2.Ocena funkcji kom., NBS

Zaburzenia fagocytozy mogą być związane z … (3)

Dysfunkcją neutrofili

defektem Ig

defektem dopełniacza

Zaburzenia chemotaksji zmniejszają ilość … migrujących do ogniska zapalenia

neutroifli

Zaburzenia chemotaksji występują w: … (2)

niedoborach odp. (hiper IgE, Chediak-Higashi, zaburzenia adhezji LAD I, II)

chorobach nabytych (nerek, cukrzyca, marskość watroby, RZS)

Do oceny chemotaksji stosuje się …

Test migracji na agarozie

Test migracji w komorze boydena

Komórki, które będą chamotaksjować w teście będą …

diapedezować przez pory w filtrze

Indeks fagocytarny to …

stosunek kom. które przeszły przez filtr w obecności chemoatraktora fo liczby kom. w filtrze kontrolnym

Beztlenowe mechanizmy zabijania wew.kom.: …

proteazy lizosomalne

Tlenowe mechanizmy zabijania wew.kom.: … (2)

Kompleks oksydazy NADPH (O2>O- + ROS)

Syntaza iNOS (Arg>NO)

Kompleks NADPH wywołuje tzw. …

wybuch tlenowy

Testy do oceny fagocytozy: …

Testy pochłaniania (ile kom. żernych jest w stanie zeżreć bakterie)

Cytometria Phagotest

Przewlekła chorobę ziarniniakową powoduje … powodująca …

mutacja genów kodujących oksydazę NADPH, dyfunkcję wew.kom. zabijania bakterii w neutrofilach

Brak zdolności zabijania=większa ilość makrofagów w miejscu zakażenia

To powoduje powstawanie …

ziarniniawków

Przewlekła choroba ziarniniakowa jest chorobą … sprzężoną z …

dziedziczną

chromosomem X

Metabolizm tlenowy ocenia się testami: … (4)

PhagoBurst

Pochłaniania i redukcji NBT

Redukcji cytochromu c

Chemiluminescencji

Phagoburst:

-inkubacja krwi z opsonizowanymi bakteriami i S wskaźnikowymi

-powstają reaktywne formy tlenu

-ROS utleniają wskaźnik,

-wskaźnik emituje światło o konkretnej długości

Zaburzenie wybuchu tlenowego jest w …

Ma wyższe wartości u … i w …

chorobie ziarniniakowej

chorych po przeszczepach

AIDS

dzieci, ciężkich chorobach zakaźnych

W NBT pochłonięty … jest redukowany do …

błekit nitrotetrazoliowy (NBT)-żółty

formazanu-niebieski

Na niebiesko barwią się fagocyty, które …

pochłonęły NBT

Test NBT może być … lub …

spontaniczny, pobudzony

W teście spontanicznym prawidłowe wartości są …

W teście pobudzonym prawidłowe wartości są …

niskie (1-14%) (grzyby, bakterie)

wysokie (80-90%) (defekt metabolizmu kom.)

Do kom. cytotoksycznych należą: … (4)

CTL

NK

NKT

gamma-deltaT

Mechanizm cytotoksyczny NK zależy od …

stosunku ilościowego R aktywujących i hamujących

Testy do oceniania cytotoksyczności: … (3)

uwalniania radioaktywnego 51-Cr

MTT

cytometria

Test chromowy: … (4)

-kom. pasywnie pochłaniają 51-Cr

-kom. docelowe są lizowane przez efektorowe

-51-Cr uwalnia się do płynu

-pomiar radioaktywności płynu

MTT ocenia aktywność …

deH NADH

Test MTT:

-Redukcja MTT do formazanu

-tylko w mitochondriach żywych kom.

-dodanie efektorów zabijających docelowe

-uwolnienie formazanu

MTT redukują tylko kom. docelowe, które …

nie uległy reakcji cytotoksycznej

Im więcej formazanu powstanie, tym …

mniejsza cytotoskyczność

W cytometrii kom. apoptotoyczne wybarwia …

W cytometrii kom. nekrotycznye wybarwia …

annexin V

jodek propidyny

Cechy kom. apoptotycznych: … (4)

zmiana rozpraszania światła

utrata funkcji transportowych

utrata asymetrii fosfolipidów

degradacja DNA

Cytometryczną ocenę apoptozy stosuje się w … (4)

diagnostyka nowotworów

transplantologii

diagnostyce AIDS

diagnostyka niepłodności męskiej

Mitogeny to …

Ag pobudzające wszystkie klony lim.

Czynniki stymulujące lim.B: … (3)

mitogen szkarłatki

Lipisacharyd

Białko gronkowcowe A

Testy na proliferację:

inkorporacji [3H]-tymidyny

inkorporacji BrdU

Cytometryczna analiza CFSE

Cytometryczna analiza DNA

Tryt jest pobierany z podłoża przez kom. …

proliferujące

Potem mierzy się radioaktywność

W teście inkorporacji BrdU wykrywa się kom. proliferujące z użyciem …

Poprzez ELISA lub cytometrię

BrdU jest włączane w kom. podczas replikacji DNA w cyklach podziałowych

Ab anty-BrdU

CFSE:

-CFSE wiąże się i świeci w cytoplazmie

-kom. potomne posiadają 2x mniej CFSE

-na histogramie powstają różne szczyty odpowiadające różnym c CFSE

Kom. proliferujące są po … stronie

Kom. nieproliferujące są po … stronie

lewej

prawej

Testy na produkcję cytokin: … (5)

cytometria

ELISPOT

ELISA

Western-Blot

CBA (cytometric bead array)