Apoptose

Quelles sont les deux phases caractéristiques de la découverte de l’apoptose chez C.Elegans ?

• Phase de décision/engagement

• Phase exécution

Quels sont les facteurs intervenant dans la phase de décision dans le cas de C.Elegans ?

• Facteurs de transcription CES-1 et CES-2

Quels sont les facteurs impliqués dans la phase d’exécution dans le cas de C.Elegans

Quels sont les deux exemples de rôle de l’apoptose dans l’embryogenese ?

• Formation des doigts et des espaces interdigitaux

• Mise en place d’une cavité au sein d’un organe plein

Comment se fait la formation des doigts et des espaces interdigitaux grâce à l’apoptose ?

• Séparation des doigts lors de la mort par apoptose des cellules situées entre eux

Comment se nomme la pathologie liée à la mutation de certains gènes déréglant l’apoptose dans le cas de la formation des doigts?

• Persistance de la peau entre 2 ou plusieurs doigts : syndactylie

Exemple de la mise en place d’une cavité au sein d’un organe plein lors de l’embryogenese ?

• Creusement de la cavité amniotique dans le bouton embryonnaire

En plus de l’embryogenese, quels sont les deux autres rôles de l’apoptose dans les processus physiologiques?

• Élimination structure vestige

• Maturation

Quels sont les deux exemples d’élimination des structures vertiges ?

• Métamorphose de certains amphibiens (disparition cellules de la queue de têtard)

• Organes génitaux (canaux Wolf et Muller)

Quels sont les deux exemples de maturation permis par l’apoptose?

• Systeme nerveux : synaptogenese

• Système immunitaire

Quel est le pourcentage de dégénérescence des oligodendrocytes au cours de la période périnatale chez les vertébrés?

• 50%

Quel est le rôle de l’apoptose dans la maturation du système immunitaire ?

• Élimination par apoptose des lymphocytes reconnaissant le soi pour éviter réactions auto immune

Quels sont les deux rôles de l’apoptose chez l’adulte ?

• Remodelage cellulaire ou tissulaire

• Homéostasie cellulaire

Quels sont les stress pouvant etre à l’origine de l’apoptose ?

• Dommages de l’ADN

• Blessure physique

• Accumulation de proteines mal conformées

• Infection virale

Combien de cellules sont elles détruites par jour par apoptose ?

• 60 milliards de cellules par jour par apoptose

Quelles sont les pathologies liées à un excès d’apoptose ?

• SIDA

• Maladies neuro dégénératives

• Maladies congénitales du développement

Quels types de neurones sont respectivement associés au maladie neuro dégénératives ?

• Alzheimer : apoptose neurones cholinergiques

• Parkinson : apoptose neurone dopaminergiques

En quoi un excès d’apoptose est il du au SIDA ?

• Apoptose des lymphocytes T auxiliaires nécessaires pour activer les lymphocytes T cytotoxiques

Quelles sont les pathologies liées à un défaut d’apoptose ?

• Maladies auto immunes

• Infection virales

• Cancers et syndromes lymphoprolifératifs

Exemple infections virales dues à un excès d’apoptose

• Virus de l’Herpes

• Adénovirus

Quelles sont les différentes voies de mort cellulaire ?

• Sénescence

• Phénomene de catastrophe mitotique

• Apoptose

• Nécrose

• Autophagie

Caractéristiques sénescence

• Arrête irréversible cycle cellulaire

• Causé par raccourcissement des télomeres

Caractéristiques catastrophes mitotiques

• Mauvais déroulement de la mitose → ségrégation incorrecte chromosomes

• Arrêt cycle cellulaire suivi de la mort par nécrose, apoptose ou sénescence

Caractéristiques apoptose

• Cellules isolées

• Processus actif

• Activation capsases

Que nécessite l’apoptose ?

