Biochimica Clinica Applicata Medica

Flashcards di biochimica clinica basate sulle lezioni riguardanti biomarcatori, diagnostica molecolare, analisi del sangue, funzionalità renale ed epatica, e ormoni.

Biochimica Clinica

Branca della medicina di laboratorio che si occupa dell'esecuzione di test biochimici per valutare lo stato istopatologico di una persona.

Farmacia dei Servizi

Progetto normato dal Decreto ministeriale del $16$ dicembre $2010$ che permette l'esecuzione di test diagnostici di prima istanza direttamente in farmacia sotto supervisione del farmacista.

Biomarcatore

Macromolecola (come $DNA$ o proteine) o strutture cellulari che indicano, entro certi limiti, una condizione di fisiologia o patologia generale o di un singolo tessuto.

Diagnostica Molecolare

Branca della medicina di laboratorio che quantifica e identifica biomarcatori di natura acida nucleica ($DNA$ e $RNA$).

Sensibilità Analitica

La più bassa concentrazione di biomarcatore che un test può rilevare in un campione.

Specificità Analitica

La capacità assoluta di un test di individuare esclusivamente il biomarcatore di interesse senza interferenze.

Cut-off

Valore soglia o limite definito a priori che separa una condizione fisiologica ($F$) da una condizione patologica ($P$).

Sensibilità Diagnostica

Misura della frequenza della positività di un test in presenza della patologia considerata.

Specificità Diagnostica

Misura della frequenza della negatività di un test in assenza della patologia considerata.

Evidence Based Laboratory Medicine (EBLM)

Approccio basato sull'evidenza che imposta il ragionamento clinico in termini probabilistici attraverso ipotesi, risposta al test e decisione terapeutica.

Variabilità Preanalitica

Fase che precede il test (prelievo, trasporto, conservazione) in cui possono avvenire errori che alterano il risultato finale.

Siero

Parte liquida del sangue ottenuta senza anticoagulante, privata dei fattori di coagulazione come fibrinogeno, protrombina, fattore $V$ e fattore $VIII$.

EDTA

Anticoagulante (tappo viola) che agisce sequestrando gli ioni calcio indispensabili per la cascata coagulativa.

$$RNasi$$

Enzimi ubiquitari ed estremamente stabili che degradano l'$RNA$, richiedendo l'uso di inibitori come il guanidinio tiocianato durante l'estrazione.

Legge di Lambert-Beer

Legge secondo cui l'assorbanza ($A$) è direttamente proporzionale alla concentrazione ($c$) del campione: $A = \text{costante} \times c \times \text{cammino ottico}$.

Spettrofotometro NanoDrop

Strumento che consente di quantificare acidi nucleici in microvolumi, valutando i rapporti $A260/A280$ per le proteine e $A260/A230$ per i solventi.

Elettroforesi in campo pulsato (PFGE)

Variante dell'elettroforesi che applica due differenze di potenziale alternate per separare frammenti di genoma molto grandi (milioni di basi).

$PCR$ (Reazione a Catena della Polimerasi)

Tecnica di amplificazione selettiva del $DNA$ ideata da Kary Mullis nel $1983$ che sfrutta cicli termici e la $Taq$ polimerasi.

Temperatura di Melting ($T_m$)

Temperatura alla quale il $50 \times 100$ della doppia elica di $DNA$ è denaturata; calcolata come $T_m = 4(G+C) + 2(A+T)^\text{ $\circ$C}$.

Real-Time $PCR$ ($RT-PCR$)

Tecnica che permette di quantificare il $DNA$ iniziale ($N_0$) monitorando la fluorescenza durante la fase esponenziale dell'amplificazione.

Ciclo Soglia ($C_t$)

Numero di ciclo al quale il segnale di fluorescenza diventa visibile superando un valore soglia stabilito; è inversamente proporzionale alla concentrazione iniziale del bersaglio.

Sonda TaqMan

Sonda di idrolisi marcata con un fluoroforo (Reporter) e uno smorzatore (Quencher) che emette fluorescenza quando viene degradata dall'attività esonucleasica della $Taq$ polimerasi.

