Microbiologia e Colture Cellulari - Revisione Esame

Flashcards di microbiologia basate su domande d'esame relative a colture cellulari, cinetica di crescita, tecniche di isolamento e sterilizzazione presso l'Università degli Studi di Perugia.

Minimal Bactericidal Concentration (MBC)

La concentrazione più bassa di un farmaco in grado di uccidere almeno il $99.99\%$ della popolazione microbica.

Minimal Inhibitory Concentration (MIC)

La concentrazione più bassa di un farmaco in grado di inibire la crescita microbica dopo $18$-$24$ ore.

Tempo di generazione ($g$)

Il tempo necessario affinché la popolazione raddoppi; è costante solo nella fase esponenziale di crescita e per cellule appartenenti allo stesso ceppo in condizioni identiche.

Crescita diauxica

Fenomeno di crescita a due fasi che si verifica in presenza di due fonti di carbonio (es. glucosio e lattosio); la sintesi di beta-galattosidasi inizia nella fase lag tra le due fasi di crescita.

Test dei micronuclei

Analisi che consente di visualizzare il DNA danneggiato sotto forma di piccoli nuclei con dimensioni pari a $1/3$ di quelle del nucleo originale.

Test di Ames

Test genetico per testare la genotossicità di una sostanza utilizzando i batteri come biosensori.

Colony Forming Unit (CFU)

Concetto statistico che sottolinea come la quantificazione in conta vitale permetta una stima della densità cellulare, basandosi sulla constatazione che non sempre una colonia ha origine da una singola cellula.

Terreno di Mc Conkey

Terreno complesso, differenziale e selettivo che contiene cristalvioletto e rosso neutro; serve per selezionare i batteri Gram-negativi e differenziare i fermentanti il lattosio.

Terreno definito

Tipologia di terreno di coltura specifica per specie di cui si conoscono le esigenze nutrizionali, contenente nutrienti definiti esattamente per qualità e quantità.

Sterilizzazione frazionata

Tecnica finalizzata all'ottenimento della sterilità di un terreno di coltura che permette di eliminare le eventuali endospore presenti.

Analisi della torbidità

Metodo di stima della densità cellulare basato sull'impiego di uno spettrofotometro o nefelometro; la retta di taratura teorica perde linearità per valori di $OD > 0.5$.

Fase di latenza (Lag phase)

Fase metabolicamente attiva (soprattutto a livello di trascrizione) che si allunga se il terreno di coltura è diverso da quello dell'inoculo o se l'inoculo proviene da una fase stazionaria.

Selezione diretta

Tecnica ad alta efficienza che agisce a livello della singola cellula e consente lo screening di circa $10^7$ cellule per piastra.

Selezione indiretta

Procedura funzionale alla selezione di mutanti auxotrofi nutrizionali che prevede l'utilizzo di un terreno selettivo e uno permissivo (es. replica plating).

Tempo di riduzione decimale

Il tempo necessario affinché la densità cellulare ($DC$) di un campione venga ridotta di un fattore $10$.

Camera contaglobuli Thomas-Zeiss

Strumento per la conta totale diretta dove il fattore di diluizione ($4 \times 10^6$) serve per convertire a $mL$ la media delle cellule contate per quadratino elementare.

Isolamento a "streak-plate"

Procedura qualitativa per l'ottenimento di colture pure in cui la separazione delle cellule si ottiene attraverso un numero programmato di strisciamenti su una singola piastra.

Isolamento a "spread-plate"

Tecnica che utilizza una spatola di vetro per distribuire le cellule; se quantitativa, permette la conta vitale contestualmente all'isolamento.

Biosaggio

Saggio biologico che permette di stimare la concentrazione di un composto valutandone l'attività su un sistema biologico o la risposta di un biosensore.

Biosensore

Organismo impiegato in un biosaggio che deve rispondere in maniera specifica allo stimolo del principio attivo oggetto di studio.

Crescita aritmetica

Andamento tipico degli organismi auxotrofi quando la concentrazione di un fattore limitante ($FL$) è inferiore alla concentrazione limite per cellula.

Sterilizzazione del vetro

Processo che può avvenire in autoclave (semplice o frazionata), tramite calore diretto (becco bunsen) o in stufa per circa $3$ ore.

Conta vitale

Tecnica che calcola la densità delle cellule vive e vitali in un campione espresso come $CFU/ml$, richiedendo spesso una diluizione preliminare per ottenere tra $30$ e $300$ colonie.

Filtro Buchner

Strumento composto da imbuto, beuta e membrana filtrante utilizzato per prelevare microrganismi da sospensioni liquide, effettuare isolamenti o conte.