ANSI-ASB Standard 054 1st ed 2021_Standard for a Quality Control Program in Forensic Toxicology Laboratories (3)
Standar Program Kontrol Kualitas di Laboratorium Toksikologi Forensik
1 Ruang Lingkup
Dokumen ini menetapkan persyaratan minimum untuk praktik kontrol kualitas di laboratorium toksikologi forensik.
Menjelaskan pentingnya program kontrol kualitas, pemilihan, dan perawatan materi untuk menyiapkan sampel kontrol kualitas.
Mencakup persiapan dan penggunaan yang tepat dari sampel kalibrator dan kontrol.
Memberikan arahan untuk peninjauan dan pemantauan data kontrol kualitas.
Berlaku untuk laboratorium yang melakukan analisis toksikologi forensik dalam sub-disiplin berikut:
Toksikologi forensik postmortem.
Toksikologi kinerja manusia (misalnya, kejahatan dengan bantuan narkoba dan mengemudi di bawah pengaruh alkohol atau narkoba).
Pengujian narkoba untuk pekerjaan yang tidak diatur.
Toksikologi yang diperintahkan pengadilan (misalnya, masa percobaan dan pembebasan bersyarat, pengadilan narkoba, layanan anak).
Toksikologi forensik umum (keracunan atau intoksikasi non-mematikan).
Tidak ditujukan untuk bidang toksikologi alkohol napas.
2 Referensi Normatif
Referensi berikut adalah dokumen yang sangat penting untuk penerapan standar ini.
Untuk referensi bertanggal, hanya edisi yang dikutip yang berlaku.
Untuk referensi tidak bertanggal, edisi terbaru dari dokumen yang direferensikan (termasuk amandemen apa pun) berlaku.
ANSI/ASB Standard 036, Praktik Standar untuk Validasi Metode dalam Toksikologi Forensik
ANSI/ASB Standard 017, Praktik Standar untuk Keterlacakan Pengukuran dalam Toksikologi Forensik
3 Istilah dan Definisi
Istilah dan definisi berikut berlaku untuk tujuan dokumen ini.
3.1 Analit yang Menarik
Mencakup semua senyawa target dalam uji skrining, serta senyawa yang dikuantifikasi dan/atau dikonfirmasi.
3.2 Lari Analitik
"Batch"
Seperangkat standar, kontrol, dan/atau sampel kasus yang disiapkan dan/atau dianalisis secara bersamaan dalam urutan tertentu.
3.3 Sampel Matriks Kosong
Cairan atau jaringan biologis (atau pengganti sintetis) tanpa analit target atau standar internal.
3.4 Kalibrasi
Operasi yang, dalam kondisi tertentu, menetapkan hubungan antara nilai kuantitas dan indikasi yang sesuai.
3.4.1 Kalibrasi Historis
Kalibrasi yang dilakukan dan disimpan sebelum persiapan dan/atau analisis sampel kasus dan sampel kontrol kualitas.
3.4.2 Regresi Linier
Terdiri dari menemukan hubungan linier terbaik antara respons instrumen atau rasio respons (Y) dan konsentrasi analit dalam kalibrator (X).
3.4.2.1 Regresi Kuadrat
Regresi linier derajat polinomial 2.
3.4.2.2 Regresi Linier Sederhana
Regresi garis lurus hanya dengan satu variabel prediktor (derajat polinomial 1).
3.5 Kalibrator
Standar pengukuran yang digunakan dalam kalibrasi.
3.6 Kontrol
Material dengan komposisi yang diketahui yang dianalisis bersama dengan sampel tak dikenal untuk mengevaluasi kinerja prosedur analitik.
3.6.1 Kontrol Pengenceran
Kontrol positif yang diencerkan dengan cara yang sama seperti sampel kasus yang diencerkan.
3.6.2 Kontrol yang Sesuai dengan Matriks
Kontrol positif atau negatif yang disiapkan dalam matriks yang sama atau serupa dengan sampel kasus.
3.6.3 Kontrol Negatif
Sampel uji yang mirip dengan sampel kasus yang tidak mengandung analit yang menarik pada konsentrasi yang dapat dilaporkan.
Jika standar internal digunakan dalam prosedur, itu harus disertakan dalam kontrol negatif.
3.6.4 Kontrol Positif
Sampel uji seperti sampel kasus yang mengandung analit yang menarik pada konsentrasi yang diketahui.
3.6.5 Kontrol Proses
Kontrol untuk menguji proses analitik seperti hidrolisis atau oksidasi analit.
3.7 Titik Keputusan
Konsentrasi cutoff yang ditentukan secara administratif yang berada pada atau di atas batas deteksi metode atau batas kuantifikasi yang lebih rendah dan digunakan untuk membedakan antara hasil uji negatif dan positif.