Une importante synthèse protéique

Caractéristiques nécrose

• Groupe cellules

• Mort cellulaire accidentelle

• Survient lors d’un dommage tissulaire

• Processus passif

Caractéristiques autophagie

• Induite par conditions de stress tel que le manque de nutriments

• Élimination de certains organites par auto digestion lysosomale

Identifier type de mort cellulaire

Arrêt cycle cellulaire

Identifier type de mort cellulaire

Sénescence irréversible

Identifier type de mort cellulaire

• Catastrophe mitotique

Identifier type de mort cellulaire

Nécrose

Identifier type de mort cellulaire

Autophagie

Identifier type de mort cellulaire

Apoptose

Comment est respectivement la membrane lors de l’apoptose, la nécrose et l’autopagie ?

• Apoptose → vésicules

• Nécroses → rupture de l’intégrité de la mb

• Autophagie → vésicules

Comment est l’implosion de l’apoptose ?

• Contrôlée

Comment est l’explosion lors de la nécrose ?

• Anarchique

L’autophagie dépend elle des capsases ?

• Non

Y’a t il une inflammation lors de l’apoptose ?

Non

Y’a t il une inflammation lors de la nécrose ?

Oui

Quelles sont les deux phases de l’apoptose ?

• Formation de corps apoptotiques par détachement de protubérances formées à la surface des cellules

• Phagocytose des corps apototiques

Par qui sont phagocytés les corps apoptotiques ?

• Par macrophages ou cellules épithéliales du voisinage

Y’a t il une lyse cellulaire lors du bourgeonnement des corps apoptotiques ?

Non

Quelles sont les 3 phases du mécanisme moléculaire de l’apoptose et sont elles réversibles?

• Phase initiation → réversible

• Phase de décision → réversible

• Phase de dégradation → irréversible

Par quoi sont modulables les phases d’initiation et de décision ?

• Par des facteurs anti apoptotiques

Quelles sont les deux grandes voies de l’apoptose ?

• Voie extrinsèque

• Voie intrinsèque

Quels récepteurs interviennent dans la voie extrinsèque ?

• Récepteurs de mort

Par qui sont relargués les facteurs pro apoptotiques lors de la voie intrinsèque?

Par la mitochondrie

Par quoi est déclenchée la voie intrinsèque ?

• Absence de facteurs de croissance

• Hypoxie

• Dommage de l’ADN

• Irradiations

• Molécules chimiothérapeutiques

Par quoi est activée la voie effectrice commune et qu’active t elle?

• Activée par la voie extrinsèque ou intrinsèque

• Activation capsase effectrice : capsase 3

Qui déclenche la voie extrinsèque ?

• La superfamille des recepteurs du TNF

Ou sont situés les récepteurs du TNF?

• Au niveau de la mb plasmique

Ou se situe le domaine de mort dans les récepteurs du TNF?

• Dans domaine intracellulaire

Exemple récepteur TNF

• Recepteur Fas

Qu’est ce que la proteine FADD et quel est son rôle ?

• Proteine adaptatrice contenue dans DISC

• Lien entre récepteur de mort et pro capsases initiatrices

Quel complexe est assemblé lors de l’interaction de Fas avec son ligand dans la voie extrinsèque ?

• Assemblage complexe multiproteique cytoplasmique : DISC

Par quoi est enclenchée la cascade apoptotique dans la voie extrinsèque ?

• Par l’activation de la pro capsase 8 et de la pro capsase 10

Quels domaines sont présents dans les pro capsase 8 et 10?

• Domaines effecteurs de mort DED

Par quoi est activée la capsase 3 lors de la voie extrinsèque ?

• Par clivage protéolytique réalisé par la capsase 8

Par quoi est activé le facteur de transcription dans le cas de la voie mitochondriale intrinsèque ?

• Activé par des altérations de l’ADN

Quel est le facteur de transcription de la voie mitochondriale intrinsèque ?

• Gêne suppresseur de tumeur P53

Que se passe t il si l’ADN est non réparable dans la voie intrinsèque ?

• Induction par p53 de l’expression des proteines pro apoptotiques Bax ou Bak

La libération du cytochrome C dans le cytosol est elle une étape réversible ?

Non elle est irréversible

Quelles sont les cascades respectives aux voies extrinsèques et intrinsèques?

