Bacteriología Diagnóstica: Cocos y Bacilos

Staphylococcus

Generalidades del Género - Morfología: Cocos Gram positivos. - Bioquímica: Catalasa positivos. - Disposición: Agrupación característica en racimos.
Identificación General - Prueba de la Catalasa: Siempre resulta positiva para este género. - Prueba de la Coagulasa: Es la prueba clave para realizar la diferenciación entre Staphylococcus aureus de los otros miembros del género. - S. aureus: Coagulasa positiva (presenta tanto la forma ligada como la libre). - Estafilococos Coagulasa Negativos (SCN): Coagulasa negativa.
Prueba de Novobiocina (Diferenciación de SCN) - Staphylococcus saprophyticus: Presenta resistencia a la novobiocina con un diámetro de inhibición $\leq 17\,mm$ . - Otros SCN (S. epidermidis, S. lugdunensis): Son sensibles a la novobiocina con un diámetro de inhibición $\geq 22\,mm$ .
Características Clave por Especie - Staphylococcus aureus - Colonias: De color blanco o ligeramente amarillas, con consistencia cremosa. - Hemólisis: Presenta $\beta$ -hemólisis en agar sangre. - Fermentación: Tiene la capacidad de fermentar el manitol. - Staphylococcus epidermidis - Coagulasa: Negativa. - Novobiocina: Sensible. - Staphylococcus saprophyticus - Coagulasa: Negativa. - Novobiocina: Resistente. - Staphylococcus lugdunensis - Coagulasa: Negativa en pruebas generales, aunque existe la particularidad de que puede arrojar un resultado de coagulasa ligada positivo.

Streptococcus

Generalidades del Género - Morfología: Cocos Gram positivos. - Bioquímica: Catalasa negativos. - Disposición: Agrupación en cadenas. - Clasificación: Se basa primordialmente en los patrones de hemólisis observados en agar sangre y en diversas pruebas bioquímicas.
Identificación por Hemólisis en Agar Sangre - $\alpha$ -hemólisis: Observación de una zona verdosa alrededor de la colonia, lo cual indica una lisis incompleta de los glóbulos rojos. - $\beta$ -hemólisis: Observación de una zona clara y transparente alrededor de la colonia, indicando una lisis completa de los glóbulos rojos. - $\gamma$ -hemólisis: Ausencia total de hemólisis.
Pruebas Bioquímicas de Identificación - Prueba de Bacitracina: Streptococcus pyogenes es sensible a este antibiótico. - Prueba de SXT (Sulfametoxazol-Trimetoprim): Streptococcus pyogenes presenta resistencia. - Prueba de CAMP: Positiva para Streptococcus agalactiae; se manifiesta como un incremento de la hemólisis producida por S. aureus. - Hidrólisis de Hipurato de Sodio: Positiva para Streptococcus agalactiae, produciendo un color morado como resultado. - Susceptibilidad a Optoquina: Streptococcus pneumoniae es sensible con un diámetro de inhibición $\geq 14\,mm$ . - Solubilidad en Bilis: Streptococcus pneumoniae es positiva; las colonias son lisas y cónicas, con patrón $\alpha$ -hemolítico.
Características Clave por Especie - Streptococcus pyogenes (Estreptococo del grupo A) - Colonias: Blanquecinas, con un diámetro de $1-2\,mm$ . - Hemólisis: $\beta$ -hemolítico. - Resultados: Bacitracina sensible, SXT resistente. - Streptococcus agalactiae (Estreptococo del grupo B) - Colonias: Grisáceas con superficie brillante. - Hemólisis: $\beta$ -hemolítico, caracterizado por una zona de hemólisis estrecha. - Resultados: Hidrólisis de hipurato positiva y prueba de CAMP positiva. - Streptococcus pneumoniae - Colonias: Blanquecinas, con forma de plato, grisáceas, de superficie brillante y apariencia mucoide debido a la presencia de su cápsula. - Hemólisis: $\alpha$ -hemolítico. - Resultados: Susceptible a la optoquina y soluble en bilis.

Enterococcus spp.

Generalidades - Morfología: Cocos Gram positivos, dispuestos frecuentemente en pares o cadenas cortas. - Bioquímica: Catalasa negativos. - Hemólisis: Típicamente presentan $\alpha$ o $\gamma$ -hemólisis en agar sangre.
Identificación y Cultivo - Capacidad de crecimiento: Pueden crecer en agar con una concentración de $6.5\%$ de $NaCl$ . - Caldo Bilis-Esculina: Tienen la capacidad de hidrolizar la esculina, lo que produce un viraje a color negro en el medio. - Características de las colonias: Son grisáceas, con superficie brillante y un diámetro de entre $2-3\,mm$ .