3.8 Batas Deteksi
LOD
Perkiraan konsentrasi terendah analit dalam sampel yang dapat dibedakan secara andal dari matriks kosong dan memenuhi kriteria identifikasi untuk metode analitik.
3.9 Batas Kuantifikasi yang Lebih Rendah
LLOQ
Perkiraan konsentrasi terendah analit dalam sampel yang dapat diukur secara andal dengan bias dan presisi yang dapat diterima.
3.10 Metode Penambahan Standar
MSA
Prosedur kuantitatif di mana konsentrasi analit target yang diketahui ditambahkan ke beberapa alikuot sampel kasus.
3.11 Program Kontrol Kualitas
Komponen dari program jaminan kualitas yang berfokus pada memastikan keakuratan dalam hasil uji laboratorium melalui pemantauan metode uji yang cermat.
3.12 Material Kontrol Kualitas
Material yang digunakan untuk menyiapkan sampel kontrol termasuk material referensi, material referensi bersertifikat, dan sampel matriks kosong.
3.13 Material Referensi
RM
Material, cukup homogen dan stabil sehubungan dengan properti tertentu, yang telah ditetapkan agar sesuai untuk penggunaan yang dimaksudkan dalam pengukuran atau dalam pemeriksaan properti nominal.
3.13.1 Material Referensi Bersertifikat
CRM
Material referensi yang dicirikan oleh prosedur valid secara metrologis untuk satu atau lebih properti tertentu, disertai dengan sertifikat yang memberikan nilai properti tertentu, ketidakpastian terkait, dan pernyataan keterlacakan metrologis.
3.14 Kosong Pelarut
Pelarut tanpa analit atau standar internal yang menarik.
3.15 Batas Atas Kuantifikasi
ULOQ
Konsentrasi tertinggi analit dalam sampel yang dapat diukur secara andal dengan bias dan presisi yang dapat diterima.
4 Ikhtisar Program Kontrol Kualitas
4.1 Umum
Metode analitik harus divalidasi untuk memenuhi persyaratan ANSI/ASB Standard 036, Praktik Standar untuk Validasi Metode dalam Toksikologi Forensik.
Setelah validasi ini, program kontrol kualitas membantu menunjukkan bahwa metode tetap sesuai tujuan dalam penggunaan sehari-hari.
4.2 Persyaratan Program Kontrol Kualitas
Seorang individu (dengan nama apa pun) yang terbiasa dengan kebijakan dan prosedur laboratorium toksikologi harus ditunjuk untuk bertanggung jawab atas program kontrol kualitas.
Laboratorium harus memiliki program kontrol kualitas komprehensif yang mencakup hal-hal berikut:
Persyaratan material kontrol kualitas (jenis, kemurnian, sumber, kandungan, konsentrasi, matriks, persiapan, penyimpanan).
Model kalibrasi, frekuensi, dan kriteria penerimaan/penolakan.
Persyaratan kontrol (frekuensi, kriteria penerimaan/penolakan).
Proses peninjauan hasil kontrol sebelum rilis hasil kasus.
Proses pemantauan dan evaluasi hasil kontrol.
5 Sumber, Verifikasi, dan Kedaluwarsa Material Kontrol Kualitas
5.1 Umum
Pemilihan dan perawatan material yang digunakan untuk menyiapkan kalibrator dan kontrol sangat penting untuk Program Kontrol Kualitas yang efektif.
Bagian ini menguraikan persyaratan minimum untuk material yang digunakan untuk persiapan kalibrator dan kontrol.
Bentuk material harus didokumentasikan (misalnya, basa bebas, garam, gas, cair).
5.2 Sumber Material Kontrol Kualitas
5.2.1 Sampel Matriks Kosong
Setiap lot atau batch sampel matriks kosong harus dievaluasi untuk tidak adanya analit target atau gangguan sebelum atau bersamaan dengan penggunaan.
Evaluasi harus dengan teknik analitik yang digunakan untuk metode tertentu tersebut.
CONTOH Skrining ELISA negatif dari sampel darah utuh tidak cukup untuk menunjukkan bahwa tidak ada gangguan untuk metode GC/MS.
5.2.2 Material Referensi
Sifat fisik dan kimia harus ditentukan untuk material referensi yang digunakan untuk menyiapkan kalibrator dan kontrol (lihat 5.3).
Ketika digunakan untuk pengukuran kuantitatif, kemurnian juga harus ditentukan.
5.2.3 Material Referensi Analitik Komersial
Material referensi analitik komersial dapat berupa serbuk atau cairan, tetapi lebih umum adalah standar encer dengan konsentrasi yang diketahui.
CATATAN Material ini dapat memenuhi kriteria untuk Material Referensi Bersertifikat.
