1/81
Looks like no tags are added yet.
jakie wyróżniamy cechy metody diagnostycznej
precyzja
poprawność
zakres pomiarowy
granica oznaczenia pomiarowego
limit detekcji
swoistość/ specyficzność analityczna
definicja niepewności pomiaru
parametr związany z wynikiem pomiaru charakteryzujący rozrzut wartości, które można w sposób uzasadniony przypisać wielkości mierzonej
jakie wyróżniamy dwa rodzaje błędów analitycznych
błąd przypadkowy
błąd systematyczny
definicja walidacji
potwierdzenie, przez zbadanie i przedstawienie obiektywnego dowodu, że zostały spełnione szczególne wymagania dotyczące konkretnie zamierzonego zastosowania
co obejmuje walidacja
specyfikację wymagań stawianych metodzie
sprawdzenie czy wymagania mogą zostać spełnione
stwierdzenie o przydatności metody
określenie jej cech charakterystycznych
dotyczy nie tylko metody, ale też pobrania i transportu!!!
jakie parametry określamy i dokumentujemy w toku pełnej walidacj?
zakres roboczy
liniowość
czułość
granicę detekcji i granicę oznaczenia ilościowego
selektywność/ specyficzność, podatność na interferncje
precyzję
poprawność/dokładność (obciążenie)
niepewność pomiaru
koszt i czas badania
co musimy zrobić w laboratorium z metodą zwalidowaną przez producenta?
musimy taką metodę zweryfikować - potwierdzić, przez przedstawienie dowodu obiektywnego, że zostały spełnione wyspecyfikowane wymagania
czego dotyczy weryfikacja metody?
własna procedura - laboratorium musi udowodnić, że potrafi osiągnąć wydajność deklarowaną przez producenta
odpowiednie cechy - nalezy weryfikować te parametry, które mają znaczenie dla danego badania (potwierdzenie przynajmniej parametrów precyzji i poprawności [obciążenia)
wystarczający zakres - weryfikacja musi być na tyle dokładna, by zagwarantować wiarygodne wyniki
na czym polega i czym się cechuje błąd dopuszczalny wyniku
jest to możliwa do zaakceptowania różnica pomiędzy uzyskanym wynikiem, a wartością rzeczywistą wielkości mierzonej
określa pożądaną jakość analityczną metody
jeśli nasze błędy pomiarowe go nie przekraczają - uznajemy, że nasze wyniki są wiarygodne
dla każdego parametru/metody ustalamy oddzielne
co oznacza skrót TEA, jak tłumaczymy to na Polski
TEA (total error allowable) - błąd dopuszczalny wyniku, czyli ustalenie pożądanej jakości metody
na jakim etapie ustalamy błąd dopuszczalny?
na samym początku przed przystąpieniem do eksperymentalnej oceny parametrów wdrażanej procedury, jako ostateczny punkt odniesienia do akceptacji metody
jakimi sposobami możemy ustalalić błąd dopuszczalny?
poprzez ocenę wpływu jakości na postępowanie w konkretnej sytuacji klinicznej pacjenta
na podstawie danych o zmienności biologicznej pacjentów
opierając się na opublikowanych rekomendacjach środowisk eksperckich lub wytycznych organizatorów programów zewnątrzlaboratoryjnych
historycznie reguła Tonksa
co to jest kalibracja? co musimy mieć, żeby ją zrobić?
jest to wprowadzenie układu odniesienia - ustanowienie zależności między sygnałem analizatora a precyzyjnie ustaloną ilością (stężeniem) substancji w materiale wzorcowym, w celu obliczenia wyników w próbklach badanych
musimy mieć wzorzec oznaczanej substacji, który ma dokładnie określone stężenie danej substancji
jak zrobic kalibracje?
musimy przygotować krzywą wzorcową - wyliczyć stężenie w próbce nieznanej za pomocą parametrów opisujących krzywą kalibracyjną
lub
zrobić odczyt jednego wzorca - za pomocą proporcji:
C bad = (C wz * A wz)/ A bad
co to jest wzorzec w laboratorium czym się cechuje?
inaczej standard
r-r sub. chem. o dokładnie znaznym stężeniu, na jego podstawie dokonuje się kalibracji
powinien być udokumentowany i mieć wiarygodny wywód metrologiczny
co to jest spójność pomiarowa (traceability)?
