Bakteri Genetiği Notları
Bakteri Genetiği
Giriş
- Uzaktan eğitim dersleri için hazırlanmış yazılı ve görsel materyal.
Bakteri Genetiği Tanımları
- Bir organizmanın genetik materyalinin toplamı genom olarak tanımlanır.
- Bakteri genomu:
- Tüm esansiyel genleri taşıyan bir tek kromozom,
- Genellikle non-esansiyel genleri taşıyan bir veya daha fazla farklı plazmid içerir.
Kromozom
- Sadece bakterilere ait olan uzun ve çembersel çift zincirli DNA üzerinde tüm esansiyel ve birçok non-esansiyel genler taşınır.
- Bakteri kromozomu, plazmid adı verilen ve kromozomun 1/10’undan daha küçük DNA halkaları taşır.
- Plazmidler: Bakteri kromozomundan bağımsız olarak replike olurlar ve hücrede birden fazla bulunabilirler.
- Replikasyon özelliği: Plazmidler, toksin ve antibiyotiklere direnç genlerini taşıyabilirler.
- Üremek ve replike olmak için gerekli değiller.
Transpozonlar
- Bakteriler, plazmidler arasında ya da plazmid ile kromozom arasında yer değiştirebilen hareketli DNA dizileri taşır.
- Transpozonlar, antibiyotik direnç genlerini taşıyabilirler.
Bakteriyofaj (Faj)
- Bakteri virüsü anlamına gelir.
- Bakteri hücresinde çoğalırlar ve koruyucu protein bir kılıfla çevrilmiş bir parça nükleik asit içerirler.
- Genomları DNA veya RNA olabilir.
Replikasyon Döngüsü
- Fajın hücre yüzeyindeki reseptöre bağlanması ile başlar.
- Nükleik asit bakteriye enjekte edilirken, protein kılıfı hücre dışında kalır.
- Faj DNA’sı hücrenin biyosentetik araçlarını ele geçirir ve kendi genetik materyalinin replikasyonunu sağlar.
- Yeterli kılıf proteini ve faj DNA’sı biriktiğinde, DNA faj kılıfı ile çevrilir ve olgun faj partikülleri ortaya çıkar.
- Bakteri hücre duvarı, fajın lizozimi ile yıkılır ve fajlar dışarı salınır.
Faj Sınıflandırması
- Fajın konak bakteri ile olan ilişkisine göre virülan veya ılımlı (tempere, lizojenik) olarak sınıflanır.
- Virülan faj enfeksiyonu: Bakteri hücresinin erimesine ve ölümüne neden olur.
- Tempere faj: Enfekte olduğu bakteride faj DNA’sı, konak hücrenin kromozomuna entegre olur (profa) ve faja ait proteinler sentezlenmez.
- Profaj taşıyan bakterilere lizojenik bakteri denir, profaj tekrar virülan özelliği kazanabilir.
Gen Transferi
- Genler bir bakteri hücresinden diğerine üç ayrı mekanizma ile aktarılabilir:
- Konjugasyon: Bakteri hücreleri arasında fiziksel temas ile genlerin nakledilmesidir.
- Transdüksiyon: Faj aracılığı ile gen aktarımıdır, doğrudan hücresel temas olmaksızın gerçekleşir.
- Transformasyon: Çıplak DNA aracılığı ile gen aktarımını ifade eder.
Konjugasyon
- Verici (erkek) ve alıcı (dişi) hücreler arasında genlerin nakledilmesi işlemi.
- Uygun genetik yapıya ve hücreler arasında DNA’nın geçebileceği bir sitoplazmik köprü oluşturma yeteneğine sahip olmalıdırlar.
Transdüksiyon
- Bakteri hücreleri arasında temas olmaksızın, bir fajın aracılığı ile gerçekleşen gen aktarımı.
- Tempere faj ile olur yani fajı alan hücre canlılığını sürdürür.
Transformasyon
- DNA’nın hücre zarından geçebilme yeteneğine bağlıdır.