5.2.4 Sumber Material Referensi Lainnya
Jika tidak ada sumber material referensi konvensional, sumber lain (misalnya, tablet, cairan, material sintetis, bahan kimia, dan produk komersial) dapat digunakan, setelah dikarakterisasi dengan tepat.
Material tertentu (misalnya, tablet, pelarut komersial) mungkin hanya cocok untuk identifikasi kualitatif item dan hanya boleh digunakan ketika tidak ada opsi lain yang masuk akal.
Laboratorium harus mendokumentasikan penggunaan produk-produk ini, serta upaya yang dilakukan untuk mendapatkannya dari sumber konvensional.
5.3 Verifikasi Kualitas Material Referensi
5.3.1 Material Referensi Bersertifikat
Jika material referensi digunakan untuk menetapkan keterlacakan pengukuran, persyaratan ANSI/ASB Standard 017, Praktik Standar untuk Keterlacakan Pengukuran dalam Toksikologi Forensik harus diikuti.
Jika material referensi disertai dengan sertifikat analisis yang dapat diterima, seperti yang didefinisikan dalam ANSI/ASB Standard 017, laboratorium dapat menggunakan material tersebut untuk analisis kualitatif dan/atau kuantitatif tanpa verifikasi lebih lanjut.
Sertifikat analisis harus dipelihara sesuai dengan kebijakan penyimpanan catatan laboratorium.
5.3.2 Material Referensi Tidak Bersertifikat
Untuk material tanpa sertifikat analisis yang dapat diterima, laboratorium harus mengkarakterisasi senyawa target dengan minimal dua teknik elusidasi struktural.
Ini dapat dilakukan di dalam laboratorium itu sendiri atau dikontrakkan ke laboratorium lain.
Teknik dapat mencakup, tetapi tidak terbatas pada:
Spektroskopi inframerah transformasi Fourier.
Spektrometri massa (pemindaian penuh dampak elektron, pemindaian penuh ionisasi kimia, resolusi tinggi atau tandem).
CATATAN Dua jenis spektrometri massa yang berbeda tidak memenuhi kriteria minimum.
Spektroskopi resonansi magnetik nuklir
Difraksi sinar-X
Hasil harus dibandingkan dengan spektrum perpustakaan, spektrum yang diterbitkan, atau laboratorium dapat menjelaskan struktur dari spektrum yang dihasilkan
Catatan karakterisasi material referensi oleh laboratorium harus dipelihara sesuai dengan kebijakan penyimpanan catatan laboratorium.
5.3.3 Persyaratan Tambahan untuk Material Referensi Tidak Bersertifikat yang Digunakan untuk Kuantifikasi
Jika material referensi akan digunakan secara kuantitatif dan sertifikasi kemurnian atau konsentrasi tidak tersedia, maka laboratorium harus menetapkan kemurnian atau konsentrasi dengan minimal dua teknik.
Teknik dapat mencakup:
Kromatografi gas-detektor ionisasi api.
Spektroskopi resonansi magnetik nuklir.
Titik lebur.
Absorptivitas molar.
Spektrometri massa.
CATATAN Dua jenis spektrometri massa yang berbeda tidak memenuhi kriteria minimum.
Catatan karakterisasi internal material referensi oleh laboratorium harus dipelihara sesuai dengan kebijakan penyimpanan catatan laboratorium.
5.4 Penyimpanan dan Kedaluwarsa Material Referensi
Ketika diberikan, kondisi penyimpanan yang direkomendasikan produsen untuk material referensi harus diikuti.
Jika kondisi penyimpanan tidak dinyatakan secara eksplisit, laboratorium harus menentukan penyimpanan yang sesuai berdasarkan evaluasi historis, referensi literatur, atau penyimpanan senyawa serupa.
Jika produsen material referensi memberikan tanggal kedaluwarsa (kadang-kadang disebut sebagai tanggal uji ulang), laboratorium harus mematuhi tanggal tersebut kecuali produsen telah memberikan perpanjangan tertulis.
Dalam kasus seperti itu, tanggal kedaluwarsa baru dapat digunakan.
Jika produsen tidak memberikan tanggal kedaluwarsa, laboratorium harus menetapkan tanggal kedaluwarsa berdasarkan evaluasi historis, referensi literatur, atau stabilitas senyawa/larutan serupa.
6 Persiapan, Penggunaan, Penyimpanan, dan Kedaluwarsa Kalibrator dan Kontrol
6.1 Persiapan dan Penggunaan Kalibrator dan Kontrol
Sampel yang cocok dengan matriks harus digunakan sebagai kalibrator kecuali validasi telah membenarkan penggunaan kalibrator yang tidak cocok dengan matriks.
