Microbiology: Bacteria and Archaea

Mikrobiologija: Bakterije in arheje
Časovnica domen življenja
Pregled zgodovine življenja:
Časovnica obsega milijarde let in prikazuje pojav ter evolucijo različnih oblik življenja.
Ključni dogodki vključujejo nastanek Zemlje, izvor življenja ter pojav različnih organizmov.

Poudarki časovnice:

  • Pred 4,5 milijarde let: Nastanek Zemlje, ohlajanje in tvorba trdne skorje.

  • Pred 4,0 milijarde let: Izvor življenja in prve prokariontske celice.

  • LUCA (Zadnji skupni prednik): Prednik vseh živih organizmov.

  • Pred 3,5 milijarde let: Najstarejši fosili prokariontov.

  • Pred 3,0 milijarde let: Nabiranje kisika v atmosferi zaradi fotosintetskih cianobakterij.

  • Pred 2,0 milijarde let: Najstarejši fosili evkariontskih celic.

  • Pred 1,5 milijarde let: Izvor večceličnih organizmov.

  • Pred 1,0 milijarde let: Najstarejši fosili živali; kambrijska eksplozija (hitro raznolikost življenja).

  • Pred 0,5 milijarde let: Rastline in simbiontske glive kolonizirajo kopno.

  • Mezozoik: Izumrtje dinozavrov.

  • Kenozoik: Pojav prvih ljudi.

Dome življenja:
Bakterije, arheje in evkarionti (protisti, rastline, glive, živali).

Arheje vs. bakterije
Podobnosti:

  • Oboje so prokarionti.

  • Oboje imajo 70S ribosome (evkarionti imajo 80S).

Razlike:

  • Celična stena: Arheje nimajo peptidoglikana, ki ga imajo bakterije.

  • Celična membrana: Nekatere arheje imajo razvejane verige ogljikovodikov.

  • Histonom podobni proteini: Arheje jih imajo, podobno kot evkarionti.

  • Introni: Prisotni v nekaterih genih arhej in evkariontov.

Filogenetski odnos:
Arheje so bolj sorodne evkariontom kot bakterijam zaradi prisotnosti histonom podobnih proteinov in intronov.

Arhebakterije (arheje)
Splošne značilnosti:

  • Imenujemo jih tudi starodavne bakterije.

  • Imajo togo celično steno.

Habitat:

  • Pogosto v ekstremnih okoljih (ekstremofili).

  • Visoka slanost (halofili).

  • Visoka temperatura (termofili).

  • Brez kisika (anaerobna) močvirna območja; metanogeni.

Celična zgradba:

  • Kromosomska DNA.

  • Ribosomi.

  • Fimbrije.

  • Plazmidna DNA.

  • Kapsula.

  • Celična stena.

  • Plazmalema.

  • Citoplazma.

  • Bički.

Bakterije
Velikost:
Običajno 1–5 μm.

Celična zgradba:

  • Bakterijski kromosom.

  • Citoplazma.

  • Plazmidi.

Prokariontska celična zgradba
Pomanjkanje organelov:
Prokariontske celice, kot so bakterije, nimajo pravih organelov.

Fotosintetske membrane:
Fotosintetske bakterije imajo membrane s pigmenti, kot je bakteriohlorofil.
Primeri: Chlorobium (zelene bakterije), Chromatium (vijolične bakterije).
Fotosinteza bakterij ne sprošča kisika.

Brez jedra:
Genetski material je krožna dvojna vijačnica DNA brez jedrne ovojnice.
Običajno vsebuje približno 2000 genov (pribl. 0,2 % genov evkariontskih celic).

Ribosomi:
Manjši kot pri evkariontih.
Razpršeni v citoplazmi in niso vezani na endoplazemski retikulum.

Kapsula:
Lepljiva zunanja plast iz sluzi, ki omogoča tvorbo kolonij (npr. Bacillus anthracis) ali zaščito (npr. Diplococcus pneumoniae).

Plazmalema:
Tipična fosfolipidna dvojna plast s proteini.

Shranjevalne snovi:
Običajno kapljice maščob ali granule glikogena.

Plazmidi:
Kratki krožni odseki DNA, ki se neodvisno podvajajo.
Uporabni v rekombinantni DNA tehnologiji.