jest to właściwość wyniku pomiaru polegająca na tym, że można powiązać je z określonymi odniesieniami, na ogół wzorcami państwowymi za pośrednictwem nieprzewrwanego łańcucha porównań
co to wzorce pierwszego rodzaju (primary refernce materials)? do czego służą?
substancje wysokooczyszczone
są to sub. stałe oraz stabilne chemicznie
certyfikowane
nie dostępne do rutynowej pracy
służą do kalibracji metod definitywnych (refernecyjnych) i nadawania wartości wzorcom drugorzędowym
co to wzorce drugorzędowe (secondary reference materials)? co czego służą?
ich stężenie określa się metodą referencyjna lub definitywna wobec wzorca pierwszorzędowego
mogą służyć do nadawnia wartości wzorcom roboczym
co to kalibrator (roboczy)
sub. wzorcowa umieszczona w środowisku maksymalnie zbliżonym do środowiska próbek badanych (ta sama matrytca analityczna)
dlaczego ustalenie typu krzywej wzorcowej jest ważne
częstość wykonywania ponownej kalibracji zależy od tego, czy krzywa jest powtarzalna czy niepowtarzalna
liczba punktów kalibracyjnych zależy od kształtu krzywej
czym się różni praca kiedy krzywa jest powtarzalna, a kiedy niepowtarzalna
krzywa powtarzalna → kolejne kalibracje robimy tyljko w wypadku awarii metody jak mamy podejrzenia, że kontrolki źle wychodzą przez kalibracje
krzywa niepowtarzalna → kalibracja metody jest konieczna w każdej serii pomiarowej
jakie znasz cechy metody - wymień
granica wykrywalności
granica oznaczalności
swoistość/selektywnośc/specyficzność
czułość analityczna
liniowość i zakres roboczy
precyzja
dokładność i precyzja/poprawność
niepewność
stabilność i odporność metody
na czym polega granica wykrywalność LOD (limit of detection) - inaczej limit detekcji
najmniejsza ilość sub. jaką możemy wykryć daną metodą, czyli
najniższa mierzalna wartość, która w sposób istotny przekracza pomiar próby ślepej
ocenia się ją za pomocą obliczeń lub eksperymentalnie
na czym polega granica oznaczalności - granica oznaczenia ilościowego (limit of quantification) LOQ, od czego zależy
najmniejsze stężenie, jakie można wykryć nie przekraczając deklarowanej niepewności metody
zależy od wielkości nieprecyzyjności i obciążenia
lepiej obrazuje ,,efektywnośc,, metody w niskich stężeniach niż limit detekcji
na czym polega czułość analityczna, od czego zależy
to najmniejsza różnica stężeń, jaką można wykryć daną metodą
zalezy od precyzji metody i od kata nachylenia krzywej wzorcowej
na czym polega liniowość metody
jest to przedział stężeń, w którym jest spełnione prawo Lambera-Beera, czyli absorbancja r-ru zależy proporcjonalnie od jej stężenia
wyrażona współczynnikiem korelacji Pearsona r2 , który powinien być jak najbliższy wartości +- 1,00
jaki to zakres roboczy metody
przedział, w którym uzyskuje się wyniki o akceptowalnej:
precyzji
poprawności/dokładności
w jaki sposób sprawdzamy liniowośc metody
trzeba przygotować szereg r-rów wzorcowych o zmniejącym się stężeniu
oznaczenie powinno się wykonać 3-4 krotnie w każdym wzorcu
przygotowuje się wykres i ocenia granice liniwośc na oko i za pomocą współczynnika korelacji Pearsona (0,97)
na czym polega selektywność/specyficzność/swoistość analityczna (jak coś to nie są synonimy ale można używać wymiennie XD)
zdolność metody do wykrywania tylko jednej określonej substancji w złożonej mieszaninie bez zakłóceń ze strony innych składników mieszaniny
metoda idealnie selektywna oznaczenia danego składnika jest metodą specyficzną