Jika memungkinkan, kontrol yang cocok dengan matriks harus digunakan.
CATATAN Beberapa prosedur khusus produsen menentukan penggunaan kalibrator dan/atau kontrol yang tidak berada dalam matriks yang sama dengan sampel kasus (misalnya, matriks sintetis).
Dalam kasus ini, tepat untuk menggunakan kalibrator dan kontrol yang direkomendasikan produsen, asalkan validasi yang sesuai telah mengkonfirmasi penggunaannya dengan matriks yang digunakan untuk metode tersebut.
Kalibrator dan kontrol yang disiapkan secara komersial yang dibeli dari vendor yang memiliki sertifikat analisis yang dapat diterima dapat digunakan tanpa verifikasi lebih lanjut.
Kalibrator dan kontrol komersial yang tidak memiliki sertifikat analisis yang dapat diterima harus diverifikasi untuk mengkonfirmasi identitas analit yang menarik dan untuk menetapkan konsentrasi target mereka.
Verifikasi harus mencakup memenuhi semua persyaratan kontrol kualitas yang ditetapkan dalam pengujian.
Material yang digunakan untuk menyiapkan kalibrator dan kontrol di rumah harus diperoleh dalam urutan preferensi berikut untuk mencapai tingkat independensi terbesar:
Dari produsen terkemuka yang berbeda, atau;
Dari produsen yang sama, tetapi dari lot yang berbeda, atau;
Dari lot produsen yang sama, tetapi disiapkan oleh analis yang berbeda.
Kalibrator dan kontrol yang disiapkan di rumah harus diverifikasi agar sesuai dengan konsentrasi target.
Verifikasi harus mencakup memenuhi semua persyaratan kontrol kualitas yang ditetapkan dalam pengujian.
6.2 Kondisi Penyimpanan Kalibrator dan Kontrol
Ketika diberikan, kondisi penyimpanan yang direkomendasikan produsen untuk kalibrator dan kontrol komersial harus diikuti.
Jika kondisi penyimpanan tidak dinyatakan secara eksplisit untuk kalibrator dan kontrol komersial, laboratorium harus menentukan penyimpanan yang sesuai berdasarkan evaluasi historis, referensi literatur, atau penyimpanan senyawa serupa.
Kondisi penyimpanan material kontrol kualitas yang disiapkan di rumah harus ditetapkan oleh laboratorium dengan konsultasi informasi tentang material referensi yang digunakan untuk membuat kalibrator dan kontrol (misalnya, sertifikat analisis).
6.3 Kedaluwarsa Kalibrator dan Kontrol
Kalibrator atau kontrol yang disiapkan secara komersial.
Jika produsen memberikan tanggal kedaluwarsa untuk kalibrator atau kontrol yang disiapkan secara komersial, laboratorium harus mematuhi tanggal tersebut kecuali laboratorium mengkonfirmasi stabilitas material yang berkelanjutan dengan setiap penggunaan berikutnya setelah tanggal kedaluwarsa.
Ini harus dilakukan menggunakan lot material referensi yang tidak kedaluwarsa terpisah.
Jika produsen tidak memberikan tanggal kedaluwarsa, laboratorium harus menetapkan tanggal kedaluwarsa berdasarkan evaluasi historis, referensi literatur, atau stabilitas senyawa atau larutan serupa.
Kalibrator atau kontrol yang disiapkan di rumah.
Untuk kalibrator dan kontrol yang disiapkan di rumah (misalnya, pengenceran material referensi), laboratorium harus menetapkan tanggal kedaluwarsa berdasarkan evaluasi historis (yaitu, perbandingan dengan lot kalibrator atau kontrol yang tidak kedaluwarsa terpisah), referensi literatur, atau stabilitas senyawa atau larutan serupa.
Sebagai alternatif, kedaluwarsa dapat ditetapkan ke tanggal kedaluwarsa terpendek dari komponen targetnya.
6.4 Dokumentasi Kalibrator dan Kontrol
Laboratorium harus memiliki dokumentasi untuk elemen-elemen berikut dari material kalibrator dan kontrol kualitas:
Kandungan dan konsentrasi.
Tanggal diterima, dibuka, disiapkan, dan/atau direkonstitusi oleh laboratorium.
Tanggal kedaluwarsa.
Identifikasi analis yang menyiapkan material (jika berlaku).
Nomor lot atau pengidentifikasi unik.
Nama atau identifikasi material (misalnya, nama laboratorium untuk material yang diidentifikasi dalam SOP seperti multi drug level 1, level 2, dll.).
Persyaratan penyimpanan.
Minimal, wadah penyimpanan harus diberi label dengan nama/identifikasi, nomor lot/pengidentifikasi unik lainnya, dan tanggal kedaluwarsa.