Pili (fimbrije):
Proteinski filamenti, vključeni v oprijem celice.
Spolni pilus omogoča prenos DNA med celicami.

Biček:
Omogoča gibanje pri številnih bakterijah.
Enostavnejši od evkariontskih; zgrajen iz tubulina proteina (flagelina).
Vrti se kot ležaj, zasidran v celični steni in poganja celico.

Celična stena:
Toga mreža muropolisaharidov, prepletenih s peptidnimi verigami.
Gram-pozitivne bakterije: debelejša stena s polisaharidi in proteini.
Gram-negativne bakterije: tanjša stena s prekrivajočo lipidno plastjo (zaščita pred lizosimom in penicilinom).
Daje obliko in preprečuje osmotske poškodbe.

Mezosome:
Uvihanosti celične membrane, kjer potekajo procesi celičnega dihanja.
Protonski gradient poganja sintezo ATP.

Oblike bakterij:

  • Kokus (okrogla).

  • Bacil (palčasta).

  • Spirila (spiralna).

Kapsula
Sestava:
Lepljiva plast polisaharidov in proteinov.

Funkcije:

  • Zaščita pred dehidracijo.

  • Pomoč pri oprijemu.

  • Rezervni vir hranil.

  • Zaščita pred imunskim odzivom.

Oblike in razporeditve bakterij
Koki:

  • Kokus: ena celica.

  • Diplokokus: par.

  • Streptokokus: veriga.

  • Tetrakokus: skupina štirih.

  • Sarcina: kockasta razporeditev osmih.

  • Stafilokokus: grozdasta razporeditev.

Bacili:

  • Bacil: ena palčasta celica.

  • Diplobacil: par.

  • Streptobacil: veriga.

  • Kocobacil: ovalna oblika.

Druge oblike:

  • Vibrio (ukrivljena palica).

  • Fusobacterium (vretenasta).

  • Corynebacteriaceae (kijasto oblikovana, v obliki črke V).

  • Spirale: Spirila (tog), Spiroheta (prožna, npr. Treponema, Borrelia).

Razmnoževanje prokariontov: delitev na dvoje
Postopek:

  • Podvojitev kromosoma.

  • Rast celice.

  • Razdelitev v dve celici.

Značilnosti:

  • Brez mitotičnega vretena.

  • Brez mitoze in mejoze.

Genetska raznolikost prokariontov

  • Hitro razmnoževanje (npr. E. coli vsakih 20 minut).

  • Visoka mutacijska stopnja → velika raznolikost.

  • Izjemna prilagodljivost.

Tvorba endospor
Namen:
Preživetje v ekstremnih razmerah (vročina, sevanje, razkužila, led).

Koraki:

  • Izolacija DNA.

  • Oblikovanje membrane.

  • Tvorba predspore.

  • Oblikovanje zaščitnih plasti.

  • Sprostitev endospore.

Primer: Bacillus anthracis.

Peptidoglikan
Zgradba:
Mrežasta molekula iz polisaharidov (N-acetilglukozamin, N-acetilmuraminska kislina) in aminokislin.

Prisotnost:
V celičnih stenah bakterij.

Odsotnost pri arhejah:
Imajo proteine in polisaharide, ne pa peptidoglikana.

Tehnike barvanja bakterij
Enostavno barvanje:
Z eno barvo, npr. metilen modra.

Negativno barvanje:
Npr. Indijsko črnilo; obarva ozadje.

Gramovo barvanje
Načelo:
Diferencialno barvanje glede na strukturo celične stene.

Gram-pozitivne:

  • Debela plast peptidoglikana.

  • Vijolično/modro.

Gram-negativne:

  • Tanka plast peptidoglikana, zunanja membrana.

  • Rdeče obarvane.

Postopek:

  • Kristal vijolična.

  • Lugolov jod.

  • Alkohol (dekolorizacija).

  • Fuksin (kontrastno barvilo).

Primerjava celične stene

  • G+: več peptidoglikana, teihonske kisline.

  • G−: manj peptidoglikana, lipopolisaharidi, porini.

Genetska izmenjava pri prokariontih
Paraspolna razmnoževanja:

  • Brez spolne razmnoževanja.

  • Izmenjava DNA (rekombinacija).

Mehanizmi prenosa DNA:

  • Transformacija: prevzem DNA iz okolja.

  • Transdukcija: prenos DNA z bakteriofagi.

  • Konjugacija: prenos preko neposrednega stika.

Sodobna biotehnologija
Uporabe:

  • Industrijska biosinteza: inzulin, hormoni, antibiotiki.

  • Bioremediacija: razgradnja onesnaževal.

  • Fermentacija hrane: jogurt, kislo zelje.

Presnovna raznolikost bakterij
Glede na vir energije:

  • Fototrofi: svetloba.

  • Kemotrofi: kemijske spojine.

Glede na vir ogljika:

  • Avtotrofi: CO₂.

  • Heterotrofi: organske spojine.

Fotoavtotrofi:

  • Cianobakterije: vsebujejo klorofil a, proizvajajo kisik.

  • Heterociste: fiksacija dušika.

  • Vijolične in zelene žveplene bakterije: brez sproščanja kisika.

Kemototrofi:

  • Iz anorganskih snovi (npr. H₂, NH₃, H₂S, Fe²⁺).

  • Primer: Nitrosomonas (pretvorba NH₄⁺ → NO₂⁻ → NO₃⁻).

Kemoheterotrofi:

  • Večina prokariontov.

  • Vir energije in ogljika: organske spojine.

  • Primer: Lactobacillus.

Fotoheterotrofi:

  • Morski prokarionti.

  • Svetloba kot vir energije, organske snovi kot vir ogljika.

Temperatura:

  • Psihrofilni: < 20 °C.

  • Mezofilni: 25–40 °C.

  • Termofilni: > 40–90 °C.

Vloga v biosferi:

  • Saprotrofi: razkrojevalci, reciklaža hranil.

  • Simbionti: prebavila, korenine rastlin.

  • Patogeni: povzročitelji bolezni.

Patogeneza:

  • Pogosto z izločanjem toksinov.

  • Egzotoksini: beljakovine, ki poškodujejo membrane gostitelja.

  • Primeri:

    • Botulin: zastrupitev z neustrezno konzervirano hrano.

    • Tetanus: okužba ran z bakterijami iz tal.

Antibiotiki
Odkritje:

  • Penicilin odkril A. Fleming 1928.

  • Izolacija: Florey in Chain 1941.

  • Nobelova nagrada 1945.

Opredelitev:
Presnovni produkti, ki zavirajo rast drugih mikroorganizmov.

Vrste antibiotikov:

  • Antibakterijski.

  • Antimikotični.

  • Ozko ali širokospektralni.

Načini delovanja:

  • Zaviranje sinteze celične stene, proteinov, DNK.

  • Bakteriostatični: zavirajo rast.

  • Baktericidni: uničujejo bakterije.

Izvor:

  • Naravni.

  • Semisintetski.

  • Sintetski.

Testiranje učinkovitosti antibiotikov

  • MIC: Najmanjša inhibitorna koncentracija.

  • Dilucijski antibiogram: Kvantitativna metoda na medijih.

  • Difuzijski antibiogram: Diski z antibiotiki, merjenje območja inhibicije.

Škodljivost antibiotikov

  • Selektivna toksičnost: npr. penicilin ne škodi človeškim celicam (nimajo stene).

  • Vpliv na mitohondrije: streptomicin, eritromicin, kloramfenikol lahko zavirajo sintezo proteinov v mitohondrijih zaradi podobnosti z bakterijami.

  • Učinek na mikrofloro: Dolgotrajna uporaba antibiotikov lahko vodi do disbioze, kar pomeni neravnovesje med koristnimi in škodljivimi mikroorganizmi v telesu.

  • Razvoj odpornosti: Pogosta in nepravilna uporaba antibiotikov lahko povzroči razvoj odpornosti pri bakterijah, kar predstavlja resno grožnjo za učinkovito zdravljenje infekcij.

  • Interakcija z drugimi zdravili: Antibiotiki lahko vplivajo na učinkovitost drugih zdravil, kar lahko vodi do nepričakovanih stranskih učinkov ali zmanjšanja terapevtske učinkovitosti.