definicja precyzji metody, jak ją określamy
to zgodność wyników niezależnych pomiarów badanej cechy w tym samym materiale, uzyskancyh w określonych warunkach
to pojęcie ma wymiar jakościowy (precyzja może być zadowalająca, wysoka, niska)
co łączy pojęcia precyzji (błędu przypadkowego) i nieprecyzji, co je różni
opisują to samo zjawisko - rozrzut wyników błędu przypadkowego
natomiast precyzja to pojęcie o wymiarze jakościowym, a nieprecyzja o wymiarze ilościowym
co to nieprecyzja(nieprecyzyjność) co jest jej miarą
jest to nieodłączna cecha każdego pomiaru
jest to ilościowa ocena rozrzutu (rozproszenia) uzyskanych wyników
miarą nieprecyzji jest rozproszenie wyników wokół wartości średniej - odchylenie standardowe (SD) i współczynnik zmnienności (CV)
jak powinien wyglądać zbiór wyników nieprecyzyjności
zbiór wyników powinien mieć tzw. rozkład normalny - krzywa Gaussa, czyli wyniki powinny być rozrzucone wokół wartości średniej z określoną częstością
czym się różni nieprecyzyjność w serii jednoczesnej od nieprecyzji w serii niejednoczesnej (i ile musi wynosić)
nieprecyzja w serii jednoczesnej inaczej powtarzalność - rozproszenie pomiarów uzyskanych w tej samej serii analitycznej, w tym samym materiale
nieprecyzja w serii niejednoczesnej - pomiędzy seriami, może być w jednym lab lub pomiędzy różnymi lab (odtwarzalność) - powininna być mniejsza niż 1/4 TEA
definicja nieprecyzji całkowitej, ile musi wynieść
ukazuje całkowitą zmienność metody w danym lab, uwzględniając zmienność wewnątrz i międzyseryjną
mniej niż 1/3 TEA
czy da się wyeliminować błąd przypadkowy i nieprecyzyjność? jak można próbować ja zmniejszyć?
nieprecyzyjność jest nieodłączną cechą każdego pomiaru
błędu przypadkowego nie można wyeliminować!
nieprecyzję można zmniejszyć poprzez podawanie średniej z dwóch lub trzech oznaczeń
w jaki sposób w laboratorium przeprowadzamy i oceniamy powtarzalność (nieprecyzyjność w serii jednoczesnej)
min. 20 pomiarów w tym samym materiale
ocenia się podstawową zmienność metody (najmniej czynników wpływających na rozrzut ulega wahaniom w tym krótkim czasie)
trzeba opracować wyniki - odrzucić wartości odstające
w jaki sposób przeprowadzamy ocenę nieprecyzji całkowitej? (protokół wg CLSI)
musi być prowadzona conajmniej na 2 poziomach
każda próbka (poziom) jest oznaczana dwukrotnie w ciągu dnia przez ponad 20 dni
w każdej serii powinna być próbka kontrolna (jeśli pomiar precyzji opiera się na materiale kontrolnym - musi być to inna kontrola)
w każdej serii powinno być przynajmniej 10 próbek pacjentów
co skłąda się na dokładnośc metody, definicja jaka z tego wynika
precyzja + poprawność = dokładność
czyli dokładność to stopień zgodności pomiędzy wynikiem pomiaru a wartością rzeczywistą
definicja poprawności (prawdziwości), do czego ją wykorzystujemy
jest to zgodność średniej z wielu wyników oznaczeń tego samego parametru w tym samym materiale a wartością należną
umozliwia zmniejszenie wpływu błędu przypadkowego (nieprecyzyjności) podczas oceny wielkości błędu systematycznego (obciążenia metody)
co mają wspólnego ze sobą pojęcia poprawność i obciążenie, a co je różni
oba odnoszą się do błędu systemtycznego i opierają się na sprawdzeniu relacji między wartością średnią a wartością rzeczywistą
natomiast poprawność to określenie jakościowe, a obciążenie to pojęcie ilościowe (podajemy w % lub jednostkach stężenia)
jakie znamy sposoby oceny poprawności (obciążenia) metody?
