BCELL 3 : Canneaux ioniques + Recepteurs

Ouverture des pores transmembranaires aqueux

Médiateurs hydrosoluble

Caractéristiques récepteurs Nicotinique (Inotropes)

• Canal cationique à sodium

• Pentamère → 5 sous unités

• Hydrophile

Localisation récepteurs Nicotinique (Inotropes)

• Membrane post synaptique

• Fonction neuro-musculaire

Rôle récepteurs Nicotinique (Inotropes)

Contraction musculaire

→ Propagation de la dépolarisation par l’activation des canaux sodium potentiel-dépendant

Rôle des récepteurs dihydropyridine et ryanodine

Transformation de la dépolarisation membranaire en libérant de calcium dans la triade

Recepteur dihydropyridine

Sarcolemme

Canal calcique voltage dépendant

Entrée calcium

Recepteur ryanodine

RES

Canal calcique

Sortie de calcium

Substance pharmacologique agissant sur NICOTINIQUE

• Acétylcholine

• Nicotine

• Tubocurarine

• α-bungarotoxine

• Tétracaïne

Substance pharmacologique agissant sur NICOTINIQUE : Acétylcholine

Agoniste naturel

Substance pharmacologique agissant sur NICOTINIQUE : Nicotine

Agoniste exogène

Substance pharmacologique agissant sur NICOTINIQUE : Tubocurarine

Antagoniste

Compétitif

Bloqué jonction neuromusculaire

Substance pharmacologique agissant sur NICOTINIQUE : α-bungarotoxine

Antagoniste

Compétitif

Substance pharmacologique agissant sur NICOTINIQUE : Tétracaïne

Antagoniste

NON compétitif

Bloque canal

Anesthésie locale

Substance pharmacologique agissant sur ACETYCHOLINE

• Physostigmine

• Pesticides oragnophosphorés

• Toxine botulique

Substance pharmacologique agissant sur ACETYCHOLINE : Physostigmine

Inhibiteur de l’acétylcholinestérase

Renforce + Prolonge effet de l’acétylcholine

Substance pharmacologique agissant sur ACETYCHOLINE : Pesticide oragnophosphorés

Inhibiteur acétylcholine

Paralysie générale

Substance pharmacologique agissant sur ACETYCHOLINE : Toxine botulinique

Pas libération acétylcholine par motoneurone

Chirurgie esthétique

Caractéristiques récepteurs Muscarinique (Métabotrope)

• 7 traversées

• Protéines G → 2 effets (inhibiteurs + stimulateurs)

Que mesure les Patch Clamp ?

• Potentiel de membrane

• Flux ioniques à l’échelle d’un seul canal

2 configuration du Patch Clamp

• Configuration cellule attaché

• Configuration Inside out

Patch Clamp : Cas de récepteur Inotrope

Ligand dans la pipette

Récepteur ligand = 1 seule entité

Patch Clamp : Cas de récepteur Métabotrope

• Ligand à l’extérieur de la pipette

• Recepteur canal distinct

Protéines de phosphorylation

Kinases

Protéines de déphosphorylation

Phosphatases

Activateur protéine Kinase A

AMPc

→ activation de la PKA

Comment est régulé le métabolisme du glucose dans les cellules musculaires protéine Kinase A ?

1) Active phosphorylation des enzymes de la glycogénOLYSE

→ Phosphorylase Kinase

2) Inhibe phosphorylation des enzymes de la glycogénESE

→ Glycogène synthase

Caractéristiques Récepteur Tyrosine-Kinase = RTK

> 100kDa

Monomérique

Ligand = essentiellement des facteurs de croissance

Diff domaines des protéines transmembranaires des Récepteur Tyrosine-Kinase = RTK

