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Cómo se denomina el método de referencia para la determinación de glucosa por exoquinasa?
Método de referencia.
¿Qué tipo de cinética sigue la determinación de glucosa por exoquinasa?
Cinética
3. ¿Qué significa que una reacción sea cinética?
Medición del cambio de absorbancia en función del tiempo.
4. ¿Cuáles son los reactivos de la primera reacción en la determinación de glucosa por exoquinasa?
Glucosa + ATP.
5. ¿Qué enzima cataliza la primera reacción en la determinación de glucosa por exoquinasa?
Hexoquinasa
6. ¿Cuáles son los productos y el cofactor de la primera reacción en la determinación de glucosa por exoquinasa?
Mg²⁺, glucosa-6-fosfato + ADP.
7. ¿Qué enzima cataliza la segunda reacción en la determinación de glucosa por exoquinasa?
Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
8. ¿Cuáles son los reactivos de la segunda reacción en la determinación de glucosa por exoquinasa?
Glucosa-6-fosfato + NAD⁺.
9. ¿Cuáles son los productos de la segunda reacción en la determinación de glucosa por exoquinasa?
6-fosfogluconato + NADH + H⁺.
10. PRIMERA REACCIÓN: Menciona los reactivos, la enzima y los productos de la determinación de glucosa por exoquinasa.
Glucosa + ATP, Hexoquinasa + Mg²⁺, Glucosa-6-fosfato + ADP.
11. SEGUNDA REACCIÓN: Menciona los reactivos, la enzima y los productos de la determinación de glucosa por exoquinasa.
Glucosa-6-fosfato + NAD⁺, Glucosa-6-fosfato deshidrogenasa, 6-fosfogluconato + NADH
12. ¿Qué producto de las dos reacciones permite realizar la medición espectrofotométrica en la determinación de glucosa por exoquinasa?
NADH.
13. ¿A qué longitud de onda se mide la absorbancia del NADH en la determinación de glucosa por exoquinasa?
340 nm.
FUNDAMENTO COMPLETO
El método de referencia para cuantificar glucosa utiliza un sistema cinético de dos reacciones acopladas: la glucosa se fosforila con ATP mediante la hexoquinasa (Mg2+), produciendo glucosa-6-fosfato y ADP. Posteriormente, la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa oxida este producto utilizando NAD+ para generar 6-fosfogluconato y NADH. La glucosa presente se determina midiendo espectrofotométricamente la absorbancia del NADH a 340 nm.