Bakteri Genetiği Notları

Bakteri Genetiği

Giriş

  • Uzaktan eğitim dersleri için hazırlanmış yazılı ve görsel materyal.

Bakteri Genetiği Tanımları

  • Bir organizmanın genetik materyalinin toplamı genom olarak tanımlanır.
  • Bakteri genomu:
    • Tüm esansiyel genleri taşıyan bir tek kromozom,
    • Genellikle non-esansiyel genleri taşıyan bir veya daha fazla farklı plazmid içerir.

Kromozom

  • Sadece bakterilere ait olan uzun ve çembersel çift zincirli DNA üzerinde tüm esansiyel ve birçok non-esansiyel genler taşınır.
  • Bakteri kromozomu, plazmid adı verilen ve kromozomun 1/10’undan daha küçük DNA halkaları taşır.
    • Plazmidler: Bakteri kromozomundan bağımsız olarak replike olurlar ve hücrede birden fazla bulunabilirler.
    • Replikasyon özelliği: Plazmidler, toksin ve antibiyotiklere direnç genlerini taşıyabilirler.
    • Üremek ve replike olmak için gerekli değiller.

Transpozonlar

  • Bakteriler, plazmidler arasında ya da plazmid ile kromozom arasında yer değiştirebilen hareketli DNA dizileri taşır.
  • Transpozonlar, antibiyotik direnç genlerini taşıyabilirler.

Bakteriyofaj (Faj)

  • Bakteri virüsü anlamına gelir.
    • Bakteri hücresinde çoğalırlar ve koruyucu protein bir kılıfla çevrilmiş bir parça nükleik asit içerirler.
    • Genomları DNA veya RNA olabilir.
Replikasyon Döngüsü
  • Fajın hücre yüzeyindeki reseptöre bağlanması ile başlar.
  • Nükleik asit bakteriye enjekte edilirken, protein kılıfı hücre dışında kalır.
  • Faj DNA’sı hücrenin biyosentetik araçlarını ele geçirir ve kendi genetik materyalinin replikasyonunu sağlar.
  • Yeterli kılıf proteini ve faj DNA’sı biriktiğinde, DNA faj kılıfı ile çevrilir ve olgun faj partikülleri ortaya çıkar.
  • Bakteri hücre duvarı, fajın lizozimi ile yıkılır ve fajlar dışarı salınır.
Faj Sınıflandırması
  • Fajın konak bakteri ile olan ilişkisine göre virülan veya ılımlı (tempere, lizojenik) olarak sınıflanır.
    • Virülan faj enfeksiyonu: Bakteri hücresinin erimesine ve ölümüne neden olur.
    • Tempere faj: Enfekte olduğu bakteride faj DNA’sı, konak hücrenin kromozomuna entegre olur (profa) ve faja ait proteinler sentezlenmez.
    • Profaj taşıyan bakterilere lizojenik bakteri denir, profaj tekrar virülan özelliği kazanabilir.

Gen Transferi

  • Genler bir bakteri hücresinden diğerine üç ayrı mekanizma ile aktarılabilir:
    • Konjugasyon: Bakteri hücreleri arasında fiziksel temas ile genlerin nakledilmesidir.
    • Transdüksiyon: Faj aracılığı ile gen aktarımıdır, doğrudan hücresel temas olmaksızın gerçekleşir.
    • Transformasyon: Çıplak DNA aracılığı ile gen aktarımını ifade eder.
Konjugasyon
  • Verici (erkek) ve alıcı (dişi) hücreler arasında genlerin nakledilmesi işlemi.
    • Uygun genetik yapıya ve hücreler arasında DNA’nın geçebileceği bir sitoplazmik köprü oluşturma yeteneğine sahip olmalıdırlar.
Transdüksiyon
  • Bakteri hücreleri arasında temas olmaksızın, bir fajın aracılığı ile gerçekleşen gen aktarımı.
    • Tempere faj ile olur yani fajı alan hücre canlılığını sürdürür.
Transformasyon
  • DNA’nın hücre zarından geçebilme yeteneğine bağlıdır.
    • Serbest çift zincirli DNA, alıcı hücrede homolog dizinin bulunduğu bölgeyi arar.
    • Deneysel klonlama süreçlerinde kullanılır.

