Clonage Moléculaire et Microorganismes Recombinants

Flashcards sur le clonage moléculaire et les microorganismes recombinants, incluant des définitions clés et des concepts importants.

Qu'est-ce que le clonage moléculaire ?

Le clonage moléculaire consiste à isoler un fragment d’ADN et à le multiplier à l’identique en utilisant la multiplication cellulaire.

Qu'est-ce qu'un vecteur recombinant ?

C'est un vecteur dans lequel une séquence d’ADN d’intérêt est placée, et qui est introduit dans une cellule-hôte.

Quel est le vecteur le plus couramment utilisé en clonage moléculaire ?

Le plasmide bactérien.

Quelles sont les trois générations de plasmides ?

1ère génération : plasmides naturels, 2ème génération : ajout de sites de restriction et résistance à des antibiotiques, 3ème génération : séquences facilitant la sélection et expression.

Quel est le rôle d'une enzyme de restriction ?

Elle coupe de manière définie l’ADN double brin pour le clonage.

Qu'est-ce qu'un système de sélection blanc-bleu ?

C'est un système basé sur l'expression de la β-galactosidase pour distinguer les bactéries recombinantes.

Pourquoi est-il nécessaire de vérifier le clonage ?

Pour s'assurer que l'insert est bien le fragment d’ADN d’intérêt.

Quel est l'objectif de la transformation bactérienne ?

Permettre à une bactérie de récupérer de l’ADN nu de son environnement.

Comment se produit le choc thermique lors de la transformation ?

Cela implique de plonger les bactéries de 4°C à 42°C pour créer des fissures dans la membrane.

Quelle est la différence entre clonage directionnel et non directionnel ?

Le clonage directionnel utilise deux enzymes de restriction pour orienter l'insert, tandis que le clonage non directionnel utilise une seule enzyme, permettant un positionnement aléatoire.