7 Persyaratan Kalibrasi untuk Prosedur Kuantitatif
7.1 Umum
Model dan rentang kalibrasi untuk pengujian harus ditentukan dalam prosedur analitik laboratorium dan tidak boleh menyimpang dari model dan rentang yang didokumentasikan dalam validasi metode.
Kecuali menggunakan kalibrasi historis (Bagian 7.4), semua prosedur harus dikalibrasi setiap hari atau sebelum batch analitik baru.
7.2 Model Kalibrasi
Untuk model kalibrasi regresi linier sederhana, laboratorium harus menggunakan minimal empat kalibrator dan kecocokan kurva tidak boleh dipaksakan melalui titik asal.
Untuk model kalibrasi regresi kuadrat, laboratorium harus menggunakan minimal 6 kalibrator dan kecocokan kurva tidak boleh dipaksakan melalui titik asal.
Kalibrator nol tidak boleh dianggap sebagai titik kalibrasi dalam kurva kalibrasi.
CATATAN Beberapa teknik khusus produsen (misalnya, CO-Oximetry) menggunakan satu kalibrator untuk menetapkan model kalibrasi regresi linier sederhana dengan memaksa titik kalibrasi kedua melalui nol.
Dalam kasus ini, jika laboratorium mengikuti metode produsen, dapat diterima untuk melakukannya asalkan metode tersebut telah divalidasi dengan tepat oleh produsen dan diverifikasi di rumah untuk memenuhi persyaratan bias dan presisi yang dinyatakan dalam ANSI/ASB Standard 036, Praktik Standar untuk Validasi Metode dalam Toksikologi Forensik.
7.3 Menjatuhkan Kalibrator
Jika laboratorium ingin menjatuhkan kalibrator dari kurva kalibrasi, hal berikut harus dipenuhi:
Laboratorium harus menentukan kriteria yang digunakan untuk menjatuhkan kalibrator. Kalibrator tidak boleh dijatuhkan hanya untuk meningkatkan kecocokan kurva atau kepatuhan kontrol.
CATATAN Beberapa alasan yang dapat diterima untuk menjatuhkan kalibrator mungkin termasuk ekstraksi yang buruk dari sampel kalibrator tertentu atau injeksi kalibrator yang buruk.
Jumlah kalibrator akhir tidak boleh jatuh di bawah jumlah minimum berdasarkan model regresi (Bagian 7.2).
Alasan menjatuhkan kalibrator harus didokumentasikan dalam catatan dan data yang mendukung keputusan tersebut harus disimpan bersama batch.
Jika titik kalibrasi terendah atau tertinggi dijatuhkan, parameter pelaporan harus disesuaikan sesuai.
CONTOH Jika kalibrator terendah dinyatakan sebagai LLOQ metode dan selanjutnya dihapus dari kurva kalibrasi, kalibrator terendah berikutnya harus menjadi LLOQ.
Praktik menjatuhkan kalibrator harus dilacak untuk menentukan frekuensi, jenis kalibrator (konsentrasi dan analit), dan analis.
7.4 Kalibrasi Historis
Penggunaan kalibrasi historis yang dapat diterima untuk pengujian kuantitatif harus ditunjukkan melalui validasi metode sebelum digunakan.
Setelah itu, kalibrasi historis harus diperiksa dengan kontrol yang diproses bersamaan dengan sampel kasus.
Kalibrasi baru harus dilakukan setelah pemeliharaan atau perbaikan instrumen yang dapat memengaruhi kalibrasi, persiapan larutan standar internal baru, atau kegagalan kontrol yang terkait dengan kalibrasi.
7.5 Kriteria Penerimaan Kalibrasi
Laboratorium harus menentukan parameter untuk menerima kalibrasi dan setiap kalibrasi harus dievaluasi terhadap kriteria yang telah ditentukan ini.
Minimal, kriteria berikut harus digunakan untuk menerima kalibrasi.
Kriteria untuk penerimaan kecocokan kurva akan menjadi koefisien determinasi ( nilai) 0,990 atau lebih baik.
Konsentrasi kalibrator relatif terhadap kurva kalibrasi yang ditetapkan harus dievaluasi terhadap bias maksimum yang dapat diterima
(seperti yang didefinisikan dalam rencana validasi) atau maksimum ± 20% dari konsentrasi target kalibrator, mana yang lebih kecil.
Jika kalibrasi tidak dapat diterima, alasan kegagalan harus didokumentasikan dan batch ditolak untuk analit yang berlaku.
Setiap analit harus dievaluasi secara independen dan kegagalan kalibrasi untuk satu analit tidak membatalkan kalibrasi analit lain dalam pengujian tersebut.
