Préparation des coupes histologiques
Préparation des coupes histologiques
Différents types de prélèvements
- Prélèvements cytologiques
- Prélèvements tissulaires
Prélèvements cytologiques
- Recueil de liquide spontané
- Raclage et brossage
- PAAF (Ponction aspiration à l'aiguille fine)
- Apposition de tissu
Prélèvements tissulaires
- Biopsies
- Pièces opératoires
- Autopsies
Enregistrement
Informations à enregistrer:
- Identité du patient
- Siège, date et nature du prélèvement
- Histoire clinique
- Aspect de la lésion (sonographie, radiographie, endoscopie)
- Antécédents pathologiques du patient
- Nom et coordonnées du patient
Fixation
- Définition : Comprend la mort du tissu et l'immobilisation de ses structures et de ses composantes dans un état semblable à l'état vivant.
- Conditions :
- La fixation doit être précoce.
- Volume de fixateurs suffisants (5 à 10%).
- Récipient assez grand.
- Organes creux doivent être ouverts.
- Les fixateurs utilisés ne doivent pas rendre les tissus non colorables.
- Types de fixateurs :
- Biopsies et pièces opératoires : Formol 10% / Liquide de Bouin / Congélation
- Cytologies : Spray fixateurs / Alcool 95 degrés
- Microscopie électronique : Glutaraldéhyde / acide osmique
Étude macroscopique
- Examen du spécimen:
- Mensuration du spécimen
- La pesée (organes pleins)
- Size – Shape - Consistency - Color
- Tranches de section : plane et régulière
- Rapport macroscopique:
- Un rapport rédigé renseigne sur les résultats de l'examen visuel.
- Il sera concis, précis et direct.
Histotechnique (les différentes étapes)
- Le traitement des tissus comprend les étapes suivantes :
- Fixation
- Circulation (Imprégnation)
- Enrobage
- Microtomie
- Etalement
- Coloration
- Montage
- Préparation des plateaux et distribution
1) Fixation
2) Circulation (Imprégnation)
Trois étapes :
- a) Déshydratation à l'alcool 70% -> 95% -> 100%. Durée : 1 heure.
- b) Eclaircissement au xylène
- c) Imprégnation à la paraffine
3) Enrobage
Le tissu imprégné de paraffine est inclus dans un bloc de paraffine.
4) La microtomie
Coupes fines (5 Mc) et régulières.
5) Etalement
Les coupes sont collées sur des lames de verre.
6) Coloration
- Étapes préparatoires à la coloration :
- Déparaffinage -> agent éclaircissant
- Réhydratation -> agent déshydratant (dans l'ordre décroissant)
7) Le montage
- Définition : L'étape qui consiste à fixer à l'aide d'une substance appropriée une lamelle de verre sur les échantillons histologiques après coloration.
- Le montage proprement dit a un double intérêt :
- Protection des coupes colorées
- Diminution de la diffraction
- Le montage est la dernière étape technique, les lames une fois préparées sont déposées sur un plateau bien préparé pour faire la distribution et la lecture.