MICROBIOLOGIA CONTINUA 1

Definición microbiología

Ciencia que se encarga del estudio y análisis de los microorganismos

Definición microbiología médica

Estudio de los microorganismos patógenos y su interacción con el huésped humano, incluyendo los mecanismos de infección, respuesta inmune, diagnóstico, tratamiento y prevención de enfermedades infecciosas.

¿Cuáles son los microorganismos acelulares?

Virus, Viroide y priones

¿Cuáles son los microorganismos celulares?

• Procariotas (bacterias)

• Eucariotas (algas, protozoarios, hongos y mohos)

¿Los microorganismos acelulares que son?

Microorganismos capaces de replicarse y trasladarse entre diferentes células.

Composición de los virus

• ADN o ARN

• Capa proteica llamada cápside

• Envoltura lipídica

Composición de los viroides

• Una sola cadena de ARN circular

• No codifican proteínas

• No transcriben ADN

• Infectan plantas y hongos

Composición de los priones

• Cadena de aminoácidos

• No presenta material genético

• Proteína mal plegada capaz de transmitir su forma mal plegada a otras variedades de la misma proteína

¿Los microorganismos celulares que son?

Poseen una estructura celular: membrana celular que delimita su contenido interno y sus estructuras internas especializadas

¿Qué son los procariotas?

Organismos unicelulares que carecen de núcleo definido y de organelos membranosos

¿Qué son las eucariotas?

Organismos caracterizados por tener células con un núcleo definido y organelos membranosos

Procariotas: clasificación según la pared celular

Importante para elegir el tratamiento antibiótico correcto

Estafilococos aureus, ¿qué tipo de gram es?

Gram positivo

Escherichia coli, ¿qué tipo de gram es?

Gram negativo

Características de la pared celular de los gram positivos

• Capa gruesa de peptidoglucano

• Ácidos teicoicos exclusivos de esta pared

• Ausencia de membrana externa

Características de la pared celular de los gram negativos

• Es compleja

• Capa de peptidoglucano delgada

• Presenta membrana interna y externa

• Lipopolisacáridos (LPS) en la membrana externa

• Presenta proteína porinas

Menciona 3 microorganismos que no se colorean con la tinción de gram

• Mycobacteria

• Mycoplasma pneumoniae

• Clamidiae

• Legionella pneumophilia

Procariotas: clasificación según su morfología y estructura

Reconocimiento del patógeno para su identificación.

¿Qué tinción nos ayuda a ver la estructura y morfología de los procariota?

Tinción de Gram

Procariotas: clasificación según su metabolismo

Algunas infecciones requieren ambientes específicos para el crecimiento bacteriano.

Gram positivos obligatoriamente aerobios

• Nocardia

• Bacillus cereus

Gram negativos obligatoriamente aerobios

• Neisseria

• Pseudomonas

• Bordetella

• Legionella

• Brucella

Bacteria que no presenta pared celular

Mycoplasma

Gram positivos obligatoriamente anaerobios

Clostridium

Gram negativos obligatoriamente aerobios

Bacteroides

¿Cómo es el crecimiento bacteriano?

1. Fase de latencia

2. Fase exponencial o logarítmica

3. Fase estacionaria

4. Fase de muerte o declinación

La primera fase del crecimiento bacteriano es:

• Fase de latencia

• Período de adaptación

• Gran actividad metabólica

• Células no se dividen

La segunda fase del crecimiento bacteriano es:

• Fase exponencial o logarítmica

• Aumento regular de la población

• Bilactamicos actúan en esta fase

La tercera fase del crecimiento bacteriano es:

• Fase estacionaria

• Cese del crecimiento por agotamiento de nutrientes

• Aparecen células nuevas pero mueren

La cuarta fase del crecimiento bacteriano es:

• Fase de muerte o declinación

• El número de células es mayor de las que se dividen

¿Cómo es el índice de proliferación en la fase uno del crecimiento bacteriano?

Cero

¿Cómo es el índice de proliferación en la fase dos del crecimiento bacteriano?

Constante

¿Cómo es el índice de proliferación en la fase tres del crecimiento bacteriano?

Cero

¿Cómo es el índice de proliferación en la fase cuatro del crecimiento bacteriano?

Negativa (muerte)

Procariotas: clasificación según su reproducción

• Fisión binaria: proceso de reproducción asexual propio de organismos procariotas (como bacterias y arqueas) y algunos protozoos

• Reproducción parasexual: El DNA puede transferirse de un organismo a otro, y dicho DNA puede incorporarse de manera estable en el receptor, modificando de manera permanente su composición genética

Las proteínas FTS son necesarias para la síntesis de:

Peptidoglucano

Procariotas: clasificación según su patogenicidad

• No patógenos: Simbiontes y comensales

• Patógenos: Estrictos (causan enfermedad) y Oportunistas (normalmente no causan enfermedad)

¿Qué son las enfermedades infecciosas?