8 Persyaratan Kontrol
8.1 Umum
Kontrol memverifikasi kinerja pengujian secara rutin. Pemilihan tingkat kontrol positif harus didasarkan pada titik keputusan, signifikansi forensik, dan/atau kriteria analitik.
Minimal, yang berikut ini berlaku untuk penggunaan kontrol dalam semua analisis toksikologi forensik.
Semua kontrol harus diuji dan diperlakukan sama dengan sampel kasus.
Kontrol negatif dan positif harus disertakan dengan setiap batch analitik.
Kontrol proses harus disertakan ketika prosedur mencakup teknik seperti hidrolisis atau oksidasi.
Laboratorium harus menentukan parameter untuk menerima atau menolak kontrol (Bagian 8.3). Setiap sampel kontrol harus diperiksa penerimaannya menggunakan kriteria yang telah ditentukan ini.
Sampel kasus harus secara kolektif diapit oleh kontrol selama urutan lari instrumental.
8.2 Persyaratan Kontrol Khusus Berdasarkan Ruang Lingkup Pengujian
8.2.1 Umum
Jumlah dan jenis kontrol tergantung pada tujuan pengujian. Laboratorium dapat mempertimbangkan untuk menggunakan lebih banyak kontrol daripada minimum yang disyaratkan oleh standar ini.
Pertimbangan dampak kegagalan kontrol tunggal pada batch besar dapat menjamin lebih dari jumlah minimum kontrol yang ditentukan di bawah ini.
Misalnya, kontrol tambahan dapat memungkinkan penerimaan batch parsial.
8.2.2 Pengujian Skrining Tidak Bertarget (termasuk immunoassay)
Minimal, lari analitik yang melibatkan pengujian tidak bertarget dan immunoassay harus mencakup yang berikut.
Satu kontrol negatif.
Satu kontrol positif yang mengandung analit representatif yang menantang kinerja pengujian dengan tidak melebihi tiga kali konsentrasi titik keputusan atau LOD.
Satu kontrol proses (sebagaimana mestinya) yang menantang efikasi proses untuk setidaknya satu analit representatif. Konsentrasi analit dalam kontrol proses harus ditetapkan oleh laboratorium.
Kit immunoassay dapat menyediakan kontrol yang mengandung analit target pengujian. Dalam beberapa situasi, mungkin diinginkan untuk menggunakan analit sebagai kontrol yang kurang reaktif silang dalam kelas obat daripada yang dirancang untuk dideteksi oleh immunoassay.
Jika digunakan, laboratorium harus mendokumentasikan, memvalidasi, dan menentukan penggunaan tersebut.
8.2.3 Pengujian Skrining Bertarget (termasuk teknik instrumental dan non-instrumental)
Minimal, lari analitik yang melibatkan pengujian bertarget (termasuk teknik instrumental dan non-instrumental seperti uji warna) harus mencakup yang berikut.
Satu kontrol negatif.
Satu kontrol positif yang menantang batas deteksi pengujian untuk semua analit target dengan tidak melebihi tiga kali konsentrasi titik keputusan atau LOD.
Satu kontrol proses (sebagaimana mestinya) yang menantang efikasi proses untuk setidaknya satu analit representatif. Konsentrasi analit dalam kontrol proses harus ditetapkan oleh laboratorium.
8.2.4 Pengujian Konfirmasi/Identifikasi Kualitatif
Minimal, lari analitik untuk pengujian konfirmasi/identifikasi kualitatif harus mencakup yang berikut.
Satu kontrol negatif.
Satu kontrol positif yang menantang batas deteksi pengujian untuk setiap analit yang menarik dengan tidak melebihi tiga kali konsentrasi titik keputusan atau LOD.
Satu kontrol proses (sebagaimana mestinya) yang menantang efikasi proses untuk setidaknya satu analit representatif. Konsentrasi analit dalam kontrol proses harus ditetapkan oleh laboratorium.
8.2.5 Pengujian Kuantitatif
Minimal, lari analitik untuk pengujian kuantitatif harus mencakup yang berikut.
Satu kontrol negatif.
Satu kontrol positif rendah yang menantang batas kuantifikasi yang lebih rendah dari pengujian untuk setiap analit yang menarik dengan tidak melebihi tiga kali konsentrasi LLOQ.
Satu kontrol positif tinggi yang menantang batas kuantifikasi yang lebih tinggi dari pengujian untuk setiap analit yang menarik dengan tidak kurang dari 80% dari konsentrasi kalibrator tertinggi.
Satu kontrol proses (sebagaimana mestinya) yang menantang efikasi proses untuk setiap analit yang menarik. Konsentrasi target analit dalam kontrol proses tidak boleh kurang dari 80% dari konsentrasi kalibrator tertinggi.