Enterobacterias

Generalidades - Morfología: Bacilos Gram negativos. - Bioquímica: Oxidasa negativos y fermentadores de glucosa. - Relevancia: Incluyen una amplia gama tanto de patógenos como de comensales.
Identificación General en Medios de Cultivo - Agar MacConkey: Permite diferenciar según la fermentación de lactosa. - Fermentadores de lactosa: Desarrollan colonias rosas (ejemplos: E. coli, Klebsiella). - No fermentadores de lactosa: Desarrollan colonias incoloras (ejemplos: Salmonella, Shigella). - Agar EMB (Eosina Metileno Azul): - E. coli: Produce colonias con un característico brillo metálico central. - Otras enterobacterias muestran apariencias variadas.
Pruebas Bioquímicas Clave (Perfil Metabólico) - Indol: Detecta si la bacteria produce indol a partir del aminoácido triptófano. - Rojo de Metilo (RM): Identifica la fermentación mixta que genera ácidos fuertes. - Voges-Proskauer (VP): Detecta la producción de acetilcarbinol (producto de la fermentación butilenglicólica). - Citrato: Determina el uso del citrato como única fuente de carbono. - Ureasa: Detecta la hidrólisis de la urea. - Movilidad: Evalúa la capacidad de desplazamiento del microorganismo. - Producción de $H_2S$ (Sulfuro de Hidrógeno): Se observa en medios como el TSI.
Características por Género y Especie (Fermentadores y otros) - Escherichia coli - Metabolismo: Fermenta lactosa de forma rápida. - MacConkey: Colonias convexas de color rosa. - Agar EMB: Colonias planas con brillo metálico negro central. - Perfil: Indol (+), RM (+), VP (-), Citrato (-). - Klebsiella - Metabolismo: Fermentación rápida de lactosa. - Colonias: Grandes, rosas, mucoides y brillantes por la cápsula. - Ureasa: Positiva, generalmente detectable a las $24\,h$ . - K. pneumoniae: Indol (-), RM (-), VP (+), Citrato (+), Ureasa (+ a $24\,h$ ), $H_2S$ (-), Movilidad (-). - K. oxytoca: Indol (+), RM (-), VP (+), Citrato (+), Ureasa (+ a $24\,h$ ), $H_2S$ (-), Movilidad (-). - K. aerogenes: Indol (-), RM (-), VP (+), Citrato (+), Ureasa (+ a $24\,h$ ), $H_2S$ (-), Movilidad (+). - Citrobacter - Metabolismo: Fermentación lenta de lactosa. - C. koseri: $H_2S$ (-), Ureasa (+), Citrato (+). - C. freundii: $H_2S$ (+), Ureasa (variable), Citrato (+). - Enterobacter - Metabolismo: Fermentación lenta de lactosa. - E. aerogenes: Indol (+), RM (-), VP (+), Citrato (+), Ureasa (+), $H_2S$ (-), Movilidad (+). - E. cloacae: Indol (-), RM (-), VP (+), Citrato (+), Ureasa (variable), $H_2S$ (-), Movilidad (+). - Serratia marcescens - Características: Fermentador lento de lactosa. Produce un pigmento rojo característico a $25^{\circ}C$ . - Perfil: Indol (-), RM (-), VP (+), Citrato (+), Movilidad (+), Ureasa (-), $H_2S$ (-).
Bacterias No Fermentadoras de Lactosa - Salmonella - MacConkey/EMB: Colonias traslúcidas e incoloras. - Agar SS (Salmonella-Shigella): Colonias transparentes con el centro negro por la producción de $H_2S$ . - Agar XLD: Colonias transparentes con centro negro. - Perfil: Citrato (+), $H_2S$ (+). - S. enterica subsp. enterica serovar Typhi: Citrato (-), $H_2S$ (-), LIA (+), Indol (+). - Shigella - MacConkey/EMB/SS: Colonias traslúcidas e incoloras. - Agar XLD: Colonias rojas y traslúcidas. - Perfil: Generalmente indol (-), RM (+). - Proteus - Característica distintiva: Efecto "swarming" (propagación en ondas) en el agar. Colonias traslúcidas. - Diferenciación por Indol: P. mirabilis es Indol (-); P. vulgaris es Indol (+). - Prueba: Ureasa (+). - Morganella morganii - Perfil: Indol (+), RM (+), VP (-), Citrato (-), Movilidad (+), Fenilalanina (+), Ureasa (+). - Providencia - Perfil: Movilidad (+), Citrato (+), Indol (+), VP (+). Crecimiento en S/M con pigmento rosado. - P. rettgeri: Ureasa (+). - P. stuartii: Ureasa (-). - Yersinia enterocolitica - Metabolismo: Fermenta sacarosa. - MacConkey: Colonias incoloras. - Agar EMB: Colonias con brillo metálico verde. - Agar CIN (Cefsulodin-Irgasán-Novobiocina): Colonias rosas con un centro rojo-púrpura ("ojo de buey"). - Perfil: Indol (variable), RM (+), VP (+), Movilidad (+), Ureasa (+).

