gaismas mikroskopijā izmantojamās krāsošanas citoloģisko un histoloģisko preparātu izmeklēšanā

Āda

Krāsošnas metode: Tinktoriālā, Hematoksilins un Eozīns

Hematoksilīns (Zils) - bāziska krāsviela iekrāso Baziofīlus (Dns, Rns, Kodols, ribasomas),

Bazofīli - šūnas skābie elementi (Dns, Rns, Kodols, ribasomas),

Eozīns (Rozā) - Skāba krāsviela iekrāso acidofīlus (Citoplazma, saistaudi, hialīns)

Acidofīli - šūnas bāziskie elementi (Citoplazma, saistaudi, hialīns)

Tinktoriālās metodes

Izmanto krāsvielas, lai iekrāsotu audus un to sastāvdaļas, labākais piemērs ir hematoksilīns un eozīns jeb "HE", kas ir visbiežāk izmantotā krāsviela audu paraugiem.

Histoķīmiskās metodes

iekrāso audus, izmantojot ķīmiskas reakcijas audu paraugā, piemēram, periodiskās skābes-šifa (PAS) reakciju

Sudraba metodes

balstās uz principu, ka nepiemērotos apstākļos noteikti bioloģiskie komponenti gan šūnās, gan starpšūnu materiālos reducē sudraba savienojumus, piemēram, sudraba nitrātu, veidojot melnas metāliskas sudraba nogulsnes ķīmiskās reducēšanas vietā, un, pamatojoties uz dažādiem apstākļiem un izmantotā sudraba nitrāta šķīduma sastāvu, šīs metodes var izmantot, lai demonstrētu plašu struktūru klāstu, piemēram, neironus, retikulāras šķiedras, vienkārša plakanā epitēlija kontūras vai specializētus šūnu veidus.

Fluorescējošas krāsvielas

Zondes saistās ar specifiskām šūnu struktūrām, piemēram, kodolu, mitohondrijiem, lizosomām; šīs zondes ir mazas molekulas, kas vairumā gadījumu var šķērsot šūnu membrānu un piesaistīties saviem mērķiem pat dzīvās šūnās; visbiežāk izmantotās zondes DAPI, Hoechst lieto kodola identificēšanai.

imunofluorescences metodēm

nepieciešama šūnu fiksācija, jo lielas antivielas nevar viegli šķērsot šūnu membrānu

Imunohistoķīmija/imunofluorescence

odernāka un specifiskāka krāsošana, kurā tiek izmantotas iezīmētas antivielas, un to aizsāka 1942. Gadā A. Kūns (A.Coons)

Muguras smadzeņu multipolārie neiron

Krāsošanas metode : Sudrabošanas

Epitēlija šūnu robežu vizualizēšanai izmanto sudraba nitrāta.

(melnā) krāsā - robežas un

(brūnas) - šūnas

Funk: vizualizēt endotēlija spraugas — telpas, kas atveras starp šūnām un ļauj palielināt paracelulāro transportu.

plaši izmantoja, lai pētītu endotēlija (vienkārša plakanā epitēlija veids asinsvados) izmaiņas, ko izraisa iekaisuma mediatori. Šīs izmaiņas izraisa palielinātu endotēlija barjeras caurlaidību un ir atbildīgas par audu tūsku

Elastīgās šķiedras

Krāsošanas Metode : van Gizon

Pikrīnskābe( Zaļgandzeltens) - Citoplazma, muskuļi, amiloīds, fibrīns, fibrionīds

Fuksīns (Sarkans) - Saistaudi, hialīns

Funk :Van Gizona šķīdums ir bieži izmantota kontrastkrāsa (viena no trihroma krāsām), kas apvienota ar primāro elastīgo krāsu (parasti Verhofa vai Veigerta krāsu) un palīdz labāk diferencēt elastīgās šķiedras no kolagēna un gludajiem muskuļiem un to saturošās pienskābes

krāsošanas metodes saistaudu un muskuļu izvērtēšanā

Elastīgās šķiedras

krāsošanas metode : Veigerta

Lugola šķīdums, kristālvioletais (Zils) - Fibrīns, baktērijas

Kodolu ātrā sarkanā krāsa (Sarkans) - kodoli

funk : Elastīgo šķiedru izvērtēšanā, fibrīna nespecifiska krāsviela

zili melnā krāsā līdz melnu, kolagēns — rozā līdz sarkans, pārējie audi — dzeltenā krāsā (ar van Gizona kontrastkrāsu).

Elastīgās šķiedras

Krāsošanas metode : Orseīna krāsojums

(tumši brūnas) - elastīgās šķiedras

citi audi atkarībā no izmantotās kontrastkrāsas

Elastīgās šķiedras

Krāsošanas metode : Veigerta/Verhofa-van Gizona krāsvielu kombinētā

(saglabā relatīvi gaišu fonu) -

Funk : lieliski piemērota elastīgo šķiedru identificēšanai. Tās bieži izmanto dermatopatopatoloģijā un pētījumos, kas saistīti ar asinsvadiem.