Ketika kontrol proses yang sesuai tidak tersedia secara wajar untuk semua analit yang menarik, kontrol proses yang mengandung analit yang tersedia dan representatif yang menarik harus disertakan.
8.3 Kriteria Penerimaan Kontrol Berdasarkan Ruang Lingkup Pengujian
8.3.1 Umum
Laboratorium harus menentukan parameter untuk menerima kontrol dan setiap sampel kontrol harus dievaluasi terhadap kriteria yang telah ditentukan ini.
Setiap kontrol harus dievaluasi secara independen dan kegagalan kontrol untuk satu analit tidak membatalkan kontrol analit lain dalam pengujian tersebut.
Jika kontrol ditentukan telah gagal, alasan kegagalan (jika diketahui) harus didokumentasikan.
Kriteria penerimaan untuk jumlah minimum kontrol harus dipenuhi untuk semua batch.
Laboratorium yang memilih untuk menggunakan lebih dari jumlah minimum kontrol harus memiliki kriteria yang telah ditentukan untuk penerimaan batch atau batch parsial dalam hal kegagalan kontrol.
8.3.2 Kriteria Penerimaan dan Evaluasi untuk Kontrol dalam Pengujian Skrining dan Konfirmasi/Identifikasi Kualitatif
Minimal, kriteria berikut harus digunakan untuk menerima kontrol dalam pengujian skrining dan kualitatif.
Kontrol negatif tidak boleh memiliki hasil positif untuk analit yang menarik.
Kontrol positif dan kontrol proses harus memiliki hasil positif untuk analit yang menarik. Laboratorium harus menentukan persyaratan agar analit yang menarik dianggap sebagai hasil positif.
Persyaratan ini harus mencakup parameter yang relevan seperti perubahan warna, perbedaan nilai absorbansi, waktu retensi, bentuk puncak, respons instrumen (misalnya, lebih besar dari 10% dari sinyal yang diperoleh dari kontrol positif atau kalibrator terendah), rasio sinyal terhadap kebisingan, dan/atau kriteria penerimaan data spektrum massa.
8.3.3 Kriteria Penerimaan dan Evaluasi untuk Kontrol dalam Pengujian Kuantitatif
Minimal, kriteria berikut harus digunakan untuk menerima kontrol dalam pengujian kuantitatif.
Kontrol negatif tidak boleh memiliki hasil positif untuk analit yang menarik.
Kontrol positif dan kontrol proses harus memiliki hasil positif untuk analit yang menarik. Laboratorium harus menentukan persyaratan agar analit yang menarik dianggap sebagai hasil positif.
Persyaratan ini harus mencakup parameter yang relevan seperti perubahan warna, perbedaan nilai absorbansi, waktu retensi, bentuk puncak, hasil kuantitatif lebih besar dari atau sama dengan LLOQ, rasio sinyal terhadap kebisingan, dan/atau kriteria penerimaan data spektrum massa.
Kontrol positif dan kontrol proses harus dievaluasi lebih lanjut terhadap batas kontrol yang telah ditentukan. Batas kontrol untuk pengujian kuantitatif harus ditetapkan menggunakan salah satu pendekatan berikut.
Evaluasi Statistik: Batas peringatan (rata-rata ± 2SD) dan batas kontrol (rata-rata ± 3SD) harus dihitung berdasarkan data kontrol historis.
Jika nilai terukur untuk kontrol positif atau kontrol proses berada di luar batas kontrol, kontrol harus ditolak. Jika nilai terukur berada di luar batas peringatan, tetapi di dalam batas kontrol, kontrol harus dianggap dapat diterima, tetapi kinerja kontrol harus dipantau untuk tren.
Jika tren terdeteksi, itu mungkin indikasi masalah instrumental atau prosedural dan harus ditangani sebelum kegagalan kontrol menjadi masalah yang konsisten.
Batas Kontrol Berbasis Target: Batas kontrol harus didasarkan pada persyaratan validasi metode untuk bias (misalnya, ± 20% dari target atau nilai rata-rata yang dihitung).
Batas kontrol tidak boleh melebihi bias maksimum yang diizinkan yang ditetapkan dalam rencana validasi untuk pengujian.
CATATAN Batas kontrol yang lebih ketat mungkin diharapkan untuk pengujian tertentu yang memerlukan akurasi yang lebih baik seperti pengukuran alkohol darah untuk proses hukum (misalnya, ± 10% dari target atau nilai rata-rata yang dihitung).
9 Pertimbangan Lain untuk Evaluasi Batch
9.1 Umum
Selain mengevaluasi kalibrasi dan hasil kontrol, laboratorium harus mengevaluasi parameter lain yang penting untuk kinerja batch sampel.