- Serbest çift zincirli DNA, alıcı hücrede homolog dizinin bulunduğu bölgeyi arar.
- Deneysel klonlama süreçlerinde kullanılır.
Bakterilerde Protein Sentezi
- Protein sentezinde 3 tür RNA görev yapar: mRNA, tRNA ve rRNA.
- Mesenger RNA (mRNA): DNA iplikçiklerinden RNA polimerase enzimi tarafından sentezlenir ve protein sentezi için gerekli bilgileri taşır.
- Prokaryotik mRNA çok dayanıksızdır ve ömrü 1-3 dakikadır.
- Birden fazla genin kodlarına sahiptir (polisistronik mRNA).
Transfer RNA (tRNA)
- Protein sentezinde, sentetase enzimi tarafından aktive edilen amino asitleri ribosomlarda sıralanan kodonlara taşır.
- Her amino asit için bir veya daha fazla tRNA çeşidi bulunur.
- Üç boyutlu yapıya sahiptir ve 5 kola sahiptir.
Ribosomal RNA (rRNA)
- Ribozomun yapısal ve fonksiyonel bir parçasıdır.
- Prokaryotlarda 70S ribozom 2 alt üniteden oluşur: 50S ve 30S alt üniteleri.
Transkripsiyon Süreci
Başlama: RNA polimerase, DNA'nın 5'-ucuna yakın promotor bölgesine bağlanır.
- mRNA sentezi başlangıç kodonu (AUG) ile başlar.
Zincir Uzaması: RNA polimerase enzim DNA'yı açarak ilerlerken mRNA sentezlenir.
Terminasyon: RNA polimerase, terminatör sekansa geldiğinde durur ve zincir serbest kalır.
- İki tür terminasyon mekanizması vardır:
- Rho faktörü bağımsız sonlanma.
- Rho faktörü bağımlı sonlanma.
- İki tür terminasyon mekanizması vardır:
Translasyon Süreci
- Mesenger RNA üzerindeki kodlar ribozomlarda deşifre edilerek amino asit sıraları polipeptid haline dönüştürülür.
- Protein sentezi dört basamağa ayrılır:
- Aktivasyon
- Başlama
- Zincir uzaması
- Bitiş (terminasyon)
Aktivasyon
- Sitoplazmada bulunan amino asitler, uygun tRNA ile birleşir.
- Amino asitlerin bağlanmasında aminoacyl synthetase enzimi görev alır.
Başlama
- Formil metionini taşıyan fmet tRNA ile başlar.
- Tüm sürecin başlatılmasında önemli faktörler bulunmaktadır:
- Başlatma faktörleri (IF-1, IF-2, IF-3) mRNA ve ribozom üzerinde bağlanmak üzere görev alır.
Zincir Uzaması
- Kodon tanıma, translokasyon ve transpeptidasyon olmak üzere 3 kısımda gerçekleşir:
- Kodon tanıma: mRNA kodonu ile tRNA antikodonu arasında bağ kurulmasıdır.
- Translokasyon: Ribozomun mRNA üzerinde bir kodon boyu kaymasıdır.
- Transpeptidasyon: Peptid bağının kurulmasıdır.
Bitiş (Sonlanma)
- mRNA üzerindeki sonlanma kodonları (stop kodonlar) etkili olur.
- Bakteriler en çok UAA kodonunu kullanır.
- Serbest bırakma faktörleri sayesinde polipeptid zinciri son bulur.
Önemli Notlar
- Prokaryotlarda ekspresyon (transkripsiyon ve translasyon) sitoplazmada gerçekleşir.
- Ribozomlar mRNA üzerinde 5' → 3' yönünde hareket eder.
- Birçok ribosom aynı anda mRNA'yı okuyabilir.
- Prokaryotlarda mRNA genellikle polisistroniktir.
- Protein sentezi bakterilerde hızlıdır; 37°C'de saniyede yaklaşık 15 amino asit eklenebilir.
- Translasyon inhibitörleri: Kloramfenikol, Eritromisin, Streptomisin gibi bazı antibiyotikler bakteri protein sentezine etki eder.