Hematopoeise normale

Comment différencier les différents polynucléaires entre eux ?

Par leur granulations :

• neutrophiles : fines et roses

• marron/orangé pour l’éosinophile (et plus grosses que celles du neutrophile)

• grosses et violets foncés pour le basophile.

Après le système de tri magnétique comment analyser les cellules ?

Par l’analyse de leurs fonctionnalités en les testant in vivo en colonies :

• Pour les priogéniteurs les + engagés → tests de colonie, que l'on appelle CFC qui sont des tests de culture à court terme in vitro

• progéniteurs précoces → système de culture à long terme ou greffes

• Pour CSH → système d’analyse a encore plus long terme ou on attends qu’ellles se différencient

Quel test réaliser pour mettre en évidence les progéniteurs engagés ?

Le test du CFC

• mises en culture dans un milieu appelé methylcellulose ( rose ) puis laissées en culture 2 semaines maximum, et on évaluera ensuite la capacité des cellules à générer des colonies (CFU)

Quel test réaliser pour mettre en évidence les progéniteurs précoces ?

Test LTC ( long term culture ) :

• Mise en culture des cells sur une couche nourricère de cellules de type MS5 ou HS5 A l’issue des 5 semaines de culture sur ces cellules, les cellules sont

  ensemensées en méthylcellulose pendant 2 semaines

BUT → obtenir une colonnie

Quel est le test pour mettre en évidence les CSH ?

cellules sont capables de générer de

l'hématopoïèse humaine à long terme dans un modèle de souris.
→ avec greffe primaire et secondaire pour s’assurer du test

Quelle est la cellule intramoelle qui permets de garder les CSH en rétention ?

OsteoBlastes et les Adipocytes

Ou sont situés d’avantage les CSH et pourquoi ?

Situés majoritairement dans la loge endostéale ( pauvre en O2 ) et proche de l’os cortical → aussi car présence++ d’ostéoblastes

C’est l’inverse dans la niche vasculaire → aide à la prolifération

Quelles sont les 3 types de cytokines existantes ?

• des cytokines précoces, non spécifiques de lineage, qui vont stimuler la prolifération et l’auto renouvellement, comme l'IL 3, le SCF et le FLT3-ligand.

• des cytokines un peu plus tardives, qui sont plus spécifiques de lineage et qui vont permettre la différenciation terminale et la maturation comme le G CSF, M CSF, l’EPO et l’ ATPO.

• des cytokines inhibitrices comme le TNF et l'interféron (IFN) qui vont inhiber la prolifération des précurseurs érythrocytaires par exemple.