Mikroskopia-mikroskopy z ogółu

Kontrast fazowy polega na …

przemianie zmian fazowych światła w natężeniowe

Powstawanie obrazu fazowego: …

Na próbkę pada równoległa wiązka monochromatycznego światła z kondensora (światła bezpośredniego)→po przejściu przez preparat ulega zagięciu (światło dyfrakcyjne)

Światło bezpośrednie skupia się w …

ognisku obiektywu

Światło dyfrakcyjne skupia się w

płaszczyźnie obrazowej

Światło bezpośrednie ma … natężenie i skupia się na … obszarze, dyfrakcyjne ma … natężenie i skupia się na … obszarze

duże, małym, małe, dużym

Zmiany w świetle bezpośrednim powoduje …, zmienia jego fazę, nie amplitudę

płytka fazowa

Zasada kontrastu fazowego

d-światło dyfrakcyjne

b-światło bezpośrednie

t-światło przechodzące do okularu

t=b+d

Światło opisane wektorem b tworzy …, a t …

tło próbki, obszary o wyróżnionym n

Jeżeli np>nśr to przesunięcie fazowe jest …, jeżeli nśr>np to jest …

ujemne, dodatnie

Przesunięcie w fazie światła zmienia t, a przy tym samym b i d, co wpływa na różnice amplitud i natężeń światła.

Tak

Kontrast próbki jest wprost proporcjonalny do …

pzesunięcia fazowego

Schemat mikroskopu polaryzacyjnego

W mikroskopie polaryzacyjnym polaryzator …, a analizator

zmienia światło niespolaryzowane na spolaryzowane, bada kierenek polaryzacji światła przechodzącego przez próbkę

Nikol to …

konstrukcja z pokrojonych dwóch szpatów islandzkich

Mechanizm mikroskopu polaryzacyjnego

światło pada na nikol i rozdziela się na promienie zwyczajny i nadzwyczajny→tylko nadzwyczajny idzie przez nikol→światło przed analizator ma I=I0cos²alpha

alpha-kąt między płaszczyznami polaryzacji polaryzatora i analizatora

Schemat mikroskopu fluoroscencyjnego

Zasada działania mikroskopu fluorescencyjnego: …

preparat znakowany fluoroforem→światło o określonej lambda odbija się od zwierciadła dichroicznego i pada na preparat→fluorofor jest wzbudzony i świeci się→te światło idzie do detektora

Zwierciadło dichroiczne to zwierciadło które …

odbija fale o wąskim zakresie długości, resztę przepuszcza

Najczęstsze fluorofory: …

-rodamina B

-fluorosceina

Schemat mikroskopu konfokalnego

Schemat mikroskopii fluorescencyjnej z całkowitym wewnętrznym odbiciem

Wzór na głębokość wnikania: …

upsilon-kąt padania

n1,2-współczynnik załamania pryzmatu i środowiska

W mikroskopie elektronowym preparat jest oświetlany przez …

strumień elektronów

Wzór na długość fali elektronów

h-stała Plancka

Schemat mikroskopu transmisyjnego

Działanie mikroskopu skaningowego

silnie zogniskowana wiązka elektronów wybija elektrony wtórne z preparatu→elektrony rejestrowane jako prąd→wiązka jest przesuwana po preparacie cewkami indukcyjnymi→obraz powstaje z rozkład przestrzennego napięcie elektronów wtórnych

Mikroskop skaningowy używa … . Mierzony jest … Tunelowanie jest warunkiem do powstania obrazu

ostrza o grubości jednego atomu na końcu, przepływ ładunku z tunelowania

Zasada działania mikroskopu sił atomowych

Powierzchnia preparatu jest penetrowana przez ostrze na belce→w oddziaływaniu z atomami preparatu belka zgina się→zmiana położenia spowodowana przez zmianę kąta odbicia→sygnał generowany przez detektor używa się do zmiany położenia preparatu co powoduje dociśnięcie belki

Zasada działania mikroskopu sił atomowych w tapping mode

Belka wykonuje ruch drgający z częstością ok.9kHz i amplitudą kilku nm→ostrze styka się tylko w momencie maksymalnego wychylenia belki→analizowane są zmiany amplitudy drgań belki→im bliżej jest ostrze, tym mniejsza amplituda

Przy trybie tappingowym próbka ma postać …

kropli na płytce z miki, czasem preparat jest myty wodą destylowaną i zraszany gazem azotowym, przygotowanie dwuwymiarowych konstrukcji

W trybie tappingowym białka są zanurzone w …

warstwie lipidiowej, stanowiącej matrycę dla białek