przez porónanie z wartością odniesienia
B = X - NOM /NOM x 100%
NOM - wartość odniesienia podana przez producenta
X - wartość pomiaru w dobrym materiale kontrolnym
tak jak wyżej ale inny wzór
B = Xśr - NOM/ NOM x 100%
X śr - srednia z 20 pomiarów dobrego materiału kontrolnego, wykonane w różnych seriach
porównanie z metodą referencyjną
metoda graficzna
jakie wyróżniamy rodzaje materiałów kontrolnych ze względu na 1. postać fizyczną 2. trwałość
postać
liofilizowane - w proszku więc trzeba bardzo dokładnie rozpuścić, długa data, ale ryzko błędu pipetowania
płynne - gotowe do użycia, ale mogą zawierać stabilizatory czy przeciwutleniacze
trwałość
trwałe - można przechowywać np. firmowe surowice, r-ry wodne i odpowiednio zamrożony matweriał od pacjentów
nietrwałe - biologiczne próbki, których nie da się przechowywać
co to znaczy komutabilność
zgodność cech materiału kontrolnego i materiału badanego
zależy od kompozycji materiału badanego i kontrolnego, zarówno pod względem oznaczanego składnika jak i matrycy analitycznej
żeby wyniki próbek pacjentów były wiarygodne muszą by komutabilne z materiałem kontrolnym
jakie są przyczyny braku komutabilności
obecność w próbkach pacjentów sub. interferujących np. leków
stosowanie materiałów kontrolnych np. bydlęcych
utrwalanie materiałów kontrolnych: konserwanty, liofilizacja, mrożenie
jakie jest podstawowe założenie statysycznej kontroli jakosci?
Jeżeli oznaczenia prób kontrolnych są poprawne to równie poprawne są wyniki równoległe oznaczanych próbek rutynowych
jak inaczej nazywamy kontrolę wewnątrzlaboratoryjną, kiedy ona obowiązuje
inaczej i bardziej poprawnie jest to statystyczna kontrola jakości
jest obowiązkowa dla wszystkich paramentrów oznaczanych w laboratorium
wewnętrzną kontrolę jakości badania laboratoryjnego prowadzi się w odniesienu do:
rodzaju stosowanych materiałów kontrolnych
wielkości dopuszczalnych błędów pomiarowych
częstotliwości pomiarów kontrolnych
stosowania kart kontrolnych
dokumentowania pomiarów kontrolnych
w jaki sposób przeprowadza się statysyczną kontrolę jakości kiedy nie ma dostępnych stabilnych materiałów kontrolnych?
w formie kontroli powtarzalności lub odtwarzalności, opartej na badaniach laboratoryjnych wykonywanych na materiale pochodzącym od pacjenta
jakieinformacje zawiera dokumentacja wewnętrznej (systematycznej) kontroli jakości
wyniki badań kontrolnych
stwierdzone przekroczenia granic dopuszczalności błędów, granic kontrolnych lub odstępstwa od wymaganego standardu badania
podjęte działania korygujące i zapobiegawcze
jakie parametry obejmuje statystyczna kontrola jakości (IQC) i jakie są jej założenia
obejmuje nieprecyzje i obciążenie czyli dokładność uzyskanych wynikow
założenia: wykonuje się pomiary w specialnych materiałach kontrolnych i na podstawie wyników w nich uzyskanych podejmuje się decyzję o akceptacji lub dyskwalifikacji równolegle oznaczanych próbek pacjentów
co musimy dobrać i przygotować do wdrożenia kontroli kiedy mamy trwaly material kontrolny
dobór materiałów kontrolnych
rodzaj, poziomy kontroli
liczba
lokalizacja w serii
wykonanie pomiarów wstpnych - zwykle 20 pomiarów w 20 dni
dobór reguł przy ocenianiu wyników pomiarów w materiałach kontrolnych
tworzenie karty kontroli - wyznaczeie wartości należnych i SD dla materiałów kontrolnych własnych, nie korzystamy z danych producenta zawartych w metryczce!
