Mikra 1

1. Úvod do praktických cvičení z mikrobiológie

  • Vedi jej Ing. Lehotská, PhD.

Zásady bezpečnosti práce v mikrobiologickom laboratóriu

Nariadenie vlády č. 83/2013 Z. z.

  • Ustanovuje požiadavky na ochranu zdravia a bezpečnosti pred rizikami z expozície biologickými faktormi pri práci a na predchádzanie týmto rizikám.

  • Vzťahuje sa aj na činnosti, pri ktorých môže dôjsť k poraneniu ostrými zdravotníckymi predmetmi (porezanie, pichnutie, spôsobenie poranenia alebo nákazy).

Biologické faktory

  • Mikroorganizmy vrátane GMO (geneticky modifikované organizmy).

  • Bunkové kultúry.

  • Ľudské endoparazity, ktoré môžu vyvolať nákazu, alergiu alebo toxický účinok u ľudí.

  • Prióny, ktoré môžu spôsobiť u ľudí prenosné ochorenie.

  • BSZ - biosafety level (úroveň biologickej bezpečnosti).

Klasifikácia biologických faktorov do skupín na základe miery rizika nákazy u ľudí

  • Skupina 1:

    • Nie je pravdepodobné, že by mohli spôsobiť ochorenie ľudí.

  • Skupina 2:

    • Môžu spôsobiť ochorenie ľudí, ale nie je pravdepodobné, že sa ochorenie rozšíri v populácii.

    • Obvykle je k dispozícii účinná profylaxia alebo liečba.

    • Príklady mikroorganizmov:

    • Bordetella pertussis

    • Borrelia spp.

    • Campylobacter spp.

    • Clostridium spp.

    • Enterobacter spp.

    • Enterococcus spp.

    • Escherichia coli

    • Haemophilus spp.

    • Klebsiella spp.

    • Salmonella enteritidis

    • Staphylococcus aureus

    • Streptococcus spp.

    • Treponema spp.

    • Vibrio spp.

  • Skupina 3:

    • Môžu spôsobiť závažné ochorenie ľudí; môžu predstavovať riziko rozšírenia v populácii.

    • Obvykle je k dispozícii účinná profylaxia alebo liečba.

    • Príklady mikroorganizmov:

    • Bacillus anthracis

    • Brucella abortus

    • Burkholderia mallei

    • Chlamydophila psittaci (vtáčie kmene)

    • Coxiella burnetii

    • Escherichia coli – enterohemoragické kmene

    • Francisella tularensis (typ A)

    • Mycobacterium leprae

    • Mycobacterium tuberculosis

    • Rickettsia rickettsii

    • Shigella dysenteriae (typ 1)

    • Yersinia pestis

    • Huby ako Blastomyces dermatitidis

    • Vírusy ako HIV, rabies, hepatitída B.

    • Prióny vyvolávajúce TSEs.

  • Skupina 4:

    • Spôsobujú závažné ochorenie ľudí a sú vážnym nebezpečenstvom pre zamestnancov.

    • Môžu predstavovať vysoké riziko rozšírenia v populácii.

    • Obvykle nie je k dispozícii účinná profylaxia alebo liečba.

    • Príklady: Vírusy horúčky Lassa, vírus Ebola, vírus Marburg.

Ochranné opatrenia v mikrobiologických laboratóriách s úrovňou ochrany 2 (BSL 2)

  • Označenie bionebezpečia na dverách laboratória.

  • Na pracovisko majú vstup len určené osoby.

  • Zariadenie na osobnú hygienu (hygienická slučka) pred vstupom a po opustení pracovného priestoru.

  • Používanie účinných osobných ochranných pracovných prostriedkov.

  • Pracovné plochy musia byť ľahko umývateľné a odolné voči rôznym chemikáliám.

  • Zvláštne opatrenia na kontrolu aerosólu v ovzduší.

  • Bezpečná manipulácia s ostrými nástrojmi a ich zneškodňovanie.

  • Autokláv umiestnený v budove.

  • Účinná kontrola vektorov (napr. hlodavcov a hmyzu).

Zásady bezpečnosti práce v mikrobiologickom laboratóriu

  • Ochranný odev sa používa výlučne v priestoroch infekčného pracoviska.

  • Pri práci s virulentnými mikroorganizmami sa používajú ďalšie ochranné prostriedky.

  • Na pracovisko sa neprinášajú nepotrebné osobné predmety.

  • V laboratóriu sa nikdy neje, nepije ani nefajčí.

  • Pri pipetovaní sa používajú gumové balóniky alebo odsávačky.

  • Dôsledne sa dodržiavajú pracovné postupy a rýchle a spoľahlivé vykonanie úkonov.

  • Nádobky s infekčným materiálom sa otvárajú len na nevyhnutný čas.

  • Kontaminované predmety sa vhadzujú do určených nádob.

  • Ruky sa dezinfikujú dezinfekčným mydlom a následne dezinfekčným prostriedkom.

  • Pracovisko sa pravidelne dezinfikuje.

  • Na rizikové pracoviská nemajú prístup tehotné ženy.

Pred vstupom na praktické cvičenia z mikrobiológie

  • Vypnete zvonenie mobilných telefónov.

  • Zopnete si vlasy.

  • Skontrolujete si dĺžku nechtov - nesmú presahovať za špičky prstov.

  • Nachystáte si poznámkový blok a pero (na pracovné stoly sa umiestňuje len toto).

V mikrobiologickom laboratóriu

  • Dodržiavajte hygienické opatrenia na prevenciu náhodného prenosu biologického faktora z laboratória.

  • Pri ranách na rukách si vypýtajte ochranné rukavice.

  • Nehodu či úraz okamžite ohláste vyučujúcemu.

  • Po ukončení práce upracte pracovnú plochu a dezinfikujte ju.

Pri odchode

  • Skontrolujte svoje pracovné miesto.

  • Umyte si ruky (mydlo a voda, delozvkezt dezinfekčným prostriedkom).

  • V šatni si odložte laboratórny plášť.

  • Zoberte si svoje osobné veci.

  • Zapamätajte si, čo najviac.

Praktická časť – výter z tonzíl

  • Jedným sterilným vatovým tampónom otrieme povrch oboch mandlí.

    • Taktiež sa nesmieme dotknúť koreňa jazyka.

  • Po odbere tampón vložíme do transportného média (AMIES s aktívnym uhlím).

  • Výter z tampóna vyočkujeme na krvný agar (KA) krížovým rozterom:

    1. Rotácia tampónu po povrchu.

    2. Prvé riedenie (sada čiar).

    3. Druhé riedenie (sada čiar).

    4. Tretie riedenie (zvlnená čiara).