Techniques Histologiques - UE5

Flashcards de vocabulaire fondées exclusivement sur les notes de cours de techniques histologiques du Professeur B. Panthu.

Histologie

Spécialité médicale et biologique qui étudie au microscope la structure des tissus (du grec « histos » signifiant tissu et « logos » signifiant science).

Théorie cellulaire

Théorie élaborée en 1838-1839 par Schleiden et Schwann définissant la cellule comme l'unité fonctionnelle et structurale autonome de tout être vivant.

Pouvoir de résolution de l'œil humain

Limite de perception visuelle à l'œil nu, incapable de distinguer des structures d'une taille inférieure à $300\,\mu\text{m}$.

Pouvoir de résolution de la microscopie photonique

Résolution standard permettant de distinguer des structures cellulaires et tissulaires d'environ $5\,\mu\text{m}$.

Pouvoir de résolution de la microscopie électronique

Résolution standard de $50\,\text{nm}$, pouvant atteindre l'échelle de l'angström ($0{,}1\,\text{nm}$) sur des coupes ultrafines.

Culture in vitro

Maintien et multiplication de cellules hors de l'organisme dans des conditions contrôlées (milieu nutritif, facteurs de croissance) avec capacité de division.

Culture ex vivo

Maintien en survie de cellules ou tissus prélevés directement sur un organisme vivant sans incitation à la multiplication prolongée.

Bleu Trypan

Colorant vital permettant d'évaluer la viabilité cellulaire : les cellules mortes se colorent en bleu tandis que les cellules vivantes l'expulsent et restent incolores.

Fixation

Étape d'immersion de l'échantillon dans un fixateur (formol ou liquide de Bouin) pour figer les structures, précipiter les protéines et empêcher la dégradation enzymatique ou bactérienne.

Coupe en paraffine

Technique histologique de référence pour la morphologie en MO, incluant une déshydratation à l'alcool, un bain de toluène, une inclusion en paraffine fondue et une découpe au microtome rotatif ($3$ à $5\,\mu\text{m}$).

Coupe en résine

Technique d'enrobage en résine époxy (avec de l'oxyde de propylène comme solvant) permettant des coupes semi-fines ($1\,\mu\text{m}$) ou ultrafines ($< 1\,\mu\text{m}$, $200\,\text{nm}$) pour la ME et la MO.

Coupe en congélation

Méthode d'enrobage dans un agent cryoprotecteur, congélation dans l'isopentane à $-80\,^\circ\text{C}$ et l'azote liquide à $-196\,^\circ\text{C}$, puis coupe au cryostat ($20\,\mu\text{m}$) préservant les lipides et activités biochimiques.

Coupe au vibratome

Technique de coupe au microtome à lame vibrante réalisant des coupes épaisses ($50$ à $500\,\mu\text{m}$) sans fixation ni inclusion, préservant la structure spatiale de l'organe et les propriétés antigéniques.

Chromophore

Groupement chimique présent au sein d'un colorant responsable de la couleur qu'il émet.

Auxochrome

Groupement chimique d'un colorant responsable de sa fixation permanente sur la cible par des liaisons d'affinité acides/basiques.

Coloration HES

Coloration standard combinant l'Hématoxyline (noyau en violet/bleu), l'Éosine (cytoplasme en rose) et le Safran (collagène de la matrice extracellulaire en jaune).

Trichrome de Masson

Coloration combinant l'Hématoxyline (noyau en violet/bleu), le Rouge ponceau (cytoplasme rose, hématies rouge vif) et le Vert lumière ou Bleu d'Aniline (matrice extracellulaire en vert ou bleu).

Violet de Crésyl

Colorant basique (coloration de Nissl) spécifique du tissu nerveux se fixant sur les structures acides, permettant de repérer la substance grise et les somas neuronaux.

May-Grünwald-Giemsa (MGG)

Coloration histologique de référence utilisée en hématologie pour différencier les différentes cellules sanguines (érythrocytes, leucocytes, plaquettes) sur frottis.

Coloration PAS (Acide Périodique de Schiff)

Technique histochimique mettant en évidence les glucides complexes et glycoprotéines en rose fuchsia par oxydation préalable des groupements glycol en fonctions aldéhydes.

Coloration de Perls

Technique histochimique révélant le fer ferrique ($\text{Fe}^{3+}$) sous forme d'un précipité bleu-vert (bleu de Prusse) après réaction avec le ferrocyanure de potassium.

Histoenzymologie

Méthode consistant à mesurer et localiser in situ une activité enzymatique spécifique en incubant le tissu avec un substrat transformé en précipité coloré.

Immunohistologie

Technique de détection in situ des protéines utilisant des anticorps spécifiques (principalement des IgG) dirigés contre des épitopes d'antigènes cibles.

Anticorps polyclonaux

Mélange d'anticorps issus du sérum d'un animal immunisé, capables de reconnaître plusieurs épitopes différents d'un même antigène.

Anticorps monoclonaux

Anticorps hautement sélectifs issus d'un unique clone de lymphocytes B, dirigés spécifiquement contre un seul épitope d'un antigène.

Méthode PLA (Proximity Ligation Assay)

Système d'amplification en immunohistologie permettant de détecter et localiser des interactions ou contacts très proches ($< 100\,\text{nm}$) entre deux protéines cibles.

Hybridation in situ (HIS)

Technique de biologie moléculaire in situ utilisant des sondes d'acides nucléiques marquées complémentaires pour détecter et localiser des séquences d'ADN ou d'ARN.

Expérience de Jamieson et Palade (1967)

Expérience d'autoradiographie par la méthode Pulse-Chase démontrant la séquence de transport intracellulaire des protéines : Réticulum Endoplasmique, Appareil de Golgi, puis Vésicules de sécrétion.

Microscope à contraste de phase inversé

Microscope optique dont les objectifs se situent sous la platine, adapté aux cellules vivantes en culture mais produisant des artéfacts caractéristiques en halo.

Microscope à contraste de phase interférentiel

Microscope optique inversé utilisant un dédoublement du faisceau lumineux pour supprimer les artéfacts en halo et générer une impression de relief.

Microscope confocal

Microscope optique à balayage laser et diaphragme de détection permettant d'éliminer la flou hors-foyer pour reconstruire des images 3D avec une résolution de $0{,}2\,\mu\text{m}$ ($200\,\text{nm}$).

Microscopie électronique à transmission (MET)

Technique d'imagerie sous vide utilisant un faisceau d'électrons à travers une coupe ultrafine contrastée aux métaux lourds (ex: osmium), fournissant une résolution de $50\,\text{nm}$ à $0{,}1\,\text{nm}$.

Microscope à effet tunnel

Microscope en champ proche mesurant le courant d'électrons entre une pointe fine et une surface conductrice sous vide, permettant une analyse au niveau atomique.

Microscope à force atomique (AFM)

Microscope en champ proche balayant un échantillon avec une pointe flexible pour mesurer la topographie 3D et la dureté de surfaces biologiques ou non, y compris vivantes.