ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI PARACETAMOL VÀ CAFEIN TRONG CHẾ PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC

Nguyên tắc Định lượng đồng thời Paracetamol và Cafein bằng phương pháp HPLC?

Hỗn hợp paracetamol và cafein trong dược phẩm sau khi chiết có thể được tách và định lượng bằng phương pháp HPLC với đầu dò dãy diode quang do cấu trúc của hai dược chất này có các nối đôi liên hợp và các nhóm mang màu.

Hóa chất, dung môi dùng trong bài này?

• acid acetic băng, methanol đạt tiêu chuẩn phân tích

• methanol và nước cất đạt tiêu chuẩn dùng cho sắc ký lỏng

Cột sắc ký dùng trong bài?

Cột pha đảo C18

Màng lọc dùng trong bài?

• Màng lọc RC 0,45 micromet: dùng cho hỗn hợp dung môi hữu cơ và nước

Hệ thống lọc pha động dưới áp suất giảm

Điều kiện sắc ký trong HPLC?

• Pha động: nước - methanol - acid acetic băng (69:28:3, tt/tt/tt)

• Cột sắc ký: cột pha đảo C18

• Đầu dò PDA: bước sóng phát hiện 273 nm

• Tốc độ dòng: 1ml/phút

• Thể tích tiêm mẫu: 10 microlit

• Nhiệt độ cột: 45 +- 1 độ C

Pha động trong bài?

• nước - methanol - acid acetic băng (69:28:3)

Tất cả các dung dịch (pha động, dung dịch mẫu chuẩn và mẫu thử, dung môi rửa hệ thống sắc ký và cột) trước khi đưa vào hệ thống sắc ký đều phải làm gì?

Tất cả đều phải được lọc qua màng lọc RC 0,45 micromet

Pha động trước khi tiến hành sắc ký cần phải làm gì?

Pha động cần phải được khử khí bằng siêu âm trước khi tiến hành sắc ký

Trước khi tiến hành phân tích mẫu, cần phải làm gì? Giữa các lần tiêm mẫu cần rửa kim bằng gì?

Trước khi tiến hành phân tích mẫu, cần phải cân bằng hệ thống ít nhất 30 phút bằng pha động.

Giữa các lần tiêm mẫu cần rửa kim bằng methanol

Sau khi phân tích mẫu xong phải rửa cột bằng gì?

Sau khi phân tích mẫu xong, phải rửa cột bằng nước cất dùng cho sắc ký trong 60 phút và sau đó là methanol trong 30 phút, tốc độ dòng 1 ml/phút

Cột sắc ký trong HPLC nên được bảo quản trong?

Cột sắc ký nên được bảo quản trong hỗn hợp dung môi methanol-nước (40:60) hoặc acetonitril-nước (90:10)

Tính toán hàm lượng hoạt chất trong một viên?

S (T): diện tích pic trung bình của hoạt chất trong dung dịch mẫu thử

S (C): diện tích pic trung bình của hoạt chất trong dung dịch mẫu chuẩn

P: khối lượng trung bình của viên (mg)

m: khối lượng bột thuốc cân (mg)

C: nồng độ hoạt chất trong dung dịch mẫu chuẩn

D độ pha loãng

Sơ đồ khối máy HPLC?

1. Bình chứa dung môi

2. Bộ phận khử khí

3. Hệ thống bơm cao áp

4. Bộ phận tiêm mẫu

5. Lọc tiền cột

6. Cột sắc ký

7. Đầu dò

8. Bộ phận xử lý và ghi tín hiệu

Khi phân tích bằng HPLC, peak của paracetamol hay cafein ra trước?

Paracetamol ra trước, Cafein ra sau.

Trục hoành là trục thời gian lưu

• Thời gian lưu của Paracetamol: 4,068 phút

• Thời gian lưu của Cafein: 4,628 phút

Thời gian lưu của Paracetamol < Cafein: peak của Paracetamol xuất hiện trước