• Causadas por un agente microbiológico

• Adquiridos por contagio directo e indirecto

• Depende del estado inmune del huésped, los factores de virulencia y el número de organismos en la exposición inicial

¿Qué significa patógeno?

Microorganismos que puede causar enfermedad

¿Qué significa patogenicidad?

Capacidad de un microorganismo para causar enfermedad

¿Qué significa virulencia?

Grado de patogenicidad de un microorganismo

Factores de virulencia

1. Factores de adherencia (Adhesinas)

2. Invasión de las células y tejidos

3. Factores toxigenicidad

4. Generación de biofilm

Proteína que se encuentra en la pared celular o fimbrias de las bacterias, necesario para el factor de adherencia

Adhesinas

Invasión de las células y tejidos, ¿qué es?

Capacidad de un organismo a penetrar, sobrevivir a las defensas, para luego multiplicarse y diseminarse

Factores de toxigenicidad, ¿qué es?

Sustancias nocivas que estimulan producción de mediadores químicos de defensa en nuestras células, que conlleva a los signos clínicos.

¿Qué toxinas existen?

Endotoxinas y exotoxinas

Características entre exotoxinas

• Excretadas por células vivas

• Relativamente inestables

• Sus efectos nocivos desaparecen calentándolos a mas de 60 C°

• Se convierte en toxoide antigénico y no tóxico con formalina

• Los toxoides se utilizan para vacunar

Características entre endotoxinas

• Forman parte de la pared celular de las bacterias gramnegativas

• Liberada cuando la bacteria muere

• Complejos lipopolisacáridos

• Relativamente estables

• Soporta 60 C°

• No se convierte en toxoides

Menciona una exotoxina:

La tetanoespasmina producido por el Clostridium tetani.

Adquieres el tétanos por heridas punzocortantes contaminadas con la bacteria

La tetanoespasmina producido por el Clostridium tetan provoca:

Contracción generalizada de todos los músculos de la persona infectada, produciendo la muerte

Generación de biofilm, ¿qué es?

Microorganismos que producen su misma o propia amatriz extracelular

Microorganismos que generan su propia matriz extracelular o biofilm

• Staphylococcus aureus: Sindrome de piel escamada y sindrome de shock tóxico

• Neisseria gonorrhoeae: Uretritis y ceguera neonatal

Eucariotas: clasificación según su morfología

• Levaduras

• Mohos (hongos filamentosos)

• Hongos dismórficos

Características de las levaduras:

• Unicelulares

• Ovaladas o esféricas

• Gemación

• Colonias cremosas y lisas

Características mohos

• Pluricelulares

• Filamentosas poseen hifas

• Esporas asexuales

• Colonias algodonosas o terciopeladas

Eucariotas: clasificación según su patogenicidad

• Micosis superficiales

• Micosis cutáneas

• Micosis subcutáneas

• Micosis sistémicas

• Endémicas

• Oportunistas

Micosis superficiales

• Infecta áreas superficiales ricas en lípidos (tronco superior, cuello)

• Infección causada por levaduras: Malassezia

Micosis cutánea

• Solo infectan tejido queratinizado superficial (piel, pelo y uñas)

• No crecen a 37 C°

• Se adquiere por contacto al suelo, animales o humanos infectados

• Dermatofitos y cándida

Micosis subcutáneas

• Infectan dermis, tejido subcutáneo y a veces músculo

• Ocurre tras lesión

• Esporotricosis, micetona

Micosis sistémicas

• Infectan órganos internos y pueden diseminarse

• Inhalación de esporas de hongos dimórficos

• En personas inmunocomprometidos es grave

Endémicas

• Histoplasma capsulatum

• Blastomycosis

Oportunistas

• Criptococosis: asociado a VIH

• Candidiasis

• Aspergilosis

Virus: clasificación por la presencia de envoltura lipídica

• Sin envoltura lipídica: Virus desnudo → Adenovirus

• Con evoltura lipídica: Virus envuelto → Coronavirus

Sin envoltura lipídica, ¿qué virus hay?

Adenovirus: vía fecal-oral, agua, superficies contaminadas

Con envoltura lipídica, ¿qué virus hay?

Coronavirus: fluidos corporales, contacto directo o vía respiratoria

¿Qué virus es mas resistente a jabones desinfectantes?

Virus con envoltura lipídica son más resistentes

Virus: clasificación según estructura de la cápside

• Helical

• Icosahedral

• Complex

Virus: clasificación según su tipo de genoma (Baltimore)

• Cadena doble (dsDNA): Casi todos

• Cadena de sencilla (ssDNA): Parvoviridae

Virus: clasificación según su tipo de genoma (Baltimore)

• Lítico: Virus que afectan hongos (bacteriófagos)

• Lisogénico: Primero en estado de latencia, luego se reactivan

Ejemplos de virus líticos

• Virus de la influenza

• Virus de Ébola

• Rinovirus

• SARS-CoV-2

Ejemplos de virus lisogénico

• Virus de la Varicela Zoster

• Virus del Papiloma Humano

• VIH

• Epstein Baar

Fases del diagnóstico microbiológico

• Pre analítica

• Analítica

• Post analítica

Características de la fase pre analítica

• Orden de análisis que son datos necesarios para la orientación diagnóstica

• Toma de muestra / Recolección de muestra

• Transporte

• Conservación de muestra

Características de la fase analítica

• Recepción de la muestra

• Análisis: diagnóstico presuntivo y diagnóstico confirmatorio

• Reporte de resultados

Características de la fase post analítica

• Concordancia clínica

• Toma de decisiones diagnosticas

• Tomas de decisiones epidemiológicas y diferenciales

Técnicas de laboratorio

1. Microscopia directa

2. Cultivo y pruebas bioquímicas

3. Inmunológicas serológicas (Ag y Ac)

4. Inmunológicas no serológicas (Ag y productos)

Visualización microscopica directa

• Diagnóstico presuntivo

• Rapidez y bajo costo

• Muestras: esputo, orina, LCR, secreciones, entre otras

• Tinciones: Gram, Ziehl Neelsen, Wirtz-Conklin, Azul de lactofenol, KOH, China

Coloración Gram

• En bacterias

• Complejo violeta de genciana-yodo se mezclan con el peptidoglucano

Pasos de la tinción de gram:

1. Colorante principal: Cristal violeta

2. Mordiente: Lugol

3. Decoloración: Alcohol/acetona

4. Colorante de contraste: Safranina

Tinción de los Gram positivo

Morado

¿Qué ocurre en la descoloración de los gram positivos y gram negativos?

• Gram positivo: Se mantiene el color morado

• Gram negativo: Se vuelvo incoloro

Tinción de los Gram negativos

Rosa

Coloración de Ziehl Neelsen

• En microorganismos alcohol resistentes

• Mycobacterium tuberculosis

Coloración de tinta china

• No penetra la cápsula, solo ennegrece el fondo, observándose halos blancos en un campo negro (solo tiñe el fondo)

• En cryptococcus neoformans (fungica), streptococcus pneumoniae y Klebsiella pneumoniae (bacterias)

• Útil para detectar Cryptococcus neoformans en LCR

Cápsula del cryptococcus neoformans (fúngica)

• Grande

• Protección y virulencia

• Polisacáridos específicos complejos

Cápsula del streptococcus pneumoniae y Klebsiella pneumoniae (bacterias)

• Pequeños

• Protección, adhesión y virulencia

• Polisacáridos simples

Coloración de KOH (Hidróxido de potasio)

• Prueba cutánea para saber si el causante es un hongo

• Hidróxido destruye todas las células no micóticas haciendo visible cualquier hongo

• Degrada a todas las células hospederas y las bacterias, pero deja intacta a los hongos

Coloración de azul de lactofenol

• Colorea estructuras fúngicas: hifas, tubos germinativos y esporas

Fase preanalítica

1. Recolección y transporte adecuado de muestras

2. Datos clínicos necesarios para orientar el análisis

Fase analítica

1. Procesamiento de muestras

2. Diagnóstico presuntivo

3. Diagnóstico confirmatorio

Fase postanalítica

1. Interpretación de resultados

2. Concordancia clínica y toma de decisiones terapéuticas

Estructuras obligadas en la bacteria

• Membrana citoplasmática

• Pared celular

• Citoplasma

• Ribosoma

• Nucleoide

Estructuras facultativas en la bacteria

• Cápsula

• Pili

• Flagelo

• Fimbrias

• Plásmidos

Conformación de la envoltura bacteriana

• Membrana plasmática

• Pared celular

• Cápsula

Funciones de la cápsula de la envoltura bacteriana

• Adherencia

• Resistencia inmunitaria

• Traspaso de barrera hematoencefálica

• Resistencia antibiótica

Características de la cápsula de la envoltura bacteriana

• Se tiñe con tinta china

• Esta en: escherichia coli, streptococcus pneumoniae, klebsiella pneumoniae, pseudomonas aeruginosa

Funciones de la pared celular de la envoltura bacteriana

• Protección contra ambientes adversos y lisis osmótica

• Mantiene la forma y rigidez

• Compuesto mayormente de peptidoglucano

Características del peptidoglucano

• Compuesto por cadenas largas de NAG y DAG mediante enlaces beta 1,4

• El método para diferenciar dicha pared es la tinción de Gram

Funciones e la membrana celular de la envoltura bacteriana

• Transporte de electrones

• Fosforilación oxidativa

• Mesosoma: participa en división celular

• No contiene esteroles

Flagelo función:

• Locomoción bacteriana

• Compuesto de flagelina