etapy przygotowania karty kontroli jakosci wewnętrznej
pomiary wstępne
odrzucenie danych producenta
opracowanie statystyczne wlasnych danych - odrzucenie +-3SD
od czego zależy liczba kontrolek podczas statystycznej kontroli jakosci
zalezy od jakości metody
metody o gorszej jakości ogólnej muszą być bardziej restrykcyjnie kontrolowane
metody o najlepszych parametrach jakosciowych pozwalają na prowadzenie kontroli w sposób liberalny
w jaki sposób oceniamy jakość metody żeby odpowiednio dobrać do niej schemat statystycznej kontroli jakości
znormalizowane wskaźniki precyzji:
CV_N = CV/TEA * 100%
i poprawności:
B_N = B%\TEA * 100%
które nanosi się na znormalizowany wykres decyzyjny
coraz cześciej stosuje się też metodę Six-sigma
sigma - metric = TEA - bias/CV
ile kontroli należy przeprowadzić podczas serii w zależności od jakości (pola na wykresie )
niedopuszczalne
dobre - 4-6 materialów kontrolnych w serii
doskonale i klasa swiatowa - 2 kontrolki na serie
na czym polega kontrola odtwarzalności(zmienna - czas) i jak się ją przeprwadza
chodzi o wykrywanie błędów przypadkowych i systematycznych
wykorzystuje się materiał trwały (liofilozowany lub mrożony)
osobne karty dla wszytskich materiałów kontrolnych (dla wszyskich poziomów - conajmniej 2 poziomy)
najpierw pomiary wstępne (conajmniej 20 pomiarów - 20 dni)
co miesiąc weryfikacja średniej i SD, ponowne obliczanie
czego dotyczy reguła 12s , czy jest restrykcyjna, jaką pełni funkcje
kiedy jeden pomiar kontrolny przekracza granice +-2 SD od wartości średniej
jest to bardzo restrykcyjna reguła
obecnie pełni funkcje reguły ostrzegawczej
na czym polega reguła 13s , jaki błąd wykrywa
jeden wynik materiału kontrolnego przekracza granicę +-3 Sd od średniej
do wykrywania błędu przypadkowego
na czym polega reguła 22s ,w jakich wariantach możemy jej użyć, jaki błąd wykrywa
dwa kolejne wyniki kontrolne przekraczają granicę +2 SD lub -2 SD
może dotyczyć tej samej serii lub kolejnych serii pomiarowych
wykrywa błąd systematyczny
na czym polega reguła R4s ,kiedy możemy jej użyć, jaki błąd wykrywa
różnica między dwoma pomiarami kontrolnymi w tej samej serii przekracza 4 SD - np. jeden wynik lezy powyżej +2 SD, a drugi poniżej -2SD)
stosujemy tylko w obrębie jednej serii!
wykrywa błąd przypadkowy
na czym polega reguła 41s , kiedy możemy stosować, jaki błąd wykrywa
cztery kolejne pomiary kontrolne znajdują się po tej samej stronie średniej i jednocześnie przekraczają granicę 1 SD
może być stosowana jedonocześnie w seriach i między seriami (2 serie, 2 kontrolki) lub między seriami (4 serie w jednej kontrolce)
wykrywa błąd systematyczny
na czym polega reguła 10x , kiedy możemy stosować, jaki błąd wykrywa
dziesięc kolejnych wyników znajduje się stale po tej samej stronie średniej (poniżej lub powyżej)
można stosować między seriami lub w seriach i między seriami
wykrywa błąd systematyczny
jaki błąd wykrywa reguła 7T
wskazuje na powolny trend narastający lub opadający wyników kontrolnych
na czym polega Karta Leveya-Jenningsa
to wykres graficzny z wyrysowanymi liniami odchyleń standardowych, nanosimy na nią wyniki pomiarów materiałów kontrolnych
jakie reguły pozwalają wykryć błąd przypadkowy, co może być przyczyną tego rodzaju błędu
reguły 13s i R4s
przyczyny:
nieciągłość w systemie dozowania
niestabilność zasilania lub u. optycznego lub w utrzymaniu temperatury
nieprzestrzeganie procedury wykonania oznaczenia w metodzie manualnej
jakie reguły pozwalają wykryć błąd systematyczny, co może być przyczyną tego rodzaju błędu
22s , 41s, 7T , 10x
zmiany w odczynniku lub kalibratorze lub kalibracji
stałe zmiany w temp.