Bakterilerde Protein Sentezi

  • Protein sentezinde 3 tür RNA görev yapar: mRNA, tRNA ve rRNA.
  • Mesenger RNA (mRNA): DNA iplikçiklerinden RNA polimerase enzimi tarafından sentezlenir ve protein sentezi için gerekli bilgileri taşır.
    • Prokaryotik mRNA çok dayanıksızdır ve ömrü 1-3 dakikadır.
    • Birden fazla genin kodlarına sahiptir (polisistronik mRNA).
Transfer RNA (tRNA)
  • Protein sentezinde, sentetase enzimi tarafından aktive edilen amino asitleri ribosomlarda sıralanan kodonlara taşır.
  • Her amino asit için bir veya daha fazla tRNA çeşidi bulunur.
  • Üç boyutlu yapıya sahiptir ve 5 kola sahiptir.
Ribosomal RNA (rRNA)
  • Ribozomun yapısal ve fonksiyonel bir parçasıdır.
  • Prokaryotlarda 70S ribozom 2 alt üniteden oluşur: 50S ve 30S alt üniteleri.
Transkripsiyon Süreci
  1. Başlama: RNA polimerase, DNA'nın 5'-ucuna yakın promotor bölgesine bağlanır.

    • mRNA sentezi başlangıç kodonu (AUG) ile başlar.
  2. Zincir Uzaması: RNA polimerase enzim DNA'yı açarak ilerlerken mRNA sentezlenir.

  3. Terminasyon: RNA polimerase, terminatör sekansa geldiğinde durur ve zincir serbest kalır.

    • İki tür terminasyon mekanizması vardır:
      • Rho faktörü bağımsız sonlanma.
      • Rho faktörü bağımlı sonlanma.
Translasyon Süreci
  • Mesenger RNA üzerindeki kodlar ribozomlarda deşifre edilerek amino asit sıraları polipeptid haline dönüştürülür.
  • Protein sentezi dört basamağa ayrılır:
    1. Aktivasyon
    2. Başlama
    3. Zincir uzaması
    4. Bitiş (terminasyon)
Aktivasyon
  • Sitoplazmada bulunan amino asitler, uygun tRNA ile birleşir.
  • Amino asitlerin bağlanmasında aminoacyl synthetase enzimi görev alır.
Başlama
  • Formil metionini taşıyan fmet tRNA ile başlar.
  • Tüm sürecin başlatılmasında önemli faktörler bulunmaktadır:
    • Başlatma faktörleri (IF-1, IF-2, IF-3) mRNA ve ribozom üzerinde bağlanmak üzere görev alır.
Zincir Uzaması
  • Kodon tanıma, translokasyon ve transpeptidasyon olmak üzere 3 kısımda gerçekleşir:
    • Kodon tanıma: mRNA kodonu ile tRNA antikodonu arasında bağ kurulmasıdır.
    • Translokasyon: Ribozomun mRNA üzerinde bir kodon boyu kaymasıdır.
    • Transpeptidasyon: Peptid bağının kurulmasıdır.
Bitiş (Sonlanma)
  • mRNA üzerindeki sonlanma kodonları (stop kodonlar) etkili olur.
  • Bakteriler en çok UAA kodonunu kullanır.
  • Serbest bırakma faktörleri sayesinde polipeptid zinciri son bulur.

Önemli Notlar

  • Prokaryotlarda ekspresyon (transkripsiyon ve translasyon) sitoplazmada gerçekleşir.
  • Ribozomlar mRNA üzerinde 5' → 3' yönünde hareket eder.
  • Birçok ribosom aynı anda mRNA'yı okuyabilir.
  • Prokaryotlarda mRNA genellikle polisistroniktir.
  • Protein sentezi bakterilerde hızlıdır; 37°C'de saniyede yaklaşık 15 amino asit eklenebilir.
  • Translasyon inhibitörleri: Kloramfenikol, Eritromisin, Streptomisin gibi bazı antibiyotikler bakteri protein sentezine etki eder.