Cromatografia Líquida

• Método de separação baseado na interação do analito com fases: estacionária e móvel.

Princípios Básicos

• A separação ocorre pela afinidade diferencial entre os componentes das misturas e a fase estacionária (fixa) e a fase móvel (fluido/solvente).

• A polaridade das moléculas determina a interação com as fases.

Evolução Histórica

• Mikhail Tswett em 1906: Isolamento visual de pigmentos de plantas.

• Martin & Synge (1941): Introdução de duas fases líquidas e novos métodos para compostos incolores.

Tipos de Cromatografia

• Cromatografia em Fase Normal: Fase estacionária polar, fase móvel apolar.

• Cromatografia em Fase Reversa: Fase estacionária apolar, fase móvel polar (exemplo: HPLC).

Instrumentação e Classificação

• Cromatografia Clássica: Tubos de vidro, gravidade, partículas grossas.

• Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC): Colunas metálicas, alta pressão, partículas ultrafinas.

MECANISMOS DE INTERAÇÃO

• Interação por adsorção, partição, troca iônica e exclusão por tamanho.

• Adsorção é a interação na fase sólida, enquanto a partição é no líquido.

Execução da Cromatografia

• Desenvolvimento: A fase móvel arrasta os componentes na coluna.

• Revelação: Pode ser física (UV) ou química (iodo).

Análise e Resultados

• Cromatograma: Representação gráfica do tempo de retenção e quantidade detectada.

• A área do pico é proporcional à concentração do analito.

Métodos de Quantificação

• Normalização interna e externa para calcular concentrações baseadas em áreas de pico.

• A precisão depende do controle de injeção e sensibilidade do detector.