Vectores de Clonación y Técnicas de ADN Recombinante

Flashcards de vocabulario sobre vectores de clonación (bacteriófagos, cósmidos, vectores de levadura y retrovirus) basadas en las notas de clase.

Bacteriófagos (Fagos)

Virus que infectan específicamente a las bacterias, inyectando su ADN para replicarse dentro del huésped.

Ciclo lítico

Patrón de infección bacteriana donde la liberación de nuevas partículas de fago se asocia con la lisis (rotura) de la célula bacteriana.

Infección lisogénica

Se caracteriza por la retención de la molécula de ADN del fago en la bacteria huésped, posiblemente durante miles de divisiones celulares.

Profago

La forma integrada y quiescente del ADN de un fago dentro del genoma de la bacteria huésped.

Fago Lambda ($\lambda$)

Fago bacteriófago templado con un genoma de $48.5\,kb$ cuyo ADN es lineal pero posee extremos cohesivos.

Sitios cos

Extremos de cadena sencilla de 12 nucleótidos con secuencias complementarias en el genoma lineal de $\lambda$ que pueden emparejarse por bases.

Vectores de inserción

Vectores en los que se elimina parte del ADN opcional y se introduce un sitio de restricción único; pueden acomodar de $6-7\,kb$ de ADN.

Vectores de reemplazo

Vectores donde el ADN opcional está en un fragmento de relleno (stuffer fragment) flanqueado por sitios de restricción, permitiendo acomodar hasta $25\,kb$.

Empaquetamiento in vitro

Proceso de reconstitución de una partícula viral infecciosa en un tubo de ensayo mezclando ADN de fago con una mezcla de proteínas de fago.

Cósmido

Vector híbrido que combina un plásmido y el fago $\lambda$ (sitio cos), capaz de clonar fragmentos grandes de ADN de hasta $45\,kb$.

Biblioteca genómica

Conjunto de clones recombinantes que contiene todo el ADN presente en un organismo individual.

Colifagos filamentosos

Virus como M13, f1 y fd que contienen una molécula circular de ADN de cadena sencilla y solo infectan bacterias con pili F.

Forma replicativa (RF)

Estado de ADN de doble cadena al que se convierte el ADN monocatenario del fago tras entrar en la célula.

Vector lanzadera (Shuttle vector)

Vector capaz de replicarse en dos especies diferentes, como E. coli y levadura (Saccharomyces cerevisiae).

YEps (Yeast episomal plasmids)

Plásmidos derivados del plásmido de $2\,μm$ que pueden replicarse de forma autónoma o integrarse en los cromosomas de la levadura.

YIps (Yeast integrative plasmids)

Plásmidos bacterianos que portan un gen de levadura pero carecen de origen de replicación para levadura, sobreviviendo mediante la integración en el ADN cromosómico.

YACs (Yeast Artificial Chromosomes)

Cromosomas artificiales que contienen ARS, TEL y CEN, capaces de transportar fragmentos de ADN de hasta $3000\,kb$.

ARS (Autonomously replicating sequence)

Secuencia necesaria para la replicación autónoma en células de levadura.

CEN (Secuencia de centrómero)

Elemento en vectores de levadura requerido para la segregación adecuada de los cromosomas durante la división celular.

LTR (Long Terminal Repeat)

Secuencia en genomas de retrovirus necesaria para la integración en el genoma del huésped.

Tropismo

La capacidad de un virus para infectar un tipo particular de célula huésped.

Seudotipado (Pseudotyping)

Alteración de la proteína de la envoltura viral para modificar su tropismo, permitiendo infectar células que originalmente no podía.

Mutagénesis insercional

Riesgo donde la integración aleatoria del genoma viral interrumpe genes endógenos, pudiendo activar oncogenes y aumentar el riesgo de cáncer.

Complementación de virus

Proceso donde el genoma de un virus salvaje proporciona las proteínas faltantes para que un vector viral deficiente pueda replicarse.