Bài 4-Xét nghiệm chẩn đoán virus

Các phương pháp chính chẩn đoán

-PP virus học:nuôi cấy virus trên canh cấy TB

-PP miễn dịch học:dùng KN-KT→pp phổ biến nhất.Tuy còn khiếm khuyết nhưng dễ thực hiện

-PP sinh học phân tử:Phát hiện gene đặc hiệu của virus và ký chủ

Chẩn đoán trực tiếp và gián tiếp

-Chẩn đoán trực tiếp:phát hiện virus/thành phần virus

-Chẩn đoán gián tiếp:phát hiện sản phẩm do virus kích thích tạo ra(kháng thể)

2 Phương pháp miễn dịch phổ biến

Miễn dịch huỳnh quang(IF-immunofluorescence)-ngưỡng nhạy 0,1 ug/ml

ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay-xét nghiệm hấp phụ MD lk enzyme)-ngưỡng nhạy 0,0001 ug/ml

Miễn dịch huỳnh quang(IF-immunofluorescence)

Dùng KN có gắn chất huỳnh quang(fluorochrome) như rhodamin, fluorescein

Ưu điểm:nhạy, thấy trực tiếp vị trí KN trong mô

Nhược điểm: cần máy đặc biệt và khó thao tác

ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)

Dùng KT/KN có gắn enzyme→khi tạo phức KT-KN thì enzyme đổi màu

Nhận diện: HBsAg, anti-HIV, anti-HCV, rubella IgG/IgM, nồng độ KN/KT trong máu bệnh nhân

Ưu điểm:độ nhạy, đặc hiệu cao, có thể định lượng

Khuyết điểm:máy móc đặc thù

Phản ứng ngăn ngưng kết hồng cầu(HI-hemaglutinin inhibit)

Các virus có gai hemaglutinin gây ngưng kết hồng cầu.Nếu cơ thể có KT đặc hiệu vs hemaglutinin→cạnh tranh và ngăn ngưng kết hồng cầu.

Ta pha loãng dần huyết thanh ng bệnh ra các ống→cho 1 lượng hồng cầu và virus vào→chọn ống pha loãng nhiều nhất còn ngăn ngưng kết hồng cầu

Hiệu giá kháng thể của phản ứng là độ pha loãng tại ống đó(VD 1:160)

phương pháp MD cạnh tranh và k cạnh tranh

Cả 2 đều dùng quy trình tương tự nhau.Khác ở loại kháng thể gắn enzyme ta dùng

Cạnh tranh→dùng KT đặc hiệu KN→càng nhiều KT trong huyết tranh bắt màu càng ít

Không cạnh tranh→KT đặc hiệu Fc của KT huyết thanh→bao nhiêu KT huyết tranh thì bắt màu bấy nhiêu