ELASTĪGO ŠĶIEDRU KRĀSOŠANA

Verhofa krāsojums

Veigerta krāsojums

Orseīna krāsojums

Gomori krāsojums

Humberstone krāsojums

Teorija : Galvenais krāsošanas izaicinājums ir atšķirt elastīgās šķiedras no kolagēna un gludajiem muskuļiem dažādos audos, jo lielākā daļa krāsošanas metožu nediferencē elastīgās šķiedras tikai tāpēc, ka tās sajaucas kopā ar pārējiem audiem un neiekrāsojas selektīvi. • Kontraskrāsa šajā gadījumā ir krāsa, kas iekrāso šo fonu (neelastīgās sastāvdaļas) un palīdz atšķirt šīs sastāvdaļas audu paraugā. • Van Gizona šķīdums ir bieži izmantota kontrastkrāsa (viena no trihroma krāsām), kas apvienota ar primāro elastīgo krāsu (parasti Verhofa vai Veigerta krāsu) un palīdz labāk diferencēt elastīgās šķiedras no kolagēna un gludajiem muskuļiem un to saturošās pienskābes. • Verhofa modifikācijā van Gizona krāsa satur dzelzs-hematnu un lugola (joda) šķīdumu. • Verhofa metodi var lietot arī kombinācijā ar citām kontrastkrāsām, piemēram, gaiši zaļo krāsvielu. • Veigerta metode elastīgo šķiedru krāsošanai izmanto rezorcīna-fuksīna metodi, ko var kombinēt ar eozīnu vai van gizonu un citām metodēm kā kontrastkrāsu, lai palielinātu iekrāsoto struktūru skaitu, tāpat kā Verhofa metodē.

Žurkas aknu (Tauki)

Krāsošanas metode : Sudāns III

Sudāns III(Oranžs) - Neitrālie tauki

Hematoksilīns (Zils) - Kodoli, vāji iekrāsota citoplazma

Elastīgās šķiedras

Krāsošanas metode : Rezorcīns-fuksīns]

Rezorcīns (Melns) - Elastīgās šķiedras

Kodolu ātrā sarkanā krāsviela (Sarkans) - Kodoli

protrombīns un fibrinogēns

Asins recēšanas reakcijās ir iesaistītas vielas, kuras sauc par asins recēšanas faktoriem. Tās ir trombocītos esošās vielas, kā arī asins plazmas olbaltumvielas, tiek sintezētas aknās

Asins uztriepe

Krāsošanas metode : Gimza

(rozā krāsā) - Leikocīti Eritrocīti un eozinofilās granulas

(Violetā) - Leikocīti Eritrocīti un eozinofilās granulas

(Zilā) - Kodoli un bazofīlās struktūras

(Zilā) - Monocītu un limfocītu citoplazma

Azūrs-eozīns (Sarkans) - Eozinofīlie leikocīti, citoplazma un tās granulas, kolegēna šķiedras

(zaļš) - melanīns

Funk : asins šūnu diferencēšanā

Peles tievu zarnu bārkstiņas, Kausveida šūnas ar mucīnu

Krāsošanas metode : Histoķīmiskās metodesPerijodskābes-Šifa (PAS) reakcija

Šifa reaģents (Sarkans) - Blakusesošās hidroksilgrupas un aminospirti, mucīns, glikogēna uzkrājošās šūnas, glikokalikss

Hematoksilīns (Zils)-Kodoli iekrāsojas zili. Zilā krāsā iekrāsojas arī neitrālie un skābie polisaharīdi, sēnes un parazīti.

Zvigily line

Mucīns

olbaltumtviela, kas ietilpst siekalu sastāvā.

Peles tievu zarnu bārkstiņas, Kausveida šūnas ar mucīnu

Krāsošanas metode : Histoķīmiskās Perijodskābes-Šifa (PAS) reakcija

Šifa reaģents (Sarkans) - Blakusesošās hidroksilgrupas un aminospirti, mucīns, glikogēna uzkrājošās šūnas, glikokalikss

Hematoksilīns (Zils) - Kodoli iekrāsojas zili. Zilā krāsā iekrāsojas arī neitrālie un skābie polisaharīdi, sēnes un parazīti.

Papanikolau (PAP)

ūlītēja citoloģiska materiāla fiksācija 95% spirtā

Romanovska krāsojumiem

vispirms nepieciešama citoloģiskā materiāla žāvēšana pirms fiksācijas metanolā

perifēro asiņu uztriepju un kaulu smadzeņu aspirātu krāsošanai.