• N-term → extracellulaire

Reconnaissance du ligand

• Transmembranaires

• C-Term → intracellulaire

Domaine à activité Tyrosine kinase + Tyrosine

3 étapes de l’Activation du Récepteur Tyrosine-Kinase = RTK

• Dimérisation

• Transphosphorylation

• Recrutement

Dimérisation du Récepteur Tyrosine-Kinase = RTK

• Augmentation de l’affinité Rcept/Lig

• Hétérodimérisation → diversification des réponses cellulaires

Transphophorylation du Récepteur Tyrosine-Kinase = RTK

Forme active du récepteur : forme dimérique phosphorylée

Recrutement du Récepteur Tyrosine-Kinase = RTK

• Recrutement prot intracellulaire cystosolique

• Soit → Directement activé / Phosphorylée / Cascades

EGF-R

• RTK

• 170kDa

• codé par ErdB-1

Rôle de EGF-R

• Croissance

• Division cellulaire

2 mise en évidence de EGF-R

• Radioactivité

• Western Blot

Caractéristiques +++ de l’EGF-R

Récepteur EGF est phosphorylé lorsqu’il est activé

→ conséquence de la liaison agoniste EGF

Caractéristique RTK : SARC

Pléiotrope

Caractéristique domaine SH1 RTK : SARC

Activité Tyrosine kinase

Caractéristique domaine SH2 RTK : SARC

Interaction protéines / protéines

Caractéristique domaine SH3 RTK : SARC

Riche en Proline

Caractéristique domaine SH4 RTK : SARC

Myristoylation

2 types d’identification des RTK : SRC

1) Rétrovirus RSV

→ Ocogène : capable de déclencher le dvlppmt d’un cancer

2) Gène c-Src

→ Proto-oncogène : dévient oncogène par mutation

Caractéristique RTK : RAS

• 21 kDa

• GTPase

• Prot monomérique G

• Proto-oncongène

Activation RAS

Par SOS

→ RAS lié GTP

Inactivation RAS

Par GAP

→ RAS hydrolyse GTP

Quels sont les gènes activés par la transcription de ELK dans le noyau ?

Gènes ayant une SRE

• Fos

• Jun

• Myc

Qui recrute PLCγ ?

RTK

Qui recrute PLCβ ?

RCPG

Que fait le domaine PH de PDK et AKT ?

Confère une affinité pour PIP3

Caractéristique de la phosphorylation de PDK sur AKT

sur 2 positions

Caractéristique RTK : Insuline Ins-R

Tétramère

• 2 chaînes α → Extracellulaire

• Chaîne β → Transmembranaires = activité Tyrosine kinase

• Chaîne α+ β → relié par pont disulfure

Activation RTK : Insuline Ins-R

• Recrutement de IRS1

• Phosphorylation de IRS1

• Recrutement prot domaine SH2

Caractéristiques de la protéine HER2 (prot lié à EGF-R)

Récepteur orphelin = possède pas de ligand

Nécessité pas de fixation à EGF pour l’hétérodimérisation

Mécanisme de l’implication de EGF-R dans le cancer

• Prolifération

• Inhibition de l’apoptose

• Angiogenèse

• Migration

→ implique voies de signalisation

Implication de EGF-R dans le cancer : EGF-R / ErbB-1

• Surexprimé dans 30% des cancers du poumons

• Mauvais pronostic

Implication de EGF-R dans le cancer : HER2 / ErbB-2

• Le plus oncogène

• Surexprimé bcp de cancer

Implication de EGF-R dans le cancer : Erb-3 et 4

Pas de cancer

2 molécules pour bloquer le cancer

• IRESSA

• Herceptin

Caractéristique de IRESSA : molécule pour bloquer le cancer

• Inhibiteur compétitif du site catalytique de l’EGF-R

• Empêche transphosphorylation

Caractéristique de Herceptin : molécule pour bloquer le cancer

• Anticorps monoclonal humanisé dirigé contre HER2

• Bloque son activité

3 facteurs induisant l’augmentation du diamètre vasculaire

1) ANF

2) Shear stress

3) Acétylcholine

→ active guanylyl cyclase

3 pathologies des NO sur muscle lisse

• Choc septique

• Hypertension artérielle

• Viagra : sidénafil → inhibition de la PDE 5

Caractéristiques des Cytokines

• Protéines médiatrices

• Redondance

• Spécificité

Structure des Cytokines

• Sans activités enzymatique intrinsèque

• Site de fixation pour kinase cytosolique

Activation des Cytokines

• Sans activité enzymatique intrinsèque

• Phosphorylation sur Tyrosine du récepteur