Enzymatisk analyseprincip

Hvad gør en enzymatisk analyse?

Omdanner substrat til produkt, som måles

Hvad er endepunktsmåling?

Reaktionen går til ligevægt, og signalet aflæses

Hvad afgør signalændringen?

Substratkoncentrationen og produktets absorbans

Hvilken rolle har enzymer?

Øger hastighed, katalyserer processer, hjælper reaktionen til ligevægt

Hvad er en koblet reaktion?

En hjælpereaktion, der øger signal eller produktdannelse

Hvordan vælger man bølgelængde?

Stor forskel i absorption mellem substrat og produkt

Formel for absorbansændring?

ΔA = [Produkt] × molar absorptivitet × cuvette-længde

Hvad måler kinetisk analyse?

Reaktionshastigheden over tid

Hvordan bestemmes hastigheden v?

Ændring i substrat eller produkt pr tid

Hvilke metoder kan bruges?

Absorbans, reflektometri eller andre signaler

Michaelis-Menten ligning?

v = (Vmax × [S]) / (KM + [S])

Hvad betyder lav KM?

Høj affinitet mellem substrat og enzym

Hvad sker når [S] « KM?

Førsteordens kinetik: v proportional med [S]

Hvordan tester man førsteordens kinetik?

Plot In([S]) vs tid; hvis lineær, er det 1 orden

Hvordan bestemmes [S] i praksis?

Standardkurve, mål v, omsæt til koncentration

Koblede reaktioner ved kinetik?

Kan bruges, hvis trin er afstemt

Valg af bølgelængde?

Stor forskel mellem substrat og produkt