• Extrinsèque : Activation de la cascade des capsases par DISC

• Intrinsèque : Activation de la cascade des capsases par cytochrome C

Ou se fixe Bax?

• Membrane externe des mitochondries

À quoi se lie le cytochrome C une fois libéré dans le cytosol?

• À la proteine APAF-1

En présence de quoi se forme l’apoptosome ?

• En présence d’ATP

À quoi se lie l’apoptosome ?

• À la pro caspase 9

Qui est la caspase initiatrice de la voie intrinsèque ?

• Caspase 9

Qui sont les caspases effectrices de la voie intrinsèque ?

• Caspases 3, 6 ou 7

De quoi les caspases sont elles à l’origine?

• À l’origine des changements morphologiques et biochimiques observés au cours de l’apoptose

Par quoi sont régulées les caspases?

• Par le biais de protéolyse limitée et spécifique

• Specificité de clivage stricte de leur substrat apres un résidu aspartique

Localisation caspases

• Cytosol

• Espace inter membranaire des mitochondries

Quels sont les précurseurs des caspases ?

• Pro enzymes inactives de 30 à 50 kDa

• Appelés zymogènes

Par quoi sont activées les caspases?

• Par clivage et hétérodimérisation des 2 grandes et des 2 petites sous unités

• Formation d’un homodimére = hétérotetramere

Quelles sont les caspases initiatrices ?

• 2, 8, 9, 10,12

Caractéristiques caspases initiatrices

• Long domaine N-ter peu conservé avec motifs d’interactions protéines-protéines spécifiques

Que lie le domaine N-ter des caspases initiatrices ?

• Lie des prot adaptatrices comme domaine DED qui permet l’activation des pro-caspases par FADD

Quelles sont les caspases effectrices et caractéristiques ?

• 3,6,7

• Activées par caspases initiatrices

• Responsable de nombreux clivages protéiques

Quels sont les substrats des caspases ?

• Bcl2 ou BID

• Kinases

• Actine

Role Bcl2 et BID

• Impliqées dans régulation de l’apoptose

Role kinases

• Transduction signal apoptotique

Role actine

• Structure cytosol ou noyau

Quelles sont les protéines requises pour les réparations cellulaires ou pour la régulation du cycle cellulaire?

• Caspases 3 clivant proteines PARP impliquées dans réparation de l’ADN

Quelles sont les deux sous familles de la famille Bcl2?

• Anti apoptotique

• Pro apoptotique

Quels sont les protéines Anti apoptotiques multidomaines?

• Bcl2

• Bcl - xl

Rôle Bcl2

• Inhibe l’apoptose en séquestrant des facteurs pro apoptotiques comme Bax

Rôle Bcl2

• Inhibe l’apoptose en séquestrant des facteurs pro apoptotiques comme Bax

Quelles sont les proteines pro apoptotiques BH3 only?

• Bad, Bid, Bim

Que contrôle les membres de la famille Bcl2?

• La signalisation apoptotique au niveau mitochondrial

Que permet l’hétéromdimere Bad/Bcl2?

• Permet de libérer Bax → libération cytochrome C

Par quoi est activé Bid ?

• Par clivage par la caspase 8 : formation TBid

Role TBid ?

• Formation de pores dans la membranes mitochondriale

• Relargage cytochrome C via formation du dimere Bak/Bax

Grace à quelle coloration sont mises en évidence les cellules mortes en MO?

• Bleu de trypan

Caractéristiques bleu de trypan

• Entre dans les cellules

• Expulsé d’une cellule vivante qui reste blanches

• Non expulsé d’une cellule morte : colorée en bleu

Quelles sont les cellules détectées par le bleu de trypan?

• Cellules nécrotiques

• Cellules apoptotiques tardives

Quel est l’inconvénient du bleu de trypan ?

• Toxique pour cellules

• Doit être réalisé rapidement sous peine obtenir résultats faussés

Identifier la coloration et légender

Par quelle méthode est mise en évidence la condensation de la chromatine ?

• Par immunofluorescence : marquage DAPI de l’ADN

Comment est la chromatine des cellules en apoptose ?

• Condensée et fragmentée

Identifier type de marquage et cellules