Enzimi di Restrizione

Endonucleasi che tagliano il $DNA$ in corrispondenza di sequenze specifiche e spesso palindromiche, producendo estremità piatte (Blunt) o sporgenti (Sticky).

Anemia Falciforme

Patologia causata dalla mutazione puntiforme del gene dell'emoglobina (Valina al posto dell'Acido Glutammico) che porta alla perdita del sito di restrizione per l'enzima $MST2$.

Southern Blotting

Metodica che permette di individuare specifiche sequenze di $DNA$ trasferendo frammenti da un gel di agarosio a una membrana di nylon tramite capillarità.

$ELISA$ (Dosaggio non competitivo)

Tecnica immunochimica a sandwich che utilizza due anticorpi per quantificare un antigene; il segnale cromatico generato è direttamente proporzionale alla quantità di antigene.

HMG-CoA Reduttasi

Enzima chiave nella biosintesi del colesterolo e bersaglio farmacologico delle statine; la sua attività è regolata dal sistema $SREBP/SCAP$.

Recettore dell'Insulina

Recettore a singolo dominio transmembrana con attività tirosin-chinasica intrinseca che attiva la via di segnalazione $IRS-1/PI3K/AKT$.

$AKT$ (Protein Kinasi B)

Proteina chiave nella trasduzione del segnale insulinico che promuove la traslocazione dei trasportatori $GLUT4$ sulla membrana cellulare.

Diabete Mellito di Tipo $2$

Condizione di insulino-resistenza spesso associata all'obesità, caratterizzata da iperglicemia cronica nonostante la sovrapproduzione iniziale di insulina.

Emoglobina Glicata ($HbA1c$)

Parametro che valuta la concentrazione media di glucosio nel sangue negli ultimi $120$ giorni; valori superiori al $6.5 \times 100$ sono indicativi di diabete.

Epcidina

Ormone peptidico prodotto dal fegato che regola l'omeostasi del ferro inibendo la ferroportina, riducendo l'assorbimento intestinale e il rilascio dai depositi.

Glutatione ($GSH$)

Tripeptide (Glutammato-Cisteina-Glicina) che funge da principale antiossidante cellulare, neutralizzando i radicali liberi passando dalla forma ridotta ($GSH$) a quella ossidata ($GSSG$).

Proteina C Reattiva ($PCR$)

Proteina di fase acuta positiva prodotta dal fegato; i suoi livelli plasmatici possono aumentare di migliaia di volte in risposta a infiammazioni sistemiche.

Procalcitonina ($PCT$)

Biomarcatore altamente specifico per infezioni batteriche gravi e sepsi; i suoi livelli plasmatici guidano la terapia antibiotica.

Ematocrito

Rapporto percentuale tra il volume occupato dai globuli rossi e il volume totale del sangue; valore fisiologico nell'adulto circa $35-45 \times 100$.

Ittero

Condizione clinica caratterizzata dalla colorazione giallastra della cute e delle sclere dovuta a livelli di bilirubina superiori a $2-2.5 \text{ mg/dL}$.

$VFG$ (Velocità di Filtrazione Glomerulare)

Parametro che misura la capacità filtrante dei nefroni; viene spesso stimato attraverso formule che utilizzano la concentrazione di creatinina plasmatica.

Creatinina

Prodotto finale del metabolismo della fosfocreatina muscolare; viene escreta dal rene e funge da biomarcatore della funzionalità glomerulare.

$ALT$ (Alanina Aminotrasferasi)

Enzima citoplasmatico presente principalmente negli epatociti; il suo aumento nel sangue è un marcatore specifico di danno cellulare epatico.

$TSH$ (Ormone Tireostimolante)

Ormone prodotto dall'adenoipofisi che regola la produzione di $T_3$ e $T_4$ da parte della tiroide; è il test più sensibile per diagnosticare ipo o ipertiroidismo.

Troponine Cardiache ($TnI$ / $TnT$)

Proteine del complesso contrattile dei cardiomiociti; rappresentano i biomarcatori più specifici e sensibili per la diagnosi di infarto acuto del miocardio.