Bacilos Gram Negativos No Fermentadores

Generalidades - Definición: Bacilos Gram negativos que no realizan la fermentación de la lactosa. - Bioquímica: Oxidasa positivos (lo que permite distinguirlos de la mayoría de las Enterobacterias).
Pseudomonas aeruginosa - Colonias: De color gris, planas, extensibles, frecuentemente acompañadas de un pigmento verdoso. - Hemólisis: $\beta$ -hemolítico en agar sangre. - Aroma: Olor característico similar a uvas. - Perfil: Oxidasa (+), Movilidad (+).
Acinetobacter baumannii - Perfil Bioquímico: Oxidasa (-) y Movilidad (-). - TSI: Arroja un resultado A/A (aunque es un no fermentador típico, fermenta glucosa y lactosa en este medio). - Colonias: En MacConkey/EMB se observan rosadas-violáceas, convexas y con bordes irregulares.
Otros Géneros - Bordetella: Morfología de cocobacilos. Perfil: Catalasa (+), Oxidasa (+), Ureasa (-), Movilidad (-). Son no fermentadores. - Brucella: Morfología de cocobacilos. Son inmóviles (Movilidad -) y requieren medios especiales para su cultivo.

Bacilos Gram Negativos con Requisitos Especiales

Haemophilus influenzae - Morfología: Bacilos pleomórficos. - Requerimientos Nutricionales: Necesita factor X (hemina) y factor V (NAD). - Cultivo: Crece en Agar Chocolate (agar sangre calentado), formando colonias opacas y lisas. - Identificación: Catalasa (+) y Oxidasa (+).
Campylobacter jejuni - Morfología: Bacilos curvos o con forma de "S". - Condiciones: Microaerófilo. - Identificación: Oxidasa (+) y Movilidad (+).
Vibrio cholerae - Morfología: Bacilos curvos Gram negativos. - Respiración: Aerobios o anaerobios facultativos. - Cultivo: Se utiliza Agar TCBS (Tiosulfato-Citrato-Sales Biliares-Sacarosa) donde produce colonias amarillas. - Perfil: Oxidasa (+), Indol (+). En TSI muestra K/A (no fermentación de lactosa, pero con producción de $H_2S$ ).
Helicobacter pylori - Morfología: Bacilos curvos Gram negativos. - Condiciones: Microaerófilo. - Identificación: Oxidasa (+), Catalasa (+) y Ureasa (+).

Bacilos Gram Positivos

Listeria monocytogenes - Morfología: Bacilos Gram positivos cortos o cocobacilos. - Movilidad: Presenta una movilidad característica en forma de "paraguas" cuando se incuba a temperatura ambiente. - Cultivo: En Agar Sangre desarrolla colonias redondas, lisas y $\beta$ -hemolíticas. - Identificación: Oxidasa (-), Catalasa (+), Hidrólisis de esculina (+).
Corynebacterium spp. - Morfología: Bacilos Gram positivos pleomórficos, descritos frecuentemente con forma de "mazas" o con disposición de "letras chinas". - Identificación: Catalasa positivos; requieren pruebas bioquímicas específicas para la identificación de cada especie.

Actinomicetos

Mycobacterium tuberculosis - Características: Bacilos Gram positivos resistentes al alcohol y ácido (BAAR - Bacilos Ácido-Alcohol Resistentes). Son de crecimiento lento. - Cultivo: Se emplea el Agar Lowenstein-Jensen, donde forman colonias rugosas e irregulares con un aspecto similar a "migas de pan". - Identificación: Se basan en la producción de niacina y en la reducción de nitratos.

Cocos Gram Positivos Aerobios [Nota: Texto original clasifica Neisseria aquí]

Neisseria spp. - Generalidades: Realmente son cocos Gram negativos, presentándose a menudo como diplococos en forma de "grano de café". - Bioquímica: Oxidasa positivos y catalasa positivos. - Cultivo: Requieren medios enriquecidos como Agar Chocolate o Agar Thayer-Martin. - Neisseria meningitidis - Colonias: Grumosas, opacas y convexas en agar chocolate. - Metabolismo: Capacidad de producir ácido a partir de glucosa y maltosa. - Neisseria gonorrhoeae - Colonias: Lisas, húmedas, de color gris y convexas en agar Thayer-Martin. - Metabolismo: Produce ácido únicamente a partir de la glucosa.

Anaerobios

Clostridium spp. - Generalidades: Bacilos Gram positivos formadores de esporas. La tinción de Gram puede variar (pueden parecer cocobacilos o Gram negativos si las esporas están presentes). Son anaerobios estrictos.
Características Clave por Especie - Clostridium tetani - Cultivo: En caldo tioglicolato se observan esporas terminales que le dan una apariencia de "cocos de cuello de cisne". - Perfil: Movilidad (+). - Clostridium botulinum - Cultivo: Agar CBI, Agar Sangre, Agar Yema Huevo. - Perfil: Movilidad (+), Glucosa (+). - Clostridium perfringens - Cultivo: Caldo tioglicolato-CHO. - Perfil: Inmóvil (No móvil). Destaca por la producción de lecitinasa y gelatinasa. - Clostridium difficile - Cultivo: Requiere agar específico para su recuperación. - Perfil: Movilidad (+) y Gelatinasa (+).
Nota sobre Identificación de Anaerobios - La identificación precisa requiere la observación minuciosa de la morfología de las colonias en medios especializados, el uso de la tinción de Gram y la realización de pruebas bioquímicas bajo condiciones estrictas de anaerobiosis.