9.2 Kinerja Instrumen
Laboratorium harus memiliki prosedur untuk mengevaluasi kinerja kalibrator, kontrol, dan sampel kasus selama lari analitik.
Misalnya, pengujian kromatografi dapat mencakup evaluasi waktu retensi dan bentuk puncak, sementara pengujian spektral massa dapat mencakup evaluasi rasio ion spektral massa.
Evaluasi harus cukup untuk memastikan identifikasi, deteksi, dan, jika sesuai, kuantifikasi yang tepat dari sampel dalam batch.
9.3 Pemulihan Standar Internal
Laboratorium harus memiliki prosedur untuk mengevaluasi pemulihan standar internal selama lari analitik.
Semua kalibrator, kontrol, dan spesimen kasus dalam batch harus dievaluasi berdasarkan kriteria pemulihan standar internal laboratorium.
Minimal, laboratorium harus memastikan hal berikut.
Untuk pengujian kualitatif, laboratorium harus memiliki persyaratan pemulihan minimum untuk standar internal berdasarkan kinerja pengujian.
Untuk pengujian kuantitatif, laboratorium harus menetapkan kriteria pemulihan minimum dan maksimum untuk standar internal.
CONTOH Rentang pemulihan minimum dan maksimum standar internal dapat didasarkan pada perbandingan dengan rata-rata kalibrator dalam lari analitik.
Jika pemulihan standar internal berada di luar kriteria penerimaan yang ditentukan, laboratorium harus mengambil tindakan untuk menentukan apakah kinerja pengujian berdampak negatif untuk satu atau semua sampel dalam lari analitik.
9.4 Carryover
Kecuali dikarakterisasi sepenuhnya selama validasi pengujian, carryover harus dievaluasi, sebagaimana mestinya.
Hasil dari kontrol negatif atau kosong pelarut tidak boleh mengandung analit yang menarik pada respons yang memenuhi semua kriteria pelaporan (misalnya, waktu retensi, rasio ion, dll.).
Jika beberapa kontrol negatif berturut-turut, kosong pelarut, atau sampel matriks kosong yang diekstraksi digunakan untuk mengevaluasi carryover, yang segera mendahului sampel kasus, kalibrator, atau kontrol kualitas lainnya harus memenuhi kriteria penerimaan di atas.
9.5 Pengenceran
Jika laboratorium menggunakan teknik pengenceran pada sampel kasus dalam pengujian kuantitatif, konsentrasi yang diukur dalam sampel yang diencerkan harus berada dalam rentang linier kurva kalibrasi (yaitu, antara kalibrator terendah dan tertinggi).
Faktor pengenceran kemudian harus diterapkan untuk menghitung konsentrasi. Perhitungan tersebut harus diperiksa dengan menggunakan prosedur peninjauan untuk memverifikasi matematika yang sesuai.
Selain itu, kontrol pengenceran dapat disertakan dalam setiap batch di mana sampel kasus diencerkan.
10 Metode Penambahan Standar
10.1 Umum
Metode penambahan standar (MSA) melibatkan penambahan jumlah yang berbeda yang diketahui dari analit target ke jumlah tetap sampel untuk mengkompensasi efek matriks sampel yang meningkatkan atau menekan sinyal analit.
Jika digunakan, laboratorium harus memiliki prosedur yang menjelaskan bagaimana dan kapan akan mengimplementasikan MSA termasuk yang berikut.
10.2 Kalibrasi MSA
MSA harus dilakukan menggunakan matriks sampel kasus yang tidak difortifikasi (tingkat nol) ditambah, minimal, tiga tingkat konsentrasi penambahan standar (tiga konsentrasi matriks sampel yang difortifikasi).
Standar yang digunakan harus sekitar 50%, 100%, dan 150% dari perkiraan konsentrasi sampel.
CATATAN Tingkat konsentrasi tambahan dapat ditambahkan berdasarkan perkiraan konsentrasi sampel; namun, sangat penting bahwa ada pemisahan yang cukup antara konsentrasi sampel yang tidak difortifikasi dan konsentrasi penambahan standar.
Analisis regresi linier sederhana harus diterapkan pada minimal empat tingkat sampel.
10.3 Menjatuhkan Kalibrator dalam MSA
Lihat bagian 7.3 untuk persyaratan terkait dengan menjatuhkan kalibrator.
10.4 Kriteria Penerimaan Kalibrasi MSA
Kriteria untuk penerimaan kecocokan kurva dalam MSA akan menjadi koefisien determinasi ( nilai) 0,990 atau lebih baik.
10.5 Kontrol Kualitas MSA
Larutan kalibrasi yang digunakan untuk memasukkan sampel dan membuat kurva kalibrasi harus diverifikasi sebelum atau selama penggunaan.
MSA adalah proses yang meng