Tecnicas Histologicas

¿Cuál es el orden cronológico de los 7 pasos de la técnica histológica convencional para microscopía óptica?

1. Obtención de la muestra,

2. Fijación

3. Deshidratación

4. Aclaramiento (Aclaración)

5. Inclusión

6. Microtomía (Corte)

7. Desparafinizacion

8. Hidratacion

9. Coloracion

10. Montaje

¿Qué sustancia química es el fijador de uso más común y cuál es su mecanismo de acción principal?

El formaldehído (formol al 10%). Su función es detener la autólisis celular mediante la formación de enlaces cruzados entre las proteínas del tejido.

Durante el paso de deshidratación, ¿por qué se utilizan concentraciones de alcohol en gradación creciente en lugar de alcohol al 100% de golpe?

Para evitar la distorsión osmótica severa y el encogimiento brusco del tejido, lo que alteraría la morfología real de las células.

¿Qué reactivo químico se utiliza en el aclaramiento y por qué es indispensable antes de la inclusión en parafina?

El xilol (o xileno). Es indispensable porque el alcohol usado para deshidratar no es miscible con la parafina; el xilol extrae el alcohol y permite que la parafina líquida penetre el tejido.

¿Cuál es el grosor promedio estándar en micrómetros (μm) de un corte de tejido realizado con el micrótomo para microscopía óptica?

Entre 5 y 10 micrómetros (μm).

En la tinción estándar H&E, ¿cuál es el colorante básico, qué carga neta posee y a qué componentes celulares se une?

La hematoxilina. Tiene carga positiva (catiónico) y se une a componentes ácidos con carga negativa (aniónicos), principalmente los ácidos nucleicos del núcleo celular (ADN y ARN).

Define el término 'Basófilo' en histología y da dos ejemplos de estructuras celulares con esta propiedad.

Es la propiedad de un componente celular de teñirse con colorantes básicos (como la hematoxilina). Ejemplos: El núcleo celular (cromatina) y el retículo endoplásmico rugoso (por sus ribosomas).

En la tinción estándar H&E, ¿cuál es el colorante ácido, qué carga neta posee y qué tonalidad le otorga al citoplasma celular?

La eosina. Tiene carga negativa (aniónico), se une a componentes básicos del tejido (como las proteínas citoplasmáticas y el colágeno) y les otorga una tonalidad rosa, roja o naranja.

Si observas una célula con un citoplasma intensamente acidófilo (eosinófilo), ¿qué tipo de organelo esperarías encontrar en gran abundancia en su interior?

Mitocondrias (ya que sus membranas y matriz están saturadas de proteínas transportadoras y enzimas, las cuales interactúan con la eosina).

¿Cuál es la diferencia conceptual exacta entre el 'Límite de Resolución' y el 'Poder de Resolución' de un microscopio?

El Límite de Resolución es la distancia mínima a la que deben estar dos puntos para verse separados. El Poder de Resolución es la capacidad del instrumento para lograr esa separación.

¿Cuál es el límite de resolución cuantitativo del ojo humano, del microscopio óptico de campo claro y del microscopio electrónico de transmisión (MET)?

Ojo humano: 0.2 milímetros (mm). Microscopio óptico: 0.2 micrómetros (μm). MET: 0.2 nanómetros (nm).

¿Qué tipo de microscopio utilizarías si necesitas observar la topografía tridimensional y detallada de la superficie exterior de una célula ciliada?

Microscopio Electrónico de Barrido (MEB).

¿Qué microscopio es el ideal para estudiar células vivas en cultivo sin necesidad de fijarlas ni teñirlas químicamente?

Microscopio de Contraste de Fases.