

Vitamin ___ umožňuje karboxylaci γ uhlíku glutamátu -> γ-karboxyglutamát (Gla) + k čemu to je

Vitamin K - Gla váže Ca2+ a může tak poutat koagulační faktory k fosfolipidům

Pokud je primární hemostáza zprostředkovaná trombocyty nedostatečná, tak dochází k _________

Hemokoagulaci

Hemokoagulace má ___ fáze + jaké

2 fáze:

1) Aktivace protrombinu na trombin (vnitřní nebo zevní cestou)

2) Společná fáze - tvorba nerozpustného fibrinu a jeho stabilizace

(koagulace) Vnitřní a vnější cesta se spojují v místě _________

Faktoru X

Zevní cesta hemokoagulace je iniciována _____________, který aktivuje ____ na _____

Zevní cesta hemokoagulace je iniciována vyplavením tkáňového tromboplastinu, který aktivuje VII na VIIa

(koagulace) VIIa + ______ + ______ tvoří ________, což aktivuje ___ na ___

VIIa + fosfolipidy + Ca2+ tvoří vnější tenázu, což aktivuje X na Xa

(koagulace) VIIa aktivuje i faktor ___ z vnitřní cesty

IX

Vnitřní/zevní cesta je důležitá pro začátek krevního srážení

Zevní cesta

Vnitřní/zevní cesta je důležitá pro amplifikaci hemokoagulace

Vnitřní cesta

Vnitřní cesta je zahájena ________

Kontaktní fází

(hemokoagulace) Kontaktní fáze

Negativně nabitý povrch (poraněním obnažený kolagen a membrány trombocytů) váží faktor XII -> XIIa

XIIa přeměňuje _________ na _______, za přítomnosti ___________

Prekalikrein na kalikrein, za přítomnosti vysokomolekulárního kininogenu

Kalikrein posiluje přeměnu _____ na _____

XII na XIIa -> pozitivní zpětná vazba

XIIa aktivuje faktor ___

XI

XIa aktivuje faktor ____

IX

Faktor IX může být aktivován ______

VIIa nebo XIa

Faktor ____ je součástí vnitřního tenázového systému

IXa

Vnitřní tenázový komplex + funkce

Substrát - X

Enzym - IXa

Kofaktory enzymu - VIIIa, destičkové fosfolipidy, Ca2+

-> aktivace X na Xa

Faktor VIII je aktivován ______

Trombinem

(hemokoagulace) Xa je součástí ________ komplexu

Protrombinázového komplexu

Protrombinázový komplex + funkce

Substrát - protrombin

Enzym - Xa

Kofaktory enzymu - Va, destičkové fosfolipidy, Ca2+

-> protrombin na trombin

Faktor V je aktivován _________

Trombinem

________ štěpí fibrinogen na fibrin

Trombin

Centrální postavení v celé hemostáze má _________

trombin

Trombin aktivuje: (je toho hodně....)

1) Destičky a endotelie

2) Neutrofily a monocyty -> exprese TF

3) XIII -> stabilizace fibrinové sítě

4) V, VIII, XI -> amplifikace koagulace

5) Protein C -> antikoagulace

Faktor XIII je aktivován ________

Trombinem

(Nový model) Iniciace

Koagulaci startuje TF a VIIa (VIIa je vždy trochu v krvi) -> komplex TF-VIIa -> aktivace IX a X

VIIa aktivuje jiné VII

Xa aktivuje další VII a hlavně generuje vznik malého množství trombinu (nestačí k tvorbě fibrinu) -> přebírá vedení koagulace

(Nový model) Amplifikace

Trombin aktivuje V, VIII, XI

XIa aktivuje další IX

Trombin také aktivuje trombocyty a leukocyty -> exprese negativně nabitých fosfolipidů na povrchu -> vazba Va, VIIIa, IXa

Trombin také ještě aktivuje endotelie -> přeladění do prokoagulačního stavu

(Nový model) Amplifikace - výsledek

Vznik většího množství trombinu

Vytvoření reakčních povrchů s navázanými molekulami aktivovaných faktorů pro komplementaci komplexů vnitřní tenázy a protrombinázy

(Nový model) Propagace

X vazba na vnitřní tenázu -> Xa

Xa + Va -> protrombinázový komplex -> produkce trombinu (trombin burst) -> dostatečné pro přeměnu fibrinogenu na fibrin

Nestabilní fibrin stabilizován XIIIa

Stavba fibrinogenu a jeho změna na fibrin

3 globulární domény (2 periferní - D a jedna centrální - E)

Domény vzájemně spojeny 2 tyčinkami - trojitými šroubovicemi - α, β a γ

2 peptidové ocásky na centrální doméně - fibrinopeptidy A a B (z α a β šroubovice)

Trombin odštěpuje oba fibrinopeptidy -> fibrin-monomer -> spontánní polymerace -> fibrin-polymer

Zpevnění fibrinové sítě

XIIIa (trombinem a Ca2+) = transglutamináza -> tvoří kovalentní vazby mezi α a γ řetězci fibrinu

Amidový zbytek glutaminu reaguje s NH2 skupinou lysinu -> γ-glutamyl-ε-lysyl můstek

Regulace koagulace

Rovnováha prokoagulačních a antikoagulačních dějů

Hlavní antikoagulační faktory:

1) Proud krve

2) Produkty intaktního endotelu - prostacyklin, NO, trombomodulin

3) Antitrombin III

4) Protein C a S

Antitrombin III patří mezi _______

Serpiny - inhibitory serinových proteáz

Nejdůležitějším inhibitorem serinových proteáz je _________

Antitrombin III

Co dělá antitrombin III?

Váže trombin, IXa, Xa, XIa, XIIa -> inaktivace faktorů

________ zvyšuje schopnost antitrombinu III vázat faktory

Heparin

Trombofilní stav = ________

Vrozený deficit AT III

Protein C/S je kofaktorem proteinu C/S

Protein S je kofaktorem proteinu C

Protein C je aktivován ________

Komplexem trombomodulinu s trombinem

(antikoagulace) Funkce proteinu C

Štěpí neenzymatické faktory Va a VIIIa

Leidenská mutace faktoru V

Mizí štěpné místo pro APC (aktivovaný protein C) -> prodloužený poločas Va -> trombofilní stav

Nejčastější vrozený trombofilní stav

Leidenská mutace faktoru V

Leidenská mutace faktoru V je nebezpečná v případě __________

Kombinace s dalšími prokoagulačními faktory (hormonální antikoncepce, kouření, ...)

_______ štěpí fibrin na rozpustný fibrin degradační produkty

Plasmin

Plasmin vzniká z _______

Plasminogenu

Měření hemokoagulace

Vnitřní cesta:

aPTT (aktivovaný parciální tromboplastinový čas) - norma = 26-50s

Vnější cesta:

1) Quick test - 14 s = 100 %

2) INR (international normalize ratio) = 80-120 %