UE 1 PROTIDES

Acide aminés Exotique

Sélénocystéine - ex : glutathion peroxydase

Pyrrolysine - Archéobacteries méthanogènes ( méthyltransférase)

Amidification

transport d’ammoniac

Glutamate + NH₃ + ATP donne glutamine + ADP + PI grâce glutamine synthétase

Myopathie de Duchenne

La myopathie de Duchenne est due à un déficit complet en dystrophine.

B-mercaptoéthanol

Le -mercaptoéthanol est un agent réducteur. Il réduit donc les ponts disulfures. PAS OXYDATION

Purification

• Filtration

• Chromatographie

• Dialyse

• Précipitation

• Centrifugation

Concentration

• Lyophilsation

• Ultrafiltration

• Filtration

• Chromatographie selon l’élution

• Précipitation (culot)

• Centrifugation (culot)

Acétylation

• Ajout acetyl CO - CH₃

• Reversible : Désacetylase

Où ?

• N-ter d’une protéine

• Chaîne Latérale d’une Lysine ( K )

Hydroxylation

• Ajout -OH

Où ?

• Proline ( P )

• Lysine ( K )

Electrophorèse sur papier

Migration Anode +

• pHi < pH alors la molécule devient négatif

Migration Cathode -

• pHi > pH alors la molécule devient positif

Pas de migration

• pHi = pH alors la molécule est neutre

Electrophorèse Bidimensionelle

1er dimension

• protéine native ( non dénaturé ) se mettent a leur pHi

2e dimension

• ajout SDS = dénature les protéines + charge -

• ajout B-mercaptoéthanol = réduit les ponts disulfures

RÉSULTAT : Les protéines migrent selon leurs PM

Phénylcétonurie

• La phénylcétonurie est une maladie est soumise à un dépistage généralisée en France

• l’alimentation des malades est à surveiller jusqu’à l’adolescence.

• phenylalanine en exces toxique

Transaminase

• Les transaminases (ALAT et ASAT) = marqueurs biologiques dans le sang.

Influence de la structure primaire

• l'encombrement stérique

• la proline

• presence liaison hydrogene

• presence liaison electrostatique

RMM

Coordonnées :

• primaire

• secondaire

• tertiaire

Clivage endopeptidase

Trypsine :

• clivage apres K / R si pas suivie de P

Chymotrypsine :

• clivage F / T / W si pas suivi de P

Bromure de Cyanogène :

• clivage M

Ancrage lipidique

Acide Palmitique

• ajout acide palmitique C16

• sur Cystreine interne

Acide Myriste

• ajout acide myriste C14

• sur Glycine Nter

inhibition enzymatique compétitive

Sommet :

• Vm ne change pas : les deux courbes se rejoignent

Km :

• Km augmente : il est différent sur l’axe des abscisses

Conclusion : Vm inchangée + Km qui augmente = Inhibition compétitive !

inhibition enzymatique non compétitive

Sommet :

• Vm change : les deux courbes ne se rejoignent pas

Km :

• Km ne change pas : ça retombe sur la même valeur de Km

Conclusion : Vm diminue + Km inchangé = Inhibition non compétitive (INC)