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ESPECTROFOTOMETRÍA ULTRAVIOLETA (UV)
La
espectrofotometría UV mide la absorción de luz en la región de 200 400 nm, donde ocurren transiciones
electrónicas de alta energía (n→ π→π*)
Muchos
analitos orgánicos e inorgánicos absorben en esta región, permitiendo su cuantificación mediante la Ley de
Beer Lambert
Componentes
del equipo
Fuente de luz: Deuterio
Monocromador: rejilla
Celdas de cuarzo
Detector: Fotomultiplicador
Aplicaciones en plantas
Cuantificación de polifenoles, flavonoides, ácidos nucleicos.
Determinación indirecta de micronutrientes mediante complejación con colorantes UV.
Medición de nitratos (NO₃⁻) en extractos vegetales.
Ventajas
Alta sensibilidad
Rapidez
Permite análisis directo sin derivatización
Limitaciones
No todos los micronutrientes absorben en UV de forma directa.
Interferencias por turbidez o color natural.
ESPECTROFOTOMETRÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA (AAS/AAS
FAAS/GF AAS)
La
AAS mide la absorción de luz por átomos libres en estado fundamental
Cada elemento ( Zn, Cu, Mn, Ca, Mg, B, Mo, Na K) absorbe en longitudes de onda específicas
La
muestra debe ser atomizada
En llama (FAAS)
En horno de grafito (GF AAS) → mayor sensibilidad
Componentes del equipo
Fuente de luz: lámparas de cátodo hueco
Atomizador: llama o horno de grafito
Monocromador
Detector (fotomultiplicador)
Ventajas
Muy alta selectividad (cada elemento tiene su λ específica)
Sensibilidad en ppm y ppb
Ideal para plantas
Limitaciones
No permite análisis simultáneo multielemento (uno por
Requiere digestión ácida (HNO₃, H₂O₂)
APLICACIÓN DIRECTA EN EL OBJETIVO: CUANTIFICACIÓN DE MICRONUTRIENTES EN PLANTAS
Micronutrientes más analizados
Fe, Zn, Cu, Mn → AAS o UV Vis (complejos
coloreados)
Boro → UV o colorimetría (azometina H)
Molibdeno → método tiocianato
Mg, Ca → AAS o espectrofotometría visible
Cl⁻ → UV o métodos colorimétricos
Preparación de muestras vegetales
1.
Secado de tejido vegetal (60 70 C)
2.
Molienda
3.
Digestión ácida:
HNO₃ concentrado
H₂O₂
En bloque digestor o microondas
4.
Filtración y aforo a volumen conocido