uporczywe powtarzanie błędów w metodzie wykonywanej manualnie
kiedy używamy metody nieznanego dubletu co ją cechuje i jaki błąd może wskazać
używamy jej gdy nie mamy trwałego materiału kontolnego
polega na rozproszeniu różnic dla szergu próbek wykonywanych duwkrotnie (losowe próbki pacjentów, losowo umieszczone w serii)
jest to najprostrsza forma wykrycia błędów przypadkowych i wykrywa tylko błędy przypadkowe
w toku walidacji ocenaimy podatność metody na interferencje, głównie ze strony:
hemolizy
hiperbilirubinemii
lipemii
antykoagulantów
inne związki np. leki
jak wyglądan przebieg oceny interferncji
do materiału badanego (najlepiej 6 różnych) dodaje się oceniane substancje interferujące w kilku różnych stężeniach, gdyż stopień interferencji jest zwykle zależny od stężenia substancji zakłócającej
w tak przygotowanych próbkach oznacza się składnik badany i ocenia, jaki jest wpływ interferencji na uzyskaną wartość stężenia substancji badanej
NIE WSZYTSKIE INTERFERNCJE DA SIĘ PRZEWIDZIEĆ I OCENIĆ
czy selektywność/swoistość/specyficzność to to samo,ale czy możemy używać tych pojęć jako synonimy
kiedyś pojęcia te miały swoje definicje, które trochę się różniły, ale dzisiaj możemy je stosować wymiennie
skutki interferncji
rozbieżność między wynikami testów, a rzeczywistością
wpływ na szerokość przedziałów referencyjnych i zmniejszenie wartości diagnostycznej testów
mechanizm (czyli jak wpływa na wyniki) interferencji lipemi
niejednorodność próbki - lipoproteiny bogate w TG w czasie wirowania i przechowywania zbierają się na powierzchni próbki prowadzi to do fałszywie wysokich wyników składników lipidowych i za niskich substancji oznaczanych w wodzia osocza (elektrolity)
zmetnienie próbki - obecność dużych cząstek tłuszczowych powoduje rozproszenie światła w próbce
wiązanie substancji lipofilnych z lipoproteinami próbki - utrudnienie oznaczenia leków i hormonów, ponieważ zostały związane przez cząst. tłuszczu
zmniejszenie zawartości wody osocza - wyższe wyniki sodu i potasu
przyczyny lipemii
najczęściej - pacjent nie jest naczczo (może być nawet zdrowy)
dosyć często - pacjent ma zaburzenia gospodarki lipidowej
rzadko - pacjent jest żywiony parenteralnie i próbka została pobrana za wcześnie po dożylnym podaniu emulsji
procedury zaradcze czyli co możemy zrobić z próbką lipemiczną
odwirowanie wysokoobrotowe - tłuszcz flotuje na górze
ślepa próba surowicza i korekcja optyczna np. HIL - aparat mierzy A próbki przy specialnie dobranej dlugości fali i automatycznie koryguje wplyw zmętnienia
zmiana metody np. na potencjometryczne bezpośrednie
ponowne pobrani krwi na czczo
jak możemy zapobiegać lipemii
standaryzacja fazy przedanalitycznej
przyczyny występowania próbek ikterycznych (żółtaczkowych)
żółtaczki
wątroba - zapalenie, marskość, nowotwór, alkohol
cholestelaza
hemoliza (zaburzenia dot. erytrocytów np. niedokrwistość sierpokrwinkowata)
mechanizm (jak wpływa na wynik) interferncji hemolizy, jakie parametry są wtedy zaburzone
hemoglobina jest białkiem - zawyżenie wartości białka całkowitego
hemoglobina ma właściowości reakcji pseudoperoksydazowe (reakcje redox), prowadzi do interefencji w oznaczaniu: kreatyny, biblirubiny i glukozy
inne składniki uwolnione z komórek krwi w wyniku ich rozpadu, te substancje to np.: potas, fosforany, enzymy, magnez, glutation
rozcieńczenie osocza płynem wewnątrzkomórkowym (z pękniętych erytrocytów), prowadzi to do zaniżenia: albuminy, bilirubiny, glukozy, ALP, sodu
rozbieżności w morfologii krwi
hamowanie reakcji PCR
w ustroju czy poza ustrojem najczęściej dochodzi do hemolizy?
hemoliza wewnątrznaczyniowa (in vivo) - rzadko
hemoliza in vitro - ok. 95% przypadków hemolizy
czym objawia się hemoliza wewnątrznaczyniowa, i jakie są jej przyczyny
może objawiać się niedokrwistością hemolityczną
przyczyny:
zaburzenia autoimmunologiczne i immunologiczne
pasożyty np. zarodziec malarii
reakcje na leki
błędy transfuzjologiczne
oparzenia, czynniki mechaniczne (sztuczne zastawki w sercu)
nowotwory krwi
skąd się bierze hemoliza in vitro
nieprawidłowe pobierani krwi - zbyt agresywne mieszanie, pieninie
nieprawidłowe warunki przechowywania i transportu (czas, temp., wstrząsy)
jak wykryć hemolizę
przez oznaczanie st. hemoglobiny w surowicy lub osoczu - możemy tak wykryć zarówno hemolizę in vivo jak i in vitro
wykrywanie wzrokowe - przed i po wirowaniu, ale jest to praktyka